Биодоступность белков из растительных рационов

Это исследование разделено на 4 этапа. Первая фаза: Сельское хозяйство (1-й год) Описание участка: Эксперимент будет проводиться на экспериментальной ферме Агентства технологий агробизнеса Сан-Паулу (APTA) в Рибейрау-Прету, Бразилия, в точке с географическими координатами 21°12'26" южной широты 47. °51'48" северной широты и средней высотой 646 м. Годовое количество осадков составляет около 1427 мм при средней максимальной и минимальной температуре 25°C и 19,3°C соответственно. Почва классифицируется как окситол с глеевым гранулометрическим составом. Культура фасоли (Phaseolus vulgaris) будет выращиваться на расстоянии 0,50 м между рядами с 12 семенами на погонный метр, а через 2 недели после цветения (цветения) подача воды будет дополнена оксидом дейтерия для экспериментального развития. Произведенное зерно будет собрано для экспериментального анализа и потребления. На экспериментальной площади будет 5000 м2 посевов фасоли обыкновенной, чтобы произвести достаточное количество зерна для проведения эксперимента. Семена будут высушены в масштабе от 1 до 10 кг сухих и отобранных семян.

Анализ состава питательных веществ (год 1) Шесть образцов по 100 г каждый будут отобраны для анализа состава питательных веществ, который будет проведен в Лаборатории питания животных Института зоотехники Университета Сан-Паулу, Бразилия. Сразу после сбора образцы продуктов будут взвешиваться и сушиться в печи с принудительной циркуляцией воздуха при температуре 65 градусов Цельсия в течение 72 часов. После этого образцы будут измельчены в мельнице с ситом с отверстиями 2 мм, и будет взята проба для анализа сухой массы, белка, эфирного экстракта, минеральной массы, энергии, кальция и фосфора в соответствии с Официальными методами анализа ( АОАС) (1996). Клетчатка будет проанализирована в нейтральном и кислом детергенте в соответствии со ссылкой Silva and Queiroz, 2005, а селен будет проанализирован в соответствии с Olson et al., 1975. Энергетический анализ будет проводиться с помощью калориметрической бомбы и экстракции жира в соответствии со ссылкой Bligh and Dyer, 1959, в Лаборатории состава питательных веществ Медицинской школы Рибейран-Прету.

Второй этап (пилотное исследование), Институт питания (2-й год) Испытуемые Для проверки метода будут набраны пятнадцать взрослых добровольцев. Критерии включения

• Здоровые небеременные взрослые в возрасте от 18 до 65 лет.
• Не принимать никаких лекарств, в том числе НПВП
• Не принимать антибиотики в течение 4 недель до начала исследования
• ИМТ в пределах 18-35
• Стабильный вес Критерии исключения
• Дети и пожилые люди (старше 65 лет)
• Беременность
• Диагноз неинфекционного или инфекционного заболевания
• Нахождение на строгой диете
• Антибиотики в течение 4 недель исследования
• Лекарства в течение 4 недель после исследования. Дизайн исследования. После одобрения проекта локальным комитетом по этике и получения подписанного информированного согласия добровольцам будет предложен пробный прием пищи с молочным белком. Тестовым белком в первую очередь будет белок цельного молока, полученный в рамках исследования с низким уровнем обогащения дейтерием. Это позволит охарактеризовать одноклеточный белок углерода-13 по сравнению с хорошо изученным животным белком, который, как известно, обладает высокой усвояемостью. Появление индикаторной аминокислоты (АА) в кровообращении (кровь, слюна, моча и дыхание также будут отобраны) и относительное появление испытуемого и эталонного белка будут приняты в качестве меры относительной биодоступности, которая может быть преобразована в абсолютную меру один раз. эталонный белок был охарактеризован. Основным измерением будет обогащение стабильными изотопами отдельных аминокислот.

Пилотное исследование фазы 1, Институт питания. Для валидации метода будут набраны пятнадцать взрослых добровольцев.

Третья фаза - у 15 детей (1-3 года, с разным нутритивным статусом) и Четвертая фаза - у 15 пожилых (старше 65 лет, с саркопенией или без саркопении).

Тестовый прием пищи 1: фасоль замачивают на 3 часа, сливают воду и варят фасоль в течение 20 минут в скороварке.

Тестовый прием пищи будет разделен использованием в течение двух недель немаркированных бобов. Тот же подход, который использовался в экспериментальном исследовании молочного белка, будет применяться для изучения биодоступности зернобобовых культур посредством одновременного сравнения с небольшим количеством одноклеточного белка, обогащенного углеродом-13, в одном и том же тестируемом корме.

Во всех группах будет проанализирована оценка потребления пищи, общего азота мочи и обогащения дейтерием белка. Четыре 24-часовых опросных анкеты будут применяться к каждому добровольцу в периоды приема тестовой пищи, чтобы проверить потребление белка и калорий. Добровольцев попросят придерживаться обычного режима питания, чтобы избежать изменений в потреблении пищи. Общий азот мочи образцов будет проанализирован методом Кьельдаля с микродиффузией аммония. Изотопное обогащение аминокислот аминокислотами будет анализироваться в образцах слюны, мочи, дыхания и крови. Углерод-13 в выдыхаемом диоксиде углерода (CO2) и дейтерий в обогащенной моче будут проанализированы в Масс-спектрометрии Медицинской школы Рибейран-Прету (FMRP-USP), Бразилия, SP.