Bioverfügbarkeit von Proteinen aus pflanzlicher Ernährung

Diese Studie ist in 4 Phasen unterteilt. Erste Phase: Landwirtschaft (Jahr 1) Standortbeschreibung: Das Experiment wird auf der Versuchsfarm der Agentur für Agribusiness-Technologie (APTA) von São Paulo in Ribeirao Preto, Brasilien, an den geografischen Koordinaten 21°12'26" S e 47 durchgeführt °51'48" N und durchschnittliche Höhe von 646 m. Die jährliche Niederschlagsmenge beträgt etwa 1427 mm, mit einer durchschnittlichen Höchst- und Tiefsttemperatur von 25 °C bzw. 19,3 °C. Der Boden wird als Oxitol mit glay Textur klassifiziert. Die Bohnenernte (Phaseolus vulgaris) wird bei 0,50 m zwischen den Reihen mit 12 Samen pro linearem Meter angebaut und 2 Wochen nach der Anthese (Blüte) wird die Wasserversorgung mit Deuteriumoxid für die experimentelle Entwicklung ergänzt. Das produzierte Getreide wird zur experimentellen Analyse und zum Verzehr geerntet. Die Versuchsfläche wird 5.000 m2 mit gewöhnlicher Bohnenernte umfassen, um eine ausreichende Menge an Körnern für den laufenden Versuch zu produzieren. Samen werden in einem Maßstab von 1 bis 10 kg getrocknete und ausgewählte Samen getrocknet.

Analyse der Nährstoffzusammensetzung (Jahr 1) Sechs Proben von jeweils 100 g werden für Analysen der Nährstoffzusammensetzung getrennt, die im Tierernährungslabor des Tierwissenschaftlichen Instituts der Universität von São Paulo, Brasilien, durchgeführt werden. Unmittelbar nach der Ernte werden die Lebensmittelproben gewogen und in einem Ofen mit Umluft bei 65 Grad Celsius während 72 Stunden getrocknet. Anschließend werden die Proben in einer Mühle mit 2-mm-Lochsieb gemahlen und eine Teilprobe zur Analyse von Trockenmasse, Eiweiß, Etherextrakt, Mineralmasse, Energie, Calcium und Phosphor nach den amtlichen Analysemethoden ( AOAC) (1996). Ballaststoffe werden in neutralen und sauren Reinigungsmitteln gemäß Referenz Silva und Queiroz, 2005, und Selen wird gemäß Olson et al., 1975, analysiert. Die Energieanalyse wird durch eine kalorimetrische Bombe und Fett durch die Extraktion gemäß der Referenz Bligh und Dyer, 1959, im Labor für Nährstoffzusammensetzung der Medizinischen Fakultät Ribeirão Preto durchgeführt.

Zweite Phase (Pilotstudie), Ernährungsinstitut (Jahr 2) Themen Fünfzehn erwachsene Freiwillige werden für die Methodenvalidierung rekrutiert. Einschlusskriterien

• Gesunde, nicht schwangere Erwachsene im Alter von 18-65 Jahren
• Keine Einnahme von Medikamenten, einschließlich NSAIDs
• Keine Einnahme von Antibiotika innerhalb von 4 Wochen der Studie
• BMI im Bereich von 18-35
• Stabiles Gewicht Ausschlusskriterien
• Kinder und Senioren (über 65)
• Schwangerschaft
• Diagnostiziert mit nicht übertragbarer oder übertragbarer Krankheit
• Unter restriktiver Diät sein
• Antibiotika innerhalb von 4 Wochen der Studie
• Medikation innerhalb von 4 Wochen nach Studienbeginn Studiendesign Nach Genehmigung des Projekts durch die lokale Ethikkommission und Erhalt der unterschriebenen Einverständniserklärung wird den Freiwilligen eine Testmahlzeit mit Milchprotein angeboten. Das Testprotein wird in erster Linie Vollmilchprotein sein, das im Rahmen der Studie mit einer geringen Deuteriumanreicherung hergestellt wird. Dies ermöglicht die Charakterisierung des einzelligen Kohlenstoff-13-Proteins gegenüber einem gut untersuchten tierischen Protein, von dem bekannt ist, dass es eine hohe Verdaulichkeit besitzt. Das Vorkommen von Tracer-Aminosäuren (AA) im Kreislauf (Blut, Speichel, Urin und Atem werden ebenfalls entnommen) und das relative Vorkommen von Test- und Referenzprotein werden als Maß für die relative Bioverfügbarkeit genommen, die einmal in ein absolutes Maß umgewandelt werden kann das Referenzprotein wurde charakterisiert. Die grundlegende Messung wird die stabile Isotopenanreicherung in einzelnen Aminosäuren sein.

Phase-1-Pilotstudie, Nutrition Institute. Fünfzehn erwachsene Freiwillige werden für die Methodenvalidierung rekrutiert.

Die dritte Phase betrifft 15 Kinder (1-3 Jahre, mit unterschiedlichem Ernährungsstatus) und die vierte Phase betrifft 15 ältere Menschen (über 65 Jahre, mit oder ohne Sarkopenie).

Testmahlzeit 1: Bohnen 3 h eingeweicht, Wasser verworfen und Bohnen 20 min im Schnellkochtopf gekocht.

Die Testmahlzeit wird durch die zweiwöchige Verwendung von nicht gekennzeichneten Bohnen getrennt. Derselbe Ansatz wie in der Pilotstudie zu Milchprotein wird angewandt, um die Bioverfügbarkeit von Körnerleguminosen durch gleichzeitigen Vergleich mit einer bescheidenen Menge an Kohlenstoff-13-angereichertem Einzellerprotein in Kombination mit derselben Testmahlzeit zu untersuchen.

Bei allen Gruppen werden die Nahrungsaufnahme, der Gesamtstickstoff im Urin und die Anreicherung von Deuterium im Protein analysiert. Vier 24-Stunden-Recall-Fragebögen werden an jedem Freiwilligen während der Zeiträume der Einnahme der Testmahlzeit angelegt, um den Protein- und Kalorienverbrauch zu überprüfen. Die Freiwilligen werden gebeten, ihre übliche Aufnahme beizubehalten, um Änderungen in der Nahrungsaufnahme zu vermeiden. Der Gesamtharnstickstoff der Proben wird nach der Kjeldahl-Methode mit Ammoniummikrodiffusion analysiert. Die verbindungsspezifische Isotopenanreicherung von Aminosäuren wird in Speichel-, Urin-, Atem- und Blutproben analysiert. Kohlenstoff-13 im Atem, Kohlendioxid (CO2) und Deuterium in der Urinanreicherung werden in der Massenspektrometrie der medizinischen Fakultät von Ribeirão Preto (FMRP-USP), Brasilien, SP, analysiert.