Kasvipohjaisista ruokavalioista peräisin olevien proteiinien hyötyosuus

Tämä tutkimus on jaettu 4 vaiheeseen. Ensimmäinen vaihe: Maatalous (vuosi 1) Paikan kuvaus: Kokeilu suoritetaan São Paulon maatalousteknologiaviraston (APTA) koetilalla Ribeirao Pretossa, Brasiliassa maantieteellisillä koordinaatteilla 21°12'26" S e 47 °51'48" N ja keskikorkeus 646 m. Vuotuinen sademäärä on noin 1427 mm, keskimääräinen enimmäislämpötila on 25 °C ja alin lämpötila 19,3 °C. Maaperä on luokiteltu oksitoliksi, jonka rakenne on harmaa. Pavun sato (Phaseolus vulgaris) kasvatetaan rivien välisellä etäisyydellä 0,50 m 12 siemenellä lineaarimetriä kohden ja 2 viikon kuluttua anthesisoinnista (kukinnasta) vesihuoltoa täydennetään deuteriumoksidilla kokeellista kehitystä varten. Tuotettu vilja korjataan kokeelliseen analyysiin ja kulutukseen. Koealueella tulee olemaan 5000 m2 tavallista papuviljaa, jotta saadaan tarpeeksi jyviä kokeen suorittamiseen. Siemenet kuivataan asteikolla 1-10 kg kuivia ja valikoituja siemeniä.

Ravinteiden koostumuksen analyysi (vuosi 1) Erotetaan kuusi 100 g:n näytettä ravintoainekoostumusanalyysejä varten, jotka suoritetaan Brasilian São Paulon yliopiston Animal Science Instituten eläinravitsemuslaboratoriossa. Heti sadonkorjuun jälkeen ruokanäytteet punnitaan ja kuivataan 72 tunnin ajan 65 celsiusasteisessa uunissa, jossa on pakkoilmakierto. Tämän jälkeen näytteet jauhetaan myllyssä, jossa on 2 mm reikäseula ja otetaan osanäyte kuivamassan, proteiinin, eetteriuutteen, kivennäismassan, energian, kalsiumin ja fosforin analysointia varten virallisten analyysimenetelmien mukaisesti ( AOAC) (1996). Kuitu analysoidaan neutraalissa ja happamassa pesuaineessa viitteen Silva ja Queiroz, 2005 mukaisesti, ja seleeni analysoidaan Olson et al., 1975 mukaan. Energia-analyysi suoritetaan kalorimetrisella pommilla ja rasvalla uuttamalla Bligh ja Dyer, 1959, Ribeirão Preton lääketieteellisen koulun ravinteiden koostumuslaboratoriossa.

Toinen vaihe (pilottitutkimus), ravitsemusinstituutti (vuosi 2) Kohteet Viisitoista aikuista vapaaehtoista rekrytoidaan menetelmän validointiin. Sisällyttämiskriteerit

• Terveet, ei-raskaana olevat aikuiset 18-65-vuotiaat
• Ei käytä mitään lääkkeitä, mukaan lukien tulehduskipulääkkeet
• Älä käytä antibiootteja 4 viikon kuluessa tutkimuksesta
• BMI välillä 18-35
• Vakaa paino Poissulkemiskriteerit
• Lapset ja vanhukset (yli 65)
• Raskaus
• Todettu tarttumaton tai tarttuva tauti
• Rajoittavan ruokavalion noudattaminen
• Antibiootit 4 viikon sisällä tutkimuksesta
• Lääkkeet 4 viikon sisällä tutkimuksesta Tutkimuksen suunnittelu Kun paikallinen eettinen toimikunta on hyväksynyt hankkeen ja saatu allekirjoitettu tietoinen suostumus, vapaaehtoisille tarjotaan maitoproteiinia sisältävää testiateriaa. Testiproteiini on ensisijaisesti täysmaitoproteiini, joka on tuotettu tutkimuksessa alhaisella deuteriumrikasteella. Tämä mahdollistaa hiili-13-yksisoluproteiinin karakterisoinnin hyvin tutkittua eläinproteiinia vastaan, jolla tiedetään olevan hyvä sulavuus. Merkkiaineaminohapon (AA) esiintyminen verenkierrossa (näytteet otetaan myös verestä, syljestä, virtsasta ja hengityksestä) sekä testi- ja vertailuproteiinin suhteellinen ulkonäkö mitataan suhteellisen biologisen hyötyosuuden mittana, joka voidaan muuntaa absoluuttiseksi mittaukseksi kerran referenssiproteiini on karakterisoitu. Perusmittaus on stabiili isotooppirikastuminen yksittäisissä aminohapoissa.

Vaiheen 1 pilottitutkimus, Nutrition Institute. Viisitoista aikuista vapaaehtoista rekrytoidaan menetelmän validointiin.

Kolmas vaihe on 15 lapsella (1-3-vuotiailla, joilla on erilainen ravitsemustila) ja neljäs vaihe on 15 iäkkäällä (yli 65-vuotiaalla sarkopeniaa tai ei sarkopeniaa).

Koeateria 1: Pavut liotetaan 3 tuntia, vesi heitetään pois ja pavut keitetään 20 minuuttia painekeittimessä.

Koe-ateria erotetaan käyttämällä leimaamattomia papuja kahden viikon ajan. Maitoproteiinin pilottitutkimuksessa käytettyä lähestymistapaa käytetään palkoviljakasvien biologisen hyötyosuuden tutkimiseen vertaamalla niitä vaatimattomaan määrään hiili-13-rikastettua yksisoluproteiinia, joka on yhdistetty samaan testiateriaan.

Kaikille ryhmille analysoidaan ruoan saannin arviointi, virtsan kokonaistyppi ja deuteriumin rikastuminen proteiinissa. Jokaiseen vapaaehtoiseen sovelletaan neljää 24 tunnin palautuskyselyä testiaterian aikana proteiinin ja kalorien kulutuksen tarkistamiseksi. Vapaaehtoisia pyydetään säilyttämään tavanomaiset ruokailunsa välttääkseen muutoksia ruoan kulutuksessa. Näytteiden virtsan kokonaistyppi analysoidaan Kjeldahl-menetelmällä ammoniummikrodiffuusiolla. Yhdistelmäspesifinen isotooppirikastuminen aminohappojen suhteen analysoidaan syljestä, virtsasta, hengitysilmasta ja verinäytteistä. Hiili-13 hengityksen hiilidioksidissa (CO2) ja deuterium virtsan rikastuksessa analysoidaan Ribeirão Preton lääketieteen massaspektrometriassa (FMRP-USP), Brasilia, SP.