A növényi alapú étrendből származó fehérjék biológiai hozzáférhetősége

Ez a tanulmány 4 fázisra oszlik. Első fázis: Mezőgazdaság (1. év) A helyszín leírása: A kísérletet a São Paulo-i Agrárgazdasági Technológiai Ügynökség (APTA) kísérleti gazdaságában hajtják végre a brazíliai Ribeirao Pretoban, a 21°12'26" S e 47 földrajzi koordinátákon. °51'48" É és átlagos tengerszint feletti magassága 646 m. Az éves csapadék mennyisége 1427 mm, az átlagos maximum- és minimumhőmérséklet 25°C, illetve 19,3°C. A talaj az oxitol besorolású, üszkös szerkezetű. A babtermést (Phaseolus vulgaris) a sorok közötti 0,50 méteres távolságban 12 vetőmaggal termesztik lineáris méterenként, majd az antézis (virágzás) után 2 héttel a vízellátást deutérium-oxiddal kiegészítik kísérleti fejlesztés céljából. A megtermelt gabonát kísérleti elemzésre és fogyasztásra takarítják be. A kísérleti területen 5.000 m2 közönséges babtermés lesz, hogy a kísérlethez elegendő mennyiségű szemet termeljenek. A magvak szárítása 1-10 kg száraz és válogatott magvakban történik.

Tápanyag-összetétel elemzése (1. év) Hat, egyenként 100 g-os mintát választanak le a tápanyag-összetétel elemzéséhez, amelyet a brazil São Paulo Egyetem Állattudományi Intézetének Takarmányozási Laboratóriumában végeznek el. Közvetlenül a betakarítás után az élelmiszermintákat lemérjük és 65 Celsius fokos, kényszerlégkeringtetésű tűzhelyen 72 órán keresztül szárítjuk. Ezt követően a mintákat 2 mm-es lyukú szitával ellátott malomban őröljük, majd részmintát veszünk száraz tömeg, fehérje, éterkivonat, ásványi anyag, energia, kalcium és foszfor elemzésére a Hivatalos Analitikai Módszerek szerint. AOAC) (1996). A rostokat semleges és savas detergensben a Silva és Queiroz (2005) referencia szerint, a szelént pedig Olson és munkatársai (1975) szerint elemzik. Az energiaelemzést kalorimetrikus bombával és zsírral végzik a Bligh és Dyer, 1959. referencia szerinti extrakcióval a Ribeirão Preto Orvosi Iskola Tápanyag-összetételi Laboratóriumában.

Második fázis (pilot vizsgálat), Táplálkozási Intézet (2. év) Alanyok Tizenöt felnőtt önkéntest vesznek fel a módszer validálására. Bevételi kritériumok

• Egészséges, nem terhes felnőttek 18-65 éves korig
• Nem szed semmilyen gyógyszert, beleértve az NSAID-okat
• Nem szed antibiotikumot a vizsgálatot követő 4 héten belül
• BMI 18-35 tartományban
• Stabil súly Kizárási kritériumok
• Gyermekek és idősek (65 év felett)
• Terhesség
• Nem fertőző vagy fertőző betegséggel diagnosztizálták
• Korlátozó diéta alatt
• Antibiotikum a vizsgálat után 4 héten belül
• Gyógyszerek a vizsgálatot követő 4 héten belül. Vizsgálati terv A projektnek a helyi etikai bizottság általi jóváhagyása és az aláírt, tájékozott beleegyezés beszerzése után az önkénteseket tejfehérje-teszttel kínálnak. A vizsgálati fehérje elsősorban a teljes tejfehérje lesz, amelyet a vizsgálat során alacsony szintű deutériumdúsítással állítanak elő. Ez lehetővé teszi a szén-13 egysejtű fehérje jellemzését egy jól tanulmányozott állati fehérjével, amelyről ismert, hogy jól emészthető. A nyomjelző aminosav (AA) megjelenése a keringésben (vérből, nyálból, vizeletből és leheletből is mintát vesznek), valamint a teszt és a referenciafehérje relatív megjelenését a relatív biohasznosulás mértékeként veszik figyelembe, amely egyszer átváltható abszolút mértékre. a referenciafehérjét jellemezték. Az alapmérés az egyes aminosavak stabil izotópdúsítása lesz.

1. fázisú kísérleti tanulmány, Táplálkozási Intézet. Tizenöt felnőtt önkéntest vesznek fel a módszer validálására.

A harmadik fázis 15 gyermeknél (1-3 éves, eltérő tápláltsági állapotú), a negyedik fázis pedig 15 idősnél (65 évnél idősebb, szarkopéniás vagy nem szarkopéniás).

1. tesztétel: babot 3 órán át áztatva, vizet kiöntve a babot 20 percig nagynyomású főzőben főzték.

A teszt étkezést két hétig jelöletlen bab felhasználásával választják el. Ugyanazt a megközelítést alkalmazzák, mint a tejfehérje kísérleti tanulmányában, a hüvelyesek biohasznosulásának tanulmányozására egy szerény mennyiségű, szénben 13-mal dúsított egysejtű fehérjével egyidejűleg történő összehasonlítás révén, amelyet ugyanabban a vizsgálati étkezésben kombináltak.

Minden csoportban elemzik a táplálékfelvételt, a vizelet teljes nitrogéntartalmát és a deutérium fehérjében való dúsítását. Négy 24 órás visszahívási kérdőívet alkalmazunk minden önkéntesre a teszt étkezés ideje alatt, hogy ellenőrizzük a fehérje- és kalóriafogyasztást. Arra kérik az önkénteseket, hogy tartsák be szokásos bevitelüket, hogy elkerüljék az élelmiszer-fogyasztás változását. A minták összes vizeletnitrogénjét a Kjeldahl-módszerrel, ammónium mikrodiffúzióval elemzik. Az aminosavak vegyületspecifikus izotópdúsítását nyál-, vizelet-, lehelet- és vérmintákban elemzik. A kilélegzett szén-dioxidban (CO2) lévő szén-13-at és a vizeletben dúsított deutériumot a Ribeirão Preto-i Tömegspektrometriai Orvostudományi Iskola (FMRP-USP), Brazília, SP elemzi.