Dissekere samlingsregler for SPET12-komplekset i pattedyrssperm

KO-musens sæd skød efterforskerne med alvorlige defekter i alle fundne rum: akrosom, kerne, midtstykke og hale. Efterforskerne fandt også, at SEPT12 co-lokaliserer og interagerer med SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 og 14 i sædceller. Interessant nok danner nogle af disse septiner filamenter med SEPT12 i celler. Baseret på disse fund antages det, at (1) Kernekomplekset af SEPT12-filament består af SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) Septin12-mutationer, genetiske varianter, da efterforskerne som haploinsufficiens forstyrrer SEPT12-filament og makrokompleks; (3) Andre SEPT'er (f.eks. SETP4, SEPT14) er også involveret i funktionaliteten af ​​SEPT12; og (4) SEPT12 makro-kompleks er kritisk for kompartmentdannelse under terminal differentiering af mandlige kønsceller. Den foreslåede undersøgelse er designet til at bekræfte ovenstående hypoteser, at dekonstruere pattedyr SEPT12-kompleks og at belyse den funktionelle betydning af Septin12-mutationer. I den foreslåede undersøgelse vil efterforskerne bruge forskellige metoder, herunder proteomik, immunfluorescensassay, co-immunpræcipitation, pull-down assay, proteindomænekortlægning og proteinkompleksfraktionering til at teste ovenstående hypotese. Efterforskerne har skabt en mus, der bærer en vigtig Septin12-mutation. I den foreslåede undersøgelse planlægger efterforskerne at slå Septin14 ud i musen. SEPT14 interagerer med SEPT12 og udtrykkes også overvejende i sædceller. Musemodellerne og forskningsværktøjerne kunne bruges til at udforske septiners rolle under spermiogenese, til at dekonstruere SEPT12-komplekset i pattedyrsæden og til at belyse den funktionelle betydning af Septin 12-mutationerne. Vores resultater kan give ny indsigt i menneskelige spermatogenese veje og har potentiale til at føre til udvikling af terapeutiske modeller for mandlig infertilitet og design af mandlige præventionsmidler.