Seziona le regole di assemblaggio del complesso SPET12 nello sperma dei mammiferi
3 ottobre 2022 aggiornato da: National Cheng-Kung University Hospital
Medici (Dipartimento di Ostetricia e Ginecologia)
Lo sperma del topo KO ha colpito i ricercatori con gravi difetti di tutti i compartimenti trovati: acrosoma, nucleo, tratto intermedio e coda.
I ricercatori hanno anche scoperto che SEPT12 co-localizza e interagisce con SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 e 14 nello sperma.
È interessante notare che alcune di queste septine formano filamenti con SEPT12 nelle cellule.
Sulla base di questi risultati, si ipotizza che (1) il complesso centrale del filamento SEPT12 sia costituito da SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) mutazioni di Septin12, varianti genetiche, poiché gli investigatori come aploinsufficienza interrompono il filamento SEPT12 e il macro-complesso; (3) Altri SEPT (ad es.
SETP4, SEPT14) sono coinvolti anche nella funzionalità di SEPT12; e (4) il macrocomplesso SEPT12 è fondamentale per la formazione del compartimento durante la differenziazione terminale delle cellule germinali maschili.
Lo studio proposto è progettato per confermare le ipotesi di cui sopra, per decostruire il complesso SEPT12 dei mammiferi e per chiarire il significato funzionale delle mutazioni di Septin12.
Nello studio proposto, i ricercatori utilizzeranno diversi metodi, tra cui proteomica, saggio di immunofluorescenza, co-immunoprecipitazione, saggio di pull-down, mappatura del dominio proteico e frazionamento del complesso proteico per testare l'ipotesi di cui sopra.
I ricercatori hanno creato un topo portatore di un'importante mutazione Septin12.
Nello studio proposto, i ricercatori hanno in programma di eliminare Septin14 nel topo.
SEPT14 interagisce con SEPT12 ed è anche prevalentemente espresso nello sperma.
I modelli murini e gli strumenti di ricerca potrebbero essere utilizzati per esplorare il ruolo delle septine durante la spermiogenesi, per decostruire il complesso SEPT12 nello sperma dei mammiferi e per chiarire il significato funzionale delle mutazioni di Septin 12.
I nostri risultati possono fornire nuove informazioni sui percorsi della spermatogenesi umana e hanno il potenziale per portare allo sviluppo di modelli terapeutici per l'infertilità maschile e alla progettazione di contraccettivi maschili.
Panoramica dello studio
Stato
Completato
Condizioni
Descrizione dettagliata
Ridondanza e intercambiabilità dei Septin I Septin 3, 4, 5, 6, 11 e 12 sono stati eliminati nel modello murino.
Sebbene SEPT4 sia abbondantemente espresso in diversi tessuti, i topi Septin4 KO hanno colpito solo i ricercatori con problemi riproduttivi maschili.
SEPT12 è espresso esclusivamente nelle cellule germinali post-meiotiche, e i topi Septin12+/- KO hanno mostrato il fallimento spermatogenetico dei ricercatori.
In uno studio, la carenza di SEPT5 ha ridotto il comportamento correlato all'ansia, aumentato l'inibizione del prepulse e ritardato l'acquisizione dell'approccio all'obiettivo ricompensato, indipendentemente dal background genetico del topo.
In un altro studio, i topi Septin3-/- e Septin5-/-non hanno mostrato alcun fenotipo evidente.
Anche il knockout di una septina espressa in modo ubiquitario, Septin6, non ha provocato fenotipi anormali.
SETP11 è espresso in modo ubiquitario e la mutazione nulla Sept11 è morta in utero.
I risultati suggeriscono la ridondanza e l'intercambiabilità di molti membri della famiglia Septin.
Tra i membri della famiglia delle septine, SEPT12 e 14 meritano un'attenzione particolare per i biologi della riproduzione perché sono espressi principalmente nei testicoli.
Tipo di studio
Osservativo
Iscrizione (Effettivo)
183
Criteri di partecipazione
I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Da 20 anni a 50 anni (Adulto)
Accetta volontari sani
Sì
Sessi ammissibili allo studio
Maschio
Metodo di campionamento
Campione di probabilità
Popolazione di studio
I partecipanti sono stati diagnosticati clinicamente mediante analisi del seme e hanno ulteriormente raccolto il normale sperma umano.
Descrizione
criterio di inclusione:
- Tutti i partecipanti hanno firmato un modulo di consenso informato scritto.
- I campioni di sperma sono stati ottenuti mediante masturbazione dopo 3-5 giorni di astinenza sessuale.
criteri di esclusione:
.Nessuno
Piano di studio
Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Perdite di SEPT12, SEPT7, SEPT6, SEPT2 e SEPT4 dall'anello spermatico di un paziente SEPT12D197N.
Lasso di tempo: 1 giorno
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La colorazione con immunofluorescenza dello sperma normale in un controllo fertile ha mostrato segnali per SEPT12 .
SEPT7, SEPT6, SEPT2 e SEPT4 (rosso) all'anello.
Vengono inoltre mostrate immagini di colorazione a fluorescenza unite con la colorazione aggiuntiva dei nuclei degli spermatozoi, nonché immagini di colorazione a fluorescenza unite con immagini in campo chiaro unite (unione BF).
Colore blu, macchia DAPI; BF, solo campo chiaro.
Barra della scala: 10 µm.
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1 giorno
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Collaboratori e investigatori
Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.
Studiare le date dei record
Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.
Studia le date principali
Inizio studio
1 agosto 2014
Completamento primario (Effettivo)
1 luglio 2017
Completamento dello studio (Effettivo)
1 luglio 2017
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
28 ottobre 2019
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
7 novembre 2019
Primo Inserito (Effettivo)
12 novembre 2019
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
4 ottobre 2022
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
3 ottobre 2022
Ultimo verificato
1 novembre 2019
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Altri numeri di identificazione dello studio
- A-ER-102-438
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