Ontleed de montageregels van het SPET12-complex in het zoogdiersperma
3 oktober 2022 bijgewerkt door: National Cheng-Kung University Hospital
Artsen (Afdeling Verloskunde en Gynaecologie)
Het sperma van de KO-muis doodde de onderzoekersd ernstige defecten van alle gevonden compartimenten: acrosoom, kern, middenstuk en staart.
De onderzoekers ontdekten ook dat SEPT12 co-lokaliseert en interageert met SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 en 14 in sperma.
Interessant is dat sommige van deze septins filamenten vormen met SEPT12 in cellen.
Op basis van deze bevindingen wordt verondersteld dat (1) het kerncomplex van SEPT12-filament bestaat uit SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) Septin12-mutaties, genetische varianten, aangezien de onderzoekers vaststellen dat haploinsufficiëntie het SEPT12-filament en het macrocomplex verstoort; (3) Andere SEPT's (bijv.
SETP4, SEPT14) zijn ook betrokken bij de functionaliteit van SEPT12; en (4) SEPT12-macrocomplex is cruciaal voor compartimentvorming tijdens terminale differentiatie van mannelijke geslachtscellen.
De voorgestelde studie is bedoeld om de bovenstaande hypothesen te bevestigen, het SEPT12-complex van zoogdieren te deconstrueren en de functionele betekenis van Septin12-mutaties op te helderen.
In de voorgestelde studie zullen de onderzoekers verschillende methoden gebruiken, waaronder proteomics, immunofluorescentie-assay, co-immunoprecipitatie, pull-down-assay, eiwitdomeinmapping en eiwitcomplexfractionering om de bovenstaande hypothese te testen.
De onderzoekers hebben een muis gemaakt met een belangrijke Septin12-mutatie.
In de voorgestelde studie zijn de onderzoekers van plan om Septin14 in de muis uit te schakelen.
SEPT14 interageert met SEPT12 en komt ook voornamelijk tot expressie in sperma.
De muismodellen en onderzoeksinstrumenten zouden kunnen worden gebruikt om de rol van septins tijdens spermiogenese te onderzoeken, om het SEPT12-complex in het sperma van zoogdieren te deconstrueren en om de functionele betekenis van de Septin 12-mutaties op te helderen.
Onze bevindingen kunnen nieuw inzicht verschaffen in de routes van menselijke spermatogenese en kunnen leiden tot de ontwikkeling van therapeutische modellen voor mannelijke onvruchtbaarheid en het ontwerp van mannelijke anticonceptiva.
Studie Overzicht
Toestand
Voltooid
Conditie
Gedetailleerde beschrijving
Redundantie en uitwisselbaarheid van Septins Septins 3, 4, 5, 6, 11 en 12 zijn uitgeschakeld in het muismodel.
Hoewel SEPT4 overvloedig tot expressie kwam in verschillende weefsels, schoten Septin4 KO-muizen alleen mannelijke reproductieve insufficiëntie toe.
SEPT12 wordt exclusief tot expressie gebracht in de post-meiotische kiemcellen, en Septin12+/- KO-muizen schoten door de onderzoekerss spermatogenetisch falen.
In één onderzoek verminderde SEPT5-deficiëntie angstgerelateerd gedrag, verhoogde prepulsremming en vertraagde verwerving van beloonde doelbenadering, onafhankelijk van genetische achtergronden van muizen.
In een andere studie vertoonden Septin3-/- en Septin5-/- muizen geen openlijke fenotypes.
Knock-out van een alomtegenwoordige septin, Septin6, resulteerde ook niet in abnormale fenotypes.
SETP11 wordt alomtegenwoordig tot expressie gebracht en de nulmutatie van Sept11 stierf in utero.
De bevindingen suggereren redundantie en uitwisselbaarheid van veel septin-familieleden.
Onder de septin-familieleden verdienen SEPT12 en 14 misschien speciale aandacht voor de voortplantingsbiologen omdat ze voornamelijk tot uiting komen in de testis.
Studietype
Observationeel
Inschrijving (Werkelijk)
183
Deelname Criteria
Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
20 jaar tot 50 jaar (Volwassen)
Accepteert gezonde vrijwilligers
Ja
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Mannelijk
Bemonsteringsmethode
Kanssteekproef
Studie Bevolking
De deelnemers werden klinisch gediagnosticeerd door sperma-analyse en verzamelden verder het normale menselijke sperma.
Beschrijving
inclusiecriteria:
- Alle deelnemers ondertekenden een schriftelijk toestemmingsformulier.
- Spermamonsters werden verkregen door masturbatie na 3-5 dagen seksuele onthouding.
uitsluitingscriteria:
.Geen
Studie plan
Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Verliezen van SEPT12, SEPT7, SEPT6, SEPT2 en SEPT4 uit de sperma annulus van een SEPT12D197N patiënt.
Tijdsspanne: 1 dag
|
Immunofluorescentiekleuring van normaal sperma in een vruchtbare controle vertoonde signalen voor SEPT12.
SEPT7, SEPT6, SEPT2 en SEPT4 (rood) bij de annulus.
Ook getoond zijn samengevoegde fluorescentiekleuringsbeelden met de aanvullende kleuring van de spermakernen, evenals samengevoegde fluorescentiekleuringsbeelden met samengevoegde helderveldbeelden (BF samengevoegd).
Blauwe kleur, DAPI-vlek; BF, alleen helderveld.
Schaalbalk: 10 µm.
|
1 dag
|
Medewerkers en onderzoekers
Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.
Studie record data
Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.
Bestudeer belangrijke data
Studie start
1 augustus 2014
Primaire voltooiing (Werkelijk)
1 juli 2017
Studie voltooiing (Werkelijk)
1 juli 2017
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
28 oktober 2019
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
7 november 2019
Eerst geplaatst (Werkelijk)
12 november 2019
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
4 oktober 2022
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
3 oktober 2022
Laatst geverifieerd
1 november 2019
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Andere studie-ID-nummers
- A-ER-102-438
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .