Przeanalizuj zasady składania kompleksu SPET12 w nasieniu ssaków

Plemniki myszy KO zastrzeliły badaczy poważne defekty wszystkich stwierdzonych kompartmentów: akrosomu, jądra, wstawki i ogona. Badacze odkryli również, że SEPT12 kolokalizuje i wchodzi w interakcje z SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 i 14 w plemnikach. Co ciekawe, niektóre z tych septyn tworzą włókna z SEPT12 w komórkach. Na podstawie tych ustaleń wysunięto hipotezę, że (1) kompleks rdzenia włókna SEPT12 składa się z SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) mutacje Septin12, warianty genetyczne, jak badacze będą jako haploinsuficiency rozerwać włókno i makrokompleks SEPT12; (3) Inne SEPT (np. SETP4, SEPT14) są również zaangażowane w funkcjonalność SEPT12; oraz (4) makrokompleks SEPT12 ma kluczowe znaczenie dla tworzenia kompartmentów podczas końcowego różnicowania męskich komórek rozrodczych. Proponowane badanie ma na celu potwierdzenie powyższych hipotez, dekonstrukcję kompleksu SEPT12 ssaków oraz wyjaśnienie funkcjonalnego znaczenia mutacji Septin12. W proponowanym badaniu badacze wykorzystają różne metody, w tym proteomikę, test immunofluorescencyjny, koimmunoprecypitację, test pull-down, mapowanie domen białkowych i frakcjonowanie kompleksów białkowych, aby przetestować powyższą hipotezę. Badacze stworzyli mysz z ważną mutacją Septin12. W proponowanym badaniu badacze planują znokautować Septin14 u myszy. SEPT14 wchodzi w interakcję z SEPT12 i jest również wyrażany głównie w plemnikach. Mysie modele i narzędzia badawcze można wykorzystać do zbadania roli septyn podczas spermiogenezy, do dekonstrukcji kompleksu SEPT12 w plemnikach ssaków oraz do wyjaśnienia funkcjonalnego znaczenia mutacji septyny 12. Nasze odkrycia mogą dostarczyć nowego wglądu w szlaki spermatogenezy u ludzi i mogą potencjalnie doprowadzić do opracowania modeli terapeutycznych męskiej niepłodności i projektowania męskich środków antykoncepcyjnych.