Препарирование правил сборки комплекса SPET12 в сперме млекопитающих

Сперматозоид мыши КО показал серьезные дефекты всех обнаруженных компартментов: акросомы, ядра, средней части и хвоста. Исследователи также обнаружили, что SEPT12 совместно локализуется и взаимодействует с SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 и 14 в сперме. Интересно, что некоторые из этих септинов образуют филаменты с SEPT12 в клетках. На основании этих результатов предполагается, что (1) основной комплекс филамента SEPT12 состоит из SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) мутации Septin12, генетические варианты, как считают исследователи, как и гаплонедостаточность, разрушают филамент SEPT12 и макрокомплекс; (3) Другие SEPT (например, SETP4, SEPT14) также участвуют в работе SEPT12; и (4) макрокомплекс SEPT12 имеет решающее значение для формирования компартмента во время терминальной дифференцировки мужских половых клеток. Предлагаемое исследование предназначено для подтверждения вышеуказанных гипотез, деконструкции комплекса SEPT12 млекопитающих и выяснения функционального значения мутаций Septin12. В предлагаемом исследовании исследователи будут использовать различные методы, в том числе протеомику, иммунофлуоресцентный анализ, ко-иммунопреципитацию, пулл-даун-анализ, картирование белковых доменов и фракционирование белковых комплексов, чтобы проверить вышеуказанную гипотезу. Исследователи создали мышь, несущую важную мутацию Septin12. В предлагаемом исследовании исследователи планируют нокаутировать Septin14 у мышей. SEPT14 взаимодействует с SEPT12 и также преимущественно экспрессируется в сперме. Мышиные модели и исследовательские инструменты могут быть использованы для изучения роли септинов во время спермиогенеза, для деконструкции комплекса SEPT12 в сперме млекопитающих и для выяснения функционального значения мутаций Septin 12. Наши результаты могут дать новое представление о путях сперматогенеза человека и могут привести к разработке терапевтических моделей мужского бесплодия и разработке мужских противозачаточных средств.