Dissecar as regras de montagem do complexo SPET12 no esperma de mamífero

O esperma do camundongo KO mostrou aos investigadores defeitos graves de todos os compartimentos encontrados: acrossoma, núcleo, peça intermediária e cauda. Os investigadores também descobriram que SEPT12 co-localiza e interage com SEPT1, 2, 4, 6, 7, 10, 11 e 14 no esperma. Curiosamente, algumas dessas septinas formam filamentos com SEPT12 nas células. Com base nessas descobertas, é hipotetizado que (1) o complexo central do filamento SEPT12 consiste em SEPT12-7-6-2-2-6-7-12; (2) mutações de Septin12, variantes genéticas, como os investigadoresll como haploinsuficiência, interrompem o filamento SEPT12 e o macro-complexo; (3) Outros SEPT's (ex. SETP4, SEPT14) também estão envolvidos na funcionalidade do SEPT12; e (4) o macrocomplexo SEPT12 é crítico para a formação de compartimentos durante a diferenciação terminal de células germinativas masculinas. O estudo proposto é projetado para confirmar as hipóteses acima, para desconstruir o complexo SEPT12 de mamíferos e para elucidar o significado funcional das mutações Septin12. No estudo proposto, os investigadores usarão diferentes métodos, incluindo proteômica, ensaio de imunofluorescência, co-imunoprecipitação, ensaio pull-down, mapeamento de domínio de proteína e fracionamento de complexo de proteína para testar a hipótese acima. Os investigadores criaram um camundongo portador de uma importante mutação Septin12. No estudo proposto, os pesquisadores planejam eliminar a Septin14 no camundongo. A SEPT14 interage com a SEPT12 e também é predominantemente expressa no esperma. Os modelos de camundongos e as ferramentas de pesquisa podem ser usados ​​para explorar o papel das septinas durante a espermiogênese, para desconstruir o complexo SEPT12 no esperma de mamíferos e para elucidar o significado funcional das mutações da Septina 12. Nossas descobertas podem fornecer novas informações sobre os caminhos da espermatogênese humana e têm o potencial de levar ao desenvolvimento de modelos terapêuticos para infertilidade masculina e ao design de contraceptivos masculinos.