Adipocytokiner i endometriecancer

1. BAGGRUND

   Endometriecancer er den mest almindelige malignitet i det kvindelige kønsorgan. Det er den fjerde mest almindelige kræftsygdom i Storbritannien med omkring 9.500 nye tilfælde i 2017, hvor den nuværende livstidsrisiko er 1 ud af 36 kvinder. Antallet af kvinder diagnosticeret med endometriecancer fortsætter med at stige hvert år. Siden begyndelsen af ​​1990'erne er forekomsten af ​​livmoderkræftkræft steget med næsten tre femtedele (55%) i Storbritannien (2015-2017). Sammenhængen mellem endometriecancer og fedme er veldokumenteret. 7,5 % af alle kræfttilfælde hos kvinder i Storbritannien kan tilskrives overvægt/fedme (BMI ≥25 kg/m2). For endometriecancer stiger denne risiko til 34%. En gennemgang af metaanalyser viste, at risikoen for endometriecancer er 16 % højere pr. 5 kg taget på i voksenalderen, 29 % højere pr. 10 cm stigning i hofteomkreds og 27 % højere pr. 10 cm stigning i taljeomkreds. Denne højere risiko for endometriecancer med forhøjet BMI er til stede hos både præ- og postmenopausale kvinder. Desuden har patienter, der er overvægtige, en tendens til at have et dårligere resultat med flere følgesygdomme end deres ikke-overvægtige modparter.

   I den overvægtige og fede tilstand forringes funktionen af ​​fedtvævet, hvilket resulterer i en tilstand af kronisk inflammation. I denne inflammatoriske tilstand udskiller adipocytter og makrofager adskillige molekyler, adipokiner og inflammatoriske cytokiner, som kan fremme tumorudvikling og angiogenese og stimulere adhæsioner og migration af celler.

   De fleste implicerede adipocytokiner i tumorgenese-vejen er adiponectin, leptin, tumornekrosefaktor-a (TNF-α), Interleukin-6 (IL-6) og insulinlignende vækstfaktor 1 og 2 (IGF 1 og 2).

   Adipocytokin-relaterede signalveje er vigtige i udviklingen af ​​et inflammatorisk mikromiljø for tumorer. Denne proces menes at øge risikoen for endometriecancer ved at inducere celleproliferation og forhindre celleapoptose. Adiponectin, det mest udbredte adipokin, er blevet foreslået at have anti-angiogene, anti-inflammatoriske og anti-apoptotiske egenskaber. Forhøjede leptinniveauer i overvægtige tilstande fremmer inflammation ved at stimulere produktionen af ​​IL-6, TNFα samt IL-1 og IL-126. Leptin- og adiponectinsekretion modreguleres in vivo. En undersøgelse af Luhn et. al. har vist, at adiponectin har en omvendt sammenhæng med risikoen for endometriecancer, og leptin har en direkte sammenhæng.

   I et inflammatorisk miljø udskiller makrofager også potente proinflammatoriske cytokiner såsom TNF-a og IL-6, som er kendt for at aktivere talrige transkriptionsfaktorer, der regulerer ekspressionen af ​​gener involveret i immunresponser, anti-apoptose, angiogenese og metastase. Mekanismerne for tumorgenese menes at være involveret, er produktion af frie radikaler, der forårsager DNA-skade og svækket DNA-reparation.

   Forskning har endvidere antydet, at systemiske niveauer af insulinlignende vækstfaktor (IGF) er dysreguleret ved fedme enten på grund af øget IGF-produktion eller ved nedregulering af IGF-bindende protein (IGFBP) produktion. IGF 1 er en vækst- og proliferationspromotor og har hæmmende virkninger på celledød og er en væsentlig bidragyder i mange neoplastiske transformationer.

   Ovenstående biomarkører er fysiologisk indbyrdes forbundne og afspejler sandsynligvis et mere begrænset antal underliggende biologiske veje. Muligvis arbejder de i en synergistisk evne til at modulere risikoen for at udvikle endometriecancer. Hvis specifikke mønstre for cytokinekspression viste sig at være forudsigelige for uønskede resultater, kan de specifikke receptorer være målrettet som en terapeutisk mulighed for endometriecancer11. Ingen undersøgelse har hidtil set på alle disse markører sammen i serum- og vævsprøver fra de samme endometriecancerpatienter for at give en mere sund idé om deres effekt på tumorgenese, progression og resultat. Derfor er denne undersøgelse designet til at vurdere den prognostiske betydning af disse seks biomarkører i blodet og vævet hos endometriecancerpatienter og co-relatere niveauerne med deres BMI og tumortype efter justering for alder, paritet, rygestatus, menopausal status, brug af hormonsubstitutionsterapi (HRT)/hormonel prævention og forekomst af diabetes og hypertension.

2. RATIONAL

   Udvikling af nye biomarkører til en række forskellige anvendelser, herunder diagnose, behandlingsovervågning og prognose, er på dagsordenen for Cancer Reform Strategy og aktivt opmuntret af National Cancer Research Institute og Medical Research Council.

   At forstå, hvordan adipocytokiner påvirker risikoen for endometriecancer, kan hjælpe med at belyse biologiske mekanismer, der er vigtige for den observerede fedme-endometriecancerforening.

3. TEORITISK RAMME

   Da forekomsten af ​​endometriecancer fortsætter med at stige, er der et sundhedsmæssigt behov for en bedre diagnostisk og prognostisk tilgang.

   At studere de forskellige biomarkørniveauer i blod og kræftvæv vil sætte os i stand til at lede efter nye mål, der kan være nyttige i behandlingen og prognosen af ​​denne kræftsygdom.

   Ligeledes, hvis niveauerne af disse markører ændrer sig væsentligt efter behandlingen, kan efterforskerne undersøge, om det vil være muligt at bruge disse markører til at vurdere respons på behandlingen, da opfølgning for risiko for tilbagefald udgør en vigtig del af behandlingsprotokollen.

4. FORSKNINGSSPØRGSMÅL/MÅL:

   At vurdere forholdet mellem endometriecancer og blod- og vævsbiomarkører hos patienter, der henvises til behandling af endometriecancer til Royal Surrey NHS Foundation trust og at korrelere med fedme og tumorkarakteristika.

5. STUDIEDESIGN og METODER til DATAINDSAMLING OG DATAANALYSE

   5.1. Studere design

   Alle patienter, der henvises til Royal Surrey NHS Foundation trust med diagnosticeret livmoderkræft, vil få udleveret forskningsinformationsfolderen.

   I første omgang vil der blive sendt et invitationsbrev sammen med patienternes klinikaftalebrev for at informere dem om undersøgelsen og give dem tid til en foreløbig overvejelse af undersøgelsen.

   Patienterne vil herefter blive kontaktet i ambulatoriet efter indledende konsultation af klinikeren. De vil få udleveret en informationsfolder for deltagere, der beskriver undersøgelsens begrundelse, metodologi og analyse. Patienter, der accepterer at deltage i undersøgelsen, vil blive bedt om at underskrive en samtykkeerklæring efter forklaring.

   Demografiske data vil blive indsamlet på samme tid for at korrelere forskellige risikofaktorer forbundet med udvikling af livmoderkræft. Disse data vil blive indsamlet af:

   • En kort patientsamtale (10 minutter)
   • Patienternes lægenotater Data fra interviewet vil blive indtastet direkte i en eksisterende afdelingsdatabase for gynækologisk onkologi, som er kodeordsbeskyttet og gemt på NHS-computere. En kopi af dataproformaerne fra interviewet vil blive arkiveret i et sikkert rum i universitetsafdelingen for at muliggøre verifikation af kildedata.

   Deltagerne vil derefter få taget 30 ml (2 ½ spiseskefulde) venøst ​​blod på dagen for operationen.

   Vævsprøver fra deltagere, der gennemgår hysterektomi, vil blive indsamlet som følger: PI vil opsamle alt frisk væv (fedtvæv) direkte fra teatret før fiksering, da det ikke er nødvendigt for at etablere diagnose, og livmoderkræftvæv og lymfeknude vil blive indsamlet af PI efter histopatologisk undersøgelse fra histopatologisk afdeling efter diagnosen er stillet. Al vævsbehandling vil overholde Human Tissue Authority (HTA) retningslinjer og vil blive udført på onkologilaboratoriet i Leggett-bygningen ved University of Surrey.

   Deltagerne vil have en gentagen blodprøve (30 ml) på dag 1 efter operationen og ved deres 3 eller 6 måneders rutinemæssige efter operationen opfølgning.

   For de deltagere, der anbefales kemoterapi, vil efterforskerne også anmode om samtykke til at indsamle demografiske data på tidspunktet for konsultationen og baseline blodprøve (30 ml venøst ​​blod) før påbegyndelse af kemoterapi og efter 3. og 6. kemoterapicyklus for at vurdere eventuelle ændringer i biomarkørerne, som kan korrelere med progression eller regression af sygdommen.

   Efterforskerne vil også indhente arkivvævsblokke (af livmoderkræftpatienter, der er godkendt fra en tidligere undersøgelse til brug under en passende etisk komité godkendt forskning) for at hjælpe med at øge antallet af rekrutteringer til denne undersøgelse. Deres demografiske data med identifikationslog vil kun blive stillet til rådighed for PI for at vurdere sammenhængen mellem deres data og vævsdiagnosen under analyse.

   5.2. Prøveanalyse

   ELISA vil blive brugt til at analysere biomarkørniveauer i blodprøver.

   Til vævsanalyse vil efterforskerne opsætte et vævsmikroarray (TMA). Dette vil tillade en mere ensartet farvning af prøven til immunhistokemi uden variation af farvningsmetoden mellem prøverne. Hvert tilfælde vil blive gennemgået, og interesseområdet (tumor) vil blive markeret på objektglasset, og kerner fra interesseområderne vil blive brugt til at skabe mikroarray-blokken. Sektioner kan derefter skæres fra mikroarray-blokken og objektglas klargøres til immunfarvning. Fordelen ved at bruge denne metode er, at prøverne udsættes for de samme betingelser, mens de farves, og den samme del af en tumor kan farves pålideligt for flere markører. Vævssektioner fra TMA'en vil blive brugt til immunfarvning, og ekspressionen af ​​markørerne af interesse vil blive bedømt. Kliniske data, som er tilgængelige om tilfældene, vil derefter blive korreleret med de histologiske og immunhistokemiske score, og statistisk analyse vil blive udført.

   5.3. Dataanalyse

   Standard statistiske analytiske værktøjer vil blive brugt til at analysere dataene. Relation mellem forskellige variable vil blive søgt med odds ratio, konfidensinterval og signifikans med P værdi (

6. PRØVE OG REKRUTTERING

Potentielle deltagere vil blive identificeret i Royal Surrey NHS Foundation trust - enten set her eller henvist her og modtage hendes behandling her for diagnosticeret endometriecancer.

6.1. Prøvestørrelse

Efterforskerne vil sigte mod at rekruttere 30-60 patienter med diagnosticeret endometriecancer i undersøgelsen. Denne prøvestørrelse vil også omfatte arkiveret vævsprøve (tidligere godkendt og opbevaret i Leggett-bygningen, University of Surrey, til brug i fremtidig etisk forskning).

6.2. Rekruttering

Alle patienter set eller henvist med endometriecancer på Royal Surrey Oncology Department vil blive inviteret til at deltage i undersøgelsen.

Patienter vil ikke modtage betaling for deltagelse i undersøgelsen. Efterforskerne sigter mod at indhente alle oplysninger og prøver på tidspunktet for rutinebesøg.

6.2.1. Prøve identifikation

Patienter diagnosticeret med endometriecancer vil blive identificeret gennem gynækologisk onkologi multidisciplinært teammøde eller af gynækologisk onkologi eller medicinsk onkologi-team.

6.2.2. Samtykke

Der indhentes skriftligt samtykke, efter at patienten har modtaget deltagerinformationsfolderen og haft mulighed for at diskutere og stille spørgsmål til undersøgelsen. Der vil blive givet tid nok til formålet. Patienter skal alle have kapacitet til at give samtykke. Samtykke vil blive givet af klinikere på det gynækologiske onkologiske team. Om nødvendigt kan en oversætter eller sproglinje bruges.

Der vil også blive givet samtykke til brug af prøver (anonymiseret og opbevaret i Leggett-bygningen, University of Surrey i henhold til alle regler fra MTV) til brug i fremtidig forskning.