Adiposytokiinit kohdun limakalvon syövässä

1. TAUSTA

   Endometriumin syöpä on yleisin naisten sukupuolielinten pahanlaatuinen syöpä. Se on Yhdistyneen kuningaskunnan neljänneksi yleisin syöpä noin 9 500 uudella tapauksella vuonna 2017, ja tämänhetkinen elinikäinen riski on yksi 36 naisesta. Kohdun limakalvon syöpään diagnosoitujen naisten määrä jatkaa kasvuaan joka vuosi. 1990-luvun alusta lähtien kohdun syövän ilmaantuvuus on lisääntynyt lähes kolmella viidesosalla (55 %) Yhdistyneessä kuningaskunnassa (2015-2017). Kohdun limakalvon syövän ja liikalihavuuden välinen yhteys on hyvin dokumentoitu. 7,5 % kaikista Yhdistyneen kuningaskunnan naisten syövistä johtuu ylipainosta/lihavuudesta (BMI ≥25 kg/m2). Kohdun limakalvon syövän kohdalla tämä riski nousee 34 prosenttiin. Meta-analyysien tarkastelu osoitti, että kohdun limakalvon syövän riski on 16 % suurempi 5 kiloa kohti aikuisiässä, 29 % suurempi lantion ympärysmitan 10 senttimetriä kohti ja 27 % suurempi vyötärön ympärysmitan 10 senttimetriä kohti. Tämä korkeampi kohdun limakalvon syöpäriski kohonneella painoindeksillä on sekä ennen vaihdevuodet että postmenopausaalisilla naisilla. Lisäksi lihavilla potilailla on yleensä huonompi lopputulos ja enemmän muita sairauksia kuin ei-lihavilla potilailla.

   Ylipainoisessa ja lihavassa tilassa rasvakudoksen toiminta heikkenee ja seurauksena on krooninen tulehdustila. Tässä tulehduksellisessa tilassa adiposyytit ja makrofagit erittävät useita molekyylejä, adipokiineja ja tulehduksellisia sytokiinejä, jotka voivat edistää kasvainten kehittymistä ja angiogeneesiä sekä stimuloida solujen tarttumista ja migraatiota.

   Useimmat tuumorigeneesireittiin liittyvät adiposytokiinit ovat adiponektiini, leptiini, tuumorinekroositekijä-a (TNF-a), interleukiini-6 (IL-6) ja insuliinin kaltainen kasvutekijä 1 ja 2 (IGF 1 ja 2).

   Adiposytokiiniin liittyvät signalointireitit ovat tärkeitä kasvainten tulehduksellisen mikroympäristön kehittymisessä. Tämän prosessin uskotaan lisäävän endometriumin syövän riskiä indusoimalla solujen lisääntymistä ja estämällä solujen apoptoosia. Adiponektiinilla, yleisimmällä adipokiinilla, on ehdotettu olevan antiangiogeenisiä, anti-inflammatorisia ja anti-apoptoottisia ominaisuuksia. Lihavan tilan kohonneet leptiinitasot edistävät tulehdusta stimuloimalla IL-6:n, TNFa:n sekä IL-1:n ja IL-126:n tuotantoa. Leptiinin ja adiponektiinin eritystä säädellään vastakkaisesti in vivo. Luhn et. al. on osoittanut, että adiponektiinilla on käänteinen suhde kohdun limakalvosyövän riskiin ja leptiinillä on suora korrelaatio.

   Tulehduksellisessa ympäristössä makrofagit erittävät myös voimakkaita proinflammatorisia sytokiineja, kuten TNF-a:ta ja IL-6:ta, joiden tiedetään aktivoivan lukuisia transkriptiotekijöitä, jotka säätelevät immuunivasteisiin, apoptoosin estoon, angiogeneesiin ja metastaaseihin osallistuvien geenien ilmentymistä. Tuumorigeneesin mekanismien uskotaan liittyvän vapaiden radikaalien tuotantoon, joka aiheuttaa DNA-vaurioita ja heikentää DNA:n korjausta.

   Tutkimukset ovat lisäksi ehdottaneet, että insuliinin kaltaisen kasvutekijän (IGF) systeemiset tasot ovat epäsäännöllisiä liikalihavuudessa joko lisääntyneen IGF-tuotannon tai IGF-sitovan proteiinin (IGFBP) tuotannon vähenemisen vuoksi. IGF 1 on kasvun ja proliferaation edistäjä ja sillä on estäviä vaikutuksia solukuolemaan ja se on tärkeä tekijä monissa neoplastisissa transformaatioissa.

   Yllä olevat biomarkkerit ovat fysiologisesti yhteydessä toisiinsa ja heijastavat todennäköisesti rajoitetumpaa määrää taustalla olevia biologisia reittejä. Mahdollisesti ne toimivat synergistisesti moduloimaan endometriumin syövän kehittymisriskiä. Jos spesifisten sytokiinien ilmentymismallien havaittiin ennustavan haitallisia tuloksia, spesifiset reseptorit voidaan kohdentaa terapeuttisena vaihtoehtona kohdun limakalvon syöpää varten11. Yhdessäkään tutkimuksessa ei ole toistaiseksi tarkasteltu kaikkia näitä markkereita yhdessä samojen kohdun limakalvon syöpäpotilaiden seerumi- ja kudosnäytteissä antaakseen terveellisemmän käsityksen niiden vaikutuksesta kasvaimen syntymiseen, etenemiseen ja lopputulokseen. Siksi tämä tutkimus on suunniteltu arvioimaan näiden kuuden biomarkkerin prognostista merkitystä kohdun limakalvosyöpäpotilaiden veressä ja kudoksissa ja suhteuttamaan tasot heidän BMI:nsä ja kasvaintyypin kanssa sen jälkeen, kun ikää, pariteettia, tupakointitilaa, vaihdevuodet, hormonikorvaushoidon (HRT)/hormonaalisen ehkäisyn käyttö sekä diabeteksen ja verenpainetaudin esiintyvyys.

2. PERUSTELUT

   Uusien biomarkkereiden kehittäminen moniin eri käyttötarkoituksiin, mukaan lukien diagnoosiin, hoidon seurantaan ja ennustamiseen, on syövän uudistusstrategian asialistalla, ja Kansallinen syöväntutkimuslaitos ja lääketieteellisen tutkimusneuvoston kannustavat aktiivisesti.

   Sen ymmärtäminen, kuinka adiposytokiinit vaikuttavat kohdun limakalvon syövän riskiin, voi auttaa selvittämään biologisia mekanismeja, jotka ovat tärkeitä havaitun liikalihavuuden ja kohdun limakalvon syövän yhteydelle.

3. TEORITTINEN KEHYS

   Koska kohdun limakalvon syövän ilmaantuvuus lisääntyy jatkuvasti, terveydenhuolto tarvitsee parempaa diagnostiikkaa ja ennustetta.

   Veren ja syöpäkudoksen erilaisten biomarkkeritasojen tutkiminen antaa meille mahdollisuuden etsiä uusia kohteita, jotka voivat olla hyödyllisiä tämän syövän hoidossa ja ennustamisessa.

   Lisäksi, jos näiden merkkiaineiden tasot muuttuvat merkittävästi hoidon jälkeen, tutkijat voivat tutkia, voidaanko näitä markkereita käyttää hoitovasteen arvioimiseen, koska uusiutumisriskin seuranta on tärkeä osa hoitoprotokollaa.

4. TUTKIMUSKYSYMYKSET / TAVOITTEET:

   Arvioida kohdun limakalvosyövän ja veren ja kudosten biomarkkereiden välistä suhdetta Royal Surrey NHS Foundationille lähetetyillä potilailla kohdun limakalvon syövän hoitoon ja korreloida liikalihavuuden ja kasvaimen ominaisuuksien kanssa.

5. TUTKIMUKSEN SUUNNITTELU sekä TIETOJEN KERÄÄN JA TIETOJEN ANALYYSIMENETELMÄT

   5.1. Opintojen suunnittelu

   Kaikille potilaille, jotka lähetetään Royal Surrey NHS -säätiön luottamushenkilöön, jolla on diagnosoitu kohdun syöpä, annetaan tutkimustietolehtinen.

   Aluksi potilaiden klinikan ajanvarauskirjeen yhteydessä lähetetään kutsukirje, jossa heille kerrotaan tutkimuksesta ja annetaan aikaa tutkimuksen alustamiseen.

   Potilaita lähestytään poliklinikoilla kliinikon alustavan konsultaation jälkeen. Heille annetaan osallistujille tiedote, jossa on yksityiskohtaiset tiedot tutkimuksen perusteista, metodologiasta ja analyysistä. Potilaita, jotka suostuvat osallistumaan tutkimukseen, pyydetään allekirjoittamaan suostumuslomake selityksen jälkeen.

   Väestötietoa kerätään samanaikaisesti eri kohdun syövän kehittymiseen liittyvien riskitekijöiden korreloimiseksi. Nämä tiedot keräävät:

   • Lyhyt potilashaastattelu (10 minuuttia)
   • Potilaiden lääketieteelliset huomautukset Haastattelun tiedot syötetään suoraan olemassa olevaan gynekologisen onkologian osaston tietokantaan, joka on suojattu salasanalla ja tallennettu NHS:n tietokoneille. Kopio haastattelun dataproformeista tallennetaan yliopiston laitoksen suojattuun huoneeseen lähdetietojen tarkistamista varten.

   Osallistujilta otetaan sitten 30 ml (2 ½ ruokalusikallista) laskimoverta leikkauspäivänä.

   Kohdunpoiston saaneiden osallistujien kudosnäytteet kerätään seuraavasti: PI kerää kaikki tuoreet kudokset (rasvakudokset) suoraan teatterista ennen kiinnittämistä, koska sitä ei tarvita diagnoosin määrittämiseen ja kohdun syövän kudos ja imusolmuke keräävät PI histopatologisen tutkimuksen jälkeen histopatologian osastolta diagnoosin vahvistamisen jälkeen. Kaikessa kudoskäsittelyssä noudatetaan Human Tissue Authorityn (HTA) ohjeita, ja se suoritetaan Surreyn yliopiston Leggett-rakennuksen onkologialaboratoriossa.

   Osallistujille tehdään uusi verikoe (30 ml) ensimmäisenä päivänä leikkauksen jälkeen ja 3 tai 6 kuukauden rutiininomaisessa leikkauksen jälkeisessä seurantakäynnissä.

   Niiltä osallistujilta, joille suositellaan kemoterapiaa, tutkijat pyytävät myös suostumuksen demografisten tietojen keräämiseen konsultaation yhteydessä ja verinäytteen (30 ml laskimoverta) keräämiseen ennen kemoterapian aloittamista sekä 3. ja 6. kemoterapiasyklin jälkeen arvioidakseen mahdollisia muutoksia biomarkkereissa, jotka voi korreloida taudin etenemisen tai regression kanssa.

   Tutkijat hankkivat myös arkistoidut kudoslohkot (aiemmassa tutkimuksessa hyväksytyistä kohdun syöpäpotilaista käytettäväksi asianmukaisen eettisen komitean hyväksymän tutkimuksen aikana) auttaakseen lisäämään tähän tutkimukseen värvättyjen määrää. Heidän demografiset tiedot tunnistuslokineen asetetaan PI:n saataville vain tietojen ja kudosdiagnoosin välisen korrelaation arvioimiseksi analyysin aikana.

   5.2. Näyteanalyysi

   ELISA:ta käytetään biomarkkeripitoisuuksien määrittämiseen verinäytteistä.

   Kudosanalyysiä varten tutkijat perustavat kudosmikrosirun (TMA). Tämä mahdollistaa näytteen tasaisemman värjäyksen immunohistokemiaa varten ilman näytteiden välistä vaihtelua värjäysmenetelmässä. Jokainen tapaus tarkistetaan ja kiinnostava alue (kasvain) merkitään objektilasille ja kiinnostuksen kohteena olevien alueiden ytimiä käytetään mikrosirulohkon luomiseen. Mikrosirulohkosta voidaan sitten leikata leikkeitä ja valmistella objektilaseja immuunivärjäystä varten. Tämän menetelmän etuna on, että näytteet altistetaan samoihin olosuhteisiin värjäyksen aikana ja sama tuumorin osa voidaan värjätä luotettavasti useille markkereille. TMA:n kudosleikkeitä käytetään immuunivärjäykseen ja kiinnostuksen kohteena olevien merkkien ilmentyminen pisteytetään. Tapauksista saatavilla olevat kliiniset tiedot korreloidaan sitten histologisten ja immunohistokemiallisten pisteiden kanssa ja suoritetaan tilastollinen analyysi.

   5.3. Tietojen analysointi

   Tietojen analysointiin käytetään tavanomaisia ​​tilastollisia analyyttisiä työkaluja. Eri muuttujien välistä suhdetta etsitään kertoimella, luottamusvälillä ja merkitsevuudella P-arvolla (

6. NÄYTTE JA REKRYTOINTI

Potentiaaliset osallistujat tunnistetaan Royal Surrey NHS -säätiön säätiöstä - joko nähdään täällä tai lähetetään täällä ja jotka saavat täällä hoitoa diagnosoidusta kohdun limakalvosyövästä.

6.1. Otoskoko

Tutkijoiden tavoitteena on saada tutkimukseen mukaan 30-60 potilasta, joilla on diagnosoitu kohdun limakalvosyöpä. Tämä näytekoko sisältää myös arkistoidun kudosnäytteen (ennen luvan saanut ja tallennettu Leggett-rakennuksessa, Surreyn yliopistossa käytettäväksi tulevassa eettisessä tutkimuksessa).

6.2. Rekrytointi

Kaikki potilaat, joilla on kohdun limakalvon syöpä Royal Surreyn onkologian osastolla, kutsutaan osallistumaan tutkimukseen.

Potilaat eivät saa maksuja tutkimukseen osallistumisesta. Tutkijat pyrkivät saamaan kaikki tiedot ja näytteet rutiinikäyntien yhteydessä.

6.2.1. Näytteen tunnistaminen

Potilaat, joilla on diagnosoitu kohdun limakalvon syöpä, tunnistetaan gynekologisen onkologian monitieteisen tiimin kokouksessa tai gynekologisen onkologian tai lääketieteellisen onkologian tiimien toimesta.

6.2.2. Suostumus

Kirjallinen suostumus saadaan sen jälkeen, kun potilas on vastaanottanut osallistujaselosteen ja saanut tilaisuuden keskustella ja esittää kysymyksiä tutkimuksesta. Aikaa annetaan tarkoitukseen riittävästi. Kaikilla potilailla on oltava suostumuskyky. Suostumuksen antavat gynekologisen onkologian tiimin kliinikot. Tarvittaessa voidaan käyttää kääntäjää tai kielilinjaa.

Suostumus otetaan myös näytteiden käyttöön (anonymisoitu ja tallennettu Leggett-rakennuksessa, Surreyn yliopistossa HTA:n määräysten mukaisesti) tulevaa tutkimusta varten.