Adipocytokiner i endometriekreft

1. BAKGRUNN

   Endometriekreft er den vanligste maligniteten i kvinnens kjønnsorgan. Det er den fjerde vanligste kreften i Storbritannia med rundt 9500 nye tilfeller i 2017, nåværende livstidsrisiko er 1 av 36 kvinner. Antall kvinner diagnostisert med endometriekreft fortsetter å stige hvert år. Siden begynnelsen av 1990-tallet har forekomsten av livmorkreft økt med nesten tre femtedeler (55 %) i Storbritannia (2015-2017). Sammenhengen mellom endometriekreft og fedme er godt dokumentert. 7,5 % av alle krefttilfeller hos kvinner i Storbritannia skyldes overvekt/fedme (BMI ≥25 kg/m2). For endometriekreft øker denne risikoen til 34 %. En gjennomgang av metaanalyser viste at risikoen for endometriekreft er 16 % høyere per 5 kg økt i voksen alder, 29 % høyere per 10 cm økning i hofteomkrets og 27 % høyere per 10 cm økning i midjeomkrets. Denne høyere endometriekreftrisikoen med økt BMI er tilstede hos både pre- og postmenopausale kvinner. Dessuten har pasienter som er overvektige en tendens til å ha et dårligere resultat med flere komorbiditeter enn deres ikke-overvektige motparter.

   Ved overvekt og fedme forverres funksjonen til fettvevet, noe som resulterer i en tilstand av kronisk betennelse. I denne inflammatoriske tilstanden utskiller adipocytter og makrofager flere molekyler, adipokiner og inflammatoriske cytokiner, som kan fremme tumorutvikling og angiogenese og stimulere adhesjoner og migrering av celler.

   De fleste impliserte adipocytokiner i tumorgenese-veien er adiponektin, leptin, tumornekrosefaktor-α (TNF-α), Interleukin-6 (IL-6) og insulinlignende vekstfaktor 1 og 2 (IGF 1 og 2).

   Adipocytokinrelaterte signalveier er viktige i utviklingen av et inflammatorisk mikromiljø for svulster. Denne prosessen antas å øke risikoen for endometriekreft ved å indusere celleproliferasjon og forhindre celleapoptose. Adiponectin, det mest tallrike adipokinet, har blitt foreslått å ha anti-angiogene, anti-inflammatoriske og anti-apoptotiske egenskaper. Økte leptinnivåer i overvektig tilstand fremmer betennelse ved å stimulere produksjonen av IL-6, TNFα samt IL-1 og IL-126. Leptin- og adiponektinsekresjon motreguleres in vivo. En studie av Luhn et. al. har vist at adiponectin har en omvendt sammenheng med risikoen for endometriekreft og leptin har en direkte korrelasjon.

   I et inflammatorisk miljø utskiller makrofager også potente proinflammatoriske cytokiner som TNF-α og IL-6, som er kjent for å aktivere en rekke transkripsjonsfaktorer som regulerer ekspresjonen av gener involvert i immunresponser, anti-apoptose, angiogenese og metastase. Mekanismene for tumorgenese antas å være involvert er frie radikaler som forårsaker DNA-skade og svekket DNA-reparasjon.

   Forskning har videre antydet at systemiske nivåer av insulinlignende vekstfaktor (IGF) er dysregulert ved fedme enten på grunn av økt IGF-produksjon eller ved nedregulering av IGF-bindende protein (IGFBP) produksjon. IGF 1 er en vekst- og spredningspromotor og har hemmende effekter på celledød og er en stor bidragsyter i mange neoplastiske transformasjoner.

   De ovennevnte biomarkørene er fysiologisk beslektet og vil sannsynligvis reflektere et mer begrenset antall underliggende biologiske veier. Muligens jobber de i en synergistisk kapasitet for å modulere risikoen for å utvikle endometriekreft. Hvis spesifikke mønstre for cytokinekspresjon ble funnet å være prediktive for uønsket utfall, kan de spesifikke reseptorene bli målrettet som et terapeutisk alternativ for endometriekreft11. Ingen studie så langt har sett på alle disse markørene sammen i serum- og vevsprøvene til de samme endometriekreftpasientene for å gi en mer sunn ide om deres effekt på tumorgenese, progresjon og utfall. Derfor er denne studien designet for å vurdere den prognostiske betydningen av disse seks biomarkørene i blodet og vevet til endometriekreftpasienter og samrelatere nivåene med deres BMI og tumortype, etter justering for alder, paritet, røykestatus, menopausal status, bruk av hormonerstatningsterapi (HRT)/hormonell prevensjon, og prevalens av diabetes og hypertensjon.

2. RASIONAL

   Utvikling av nye biomarkører for en rekke bruksområder, inkludert diagnose, behandlingsovervåking og prognose, er på kreftreformstrategiens agenda og aktivt oppmuntret av National Cancer Research Institute og Medical Research Council.

   Å forstå hvordan adipocytokiner påvirker risikoen for endometriekreft kan bidra til å belyse biologiske mekanismer som er viktige for den observerte fedme-endometriekreftforeningen.

3. TEORITISK RAMMEVERK

   Ettersom forekomsten av endometriekreft fortsetter å øke, er det et helsemessig behov for en bedre diagnostisk og prognostisk tilnærming.

   Å studere de forskjellige biomarkørnivåene i blod og kreftvev vil gjøre oss i stand til å se etter nye mål som kan være nyttige i behandlingen og prognosen av denne kreften.

   Hvis nivåene av disse markørene endrer seg betydelig etter behandling, kan etterforskerne også undersøke om det vil være mulig å bruke disse markørene for å vurdere respons på behandling da oppfølging av risiko for tilbakefall utgjør en viktig del av behandlingsprotokollen.

4. FORSKNINGSSPØRSMÅL/MÅL:

   For å vurdere forholdet mellom endometriecancer og blod- og vevsbiomarkører hos pasienter henvist for endometriekreftbehandling til Royal Surrey NHS Foundation trust og for å korrelere med fedme og tumorkarakteristikker.

5. STUDIEDESIGN og METODER FOR DATAINNSAMLING OG DATAANALYSE

   5.1. Studere design

   Alle pasienter som blir henvist til Royal Surrey NHS Foundation trust med diagnostisert livmorkreft vil få utdelt forskningsinformasjonsheftet.

   I første omgang vil et invitasjonsbrev bli sendt sammen med pasientens klinikkavtalebrev for å informere dem om studien og gi dem tid til foreløpig vurdering av studien.

   Pasientene vil da bli oppsøkt i poliklinikkene etter innledende konsultasjon av kliniker. De vil få et deltakerinformasjonshefte som beskriver studiens begrunnelse, metodikk og analyse. Pasienter som samtykker i å delta i studien vil bli bedt om å signere et samtykkeskjema etter forklaring.

   Demografiske data vil bli samlet inn samtidig for å korrelere ulike risikofaktorer knyttet til utvikling av livmorkreft. Disse dataene vil bli samlet inn av:

   • Et kort pasientintervju (10 minutter)
   • Pasientenes medisinske notater Data fra intervjuet vil bli lagt direkte inn i en eksisterende avdelingsdatabase for gynekologisk onkologi som er passordbeskyttet og lagret på NHS datamaskiner. En kopi av dataproformene fra intervjuet vil bli arkivert i et sikkert rom i universitetsavdelingen for å tillate verifisering av kildedata.

   Deltakerne får deretter tatt 30 ml (2 ½ spiseskjeer) venøst ​​blod på operasjonsdagen.

   Vevsprøver fra deltakerne som gjennomgår hysterektomi vil bli samlet inn som følger: PI vil samle opp alt friskt vev (fettvev) direkte fra teater før fiksering da det ikke er nødvendig for å etablere diagnose og livmorkreftvev og lymfeknute vil bli samlet inn av PI etter histopatologisk undersøkelse fra histopatologisk avdeling etter at diagnosen er stilt. All vevsbehandling vil følge retningslinjer fra Human Tissue Authority (HTA) og vil bli utført ved Oncology-laboratoriet ved Leggett-bygningen ved University of Surrey.

   Deltakerne vil ha en gjentatt blodprøve (30 ml) på dag 1 etter operasjonen og ved deres 3 eller 6 måneders rutinemessige oppfølgingsavtale etter operasjonen.

   For de deltakerne som anbefales kjemoterapi, vil etterforskerne også be om samtykke til å samle inn demografiske data ved konsultasjonstidspunktet og baseline blodprøve (30 ml venøst ​​blod) før oppstart av kjemoterapi og etter 3. og 6. kjemoterapisyklus for å vurdere eventuelle endringer i biomarkørene som kan korrelere med progresjon eller regresjon av sykdom.

   Etterforskerne vil også skaffe arkivvevsblokker (av livmorkreftpasienter som har gitt samtykke fra en tidligere studie for bruk under en passende etikkkomité godkjent forskning) for å bidra til å øke antallet rekrutteringer til denne studien. Deres demografiske data med identifikasjonslogg vil bli gjort tilgjengelig for PI kun for å vurdere korrelasjon mellom dataene deres og vevsdiagnosen under analyse.

   5.2. Prøveanalyse

   ELISA vil bli brukt til å analysere biomarkørnivåer i blodprøver.

   For vevsanalyse vil etterforskerne sette opp et vevsmikroarray (TMA). Dette vil tillate mer enhetlig farging av prøven for immunhistokjemi uten variasjon mellom prøvene av fargemetoden. Hvert tilfelle vil bli gjennomgått, og interesseområdet (svulst) vil bli markert på lysbildet og kjerner fra interesseområdene vil bli brukt til å lage mikroarrayblokken. Seksjoner kan deretter kuttes fra mikroarrayblokken og lysbilder klargjøres for immunfarging. Fordelen med å bruke denne metoden er at prøvene utsettes for de samme forholdene mens de farges og den samme delen av en svulst kan farges pålitelig for flere markører. Vevsseksjoner fra TMA vil bli brukt for immunfarging, og uttrykket av markørene av interesse vil bli skåret. Kliniske data som er tilgjengelige på tilfellene vil da bli korrelert med de histologiske og immunhistokjemiske skårene og statistisk analyse vil bli utført.

   5.3. Dataanalyse

   Standard statistiske analyseverktøy vil bli brukt til å analysere dataene. Det vil søkes sammenheng mellom ulike variabler med oddsratio, konfidensintervall og signifikans med P-verdi (

6. PRØVE OG REKRUTTERING

Potensielle deltakere vil bli identifisert i Royal Surrey NHS Foundation trust - enten sett her eller henvist her og mottar hennes behandling her for diagnostisert endometriekreft.

6.1. Prøvestørrelse

Etterforskerne vil ha som mål å rekruttere 30-60 pasienter med diagnostisert endometriekreft i studien. Denne prøvestørrelsen vil også inkludere arkivert vevsprøve (tidligere godkjent og lagret i Leggett-bygningen, University of Surrey, for bruk i fremtidig etisk forskning).

6.2. Rekruttering

Alle pasienter som er sett eller henvist med endometriekreft ved Royal Surrey Oncology Department vil bli invitert til å delta i studien.

Pasienter vil ikke motta noen betaling for deltakelse i studien. Etterforskerne tar sikte på å innhente all informasjon og prøver ved rutinebesøk.

6.2.1. Prøveidentifikasjon

Pasienter diagnostisert med endometriekreft vil bli identifisert gjennom møtet i gynekologisk onkologi multidisiplinært team eller av teamene for gynekologisk onkologi eller medisinsk onkologi.

6.2.2. Samtykke

Skriftlig samtykke innhentes etter at pasienten har mottatt deltakerinformasjonsheftet og hatt mulighet til å diskutere og stille spørsmål om studien. Det vil bli gitt nok tid til formålet. Pasienter må alle ha kapasitet til å samtykke. Samtykke vil bli gitt av klinikere i gynekologisk onkologi-teamet. Om nødvendig kan en oversetter eller språklinje brukes.

Det vil også bli tatt samtykke for bruk av prøver (anonymisert og lagret i Leggett-bygningen, University of Surrey etter alle forskrifter fra HTA) for bruk i fremtidig forskning.