Adipocitochine nel cancro dell'endometrio

1. SFONDO

   Il cancro dell'endometrio è il tumore maligno più comune del tratto genitale femminile. È il quarto tumore più comune nel Regno Unito con circa 9.500 nuovi casi nel 2017, l'attuale rischio di vita è di 1 donna su 36. Il numero di donne con diagnosi di cancro dell'endometrio continua ad aumentare ogni anno. Dall'inizio degli anni '90, i tassi di incidenza del cancro uterino sono aumentati di quasi tre quinti (55%) nel Regno Unito (2015-2017). L'associazione tra cancro dell'endometrio e obesità è ben documentata. Il 7,5% di tutti i tumori nelle donne nel Regno Unito è attribuibile al sovrappeso/obesità (BMI ≥25 kg/m2). Per il cancro dell'endometrio, questo rischio sale al 34%. Una revisione delle meta-analisi ha mostrato che il rischio di cancro dell'endometrio è del 16% più alto per 5 kg guadagnati durante l'età adulta, del 29% più alto per 10 cm di aumento della circonferenza dell'anca e del 27% più alto per 10 cm di aumento della circonferenza della vita. Questo più alto rischio di cancro dell'endometrio con BMI elevato è presente sia nelle donne in pre- che in post-menopausa. Inoltre, i pazienti obesi tendono ad avere un esito peggiore con più comorbilità rispetto ai loro omologhi non obesi.

   Nello stato di sovrappeso e obesità la funzione del tessuto adiposo si deteriora determinando uno stato di infiammazione cronica. In questo stato infiammatorio, adipociti e macrofagi secernono diverse molecole, adipochine e citochine infiammatorie, che possono promuovere lo sviluppo del tumore e l'angiogenesi e stimolare le aderenze e la migrazione delle cellule.

   Le adipocitochine più implicate nella via della tumorigenesi sono adiponectina, leptina, fattore di necrosi tumorale-α (TNF-α), interleuchina-6 (IL-6) e fattore di crescita simile all'insulina 1 e 2 (IGF 1 e 2).

   Le vie di segnalazione correlate alle adipocitochine sono importanti nello sviluppo di un microambiente infiammatorio per i tumori. Si ritiene che questo processo aumenti il ​​rischio di cancro dell'endometrio inducendo la proliferazione cellulare e prevenendo l'apoptosi cellulare. L'adiponectina, l'adipochina più abbondante, è stata suggerita per avere proprietà anti-angiogeniche, antinfiammatorie e anti-apoptotiche. I livelli elevati di leptina nello stato di obesità promuovono l'infiammazione stimolando la produzione di IL-6, TNFα così come IL-1 e IL-126. La secrezione di leptina e adiponectina è controregolata in vivo. Uno studio di Luhn et. al. ha dimostrato che l'adiponectina ha una relazione inversa con il rischio di cancro dell'endometrio e la leptina ha una correlazione diretta.

   Inoltre, in un ambiente infiammatorio, i macrofagi secernono potenti citochine proinfiammatorie come TNF-α e IL-6, note per attivare numerosi fattori di trascrizione che regolano l'espressione di geni coinvolti nelle risposte immunitarie, anti-apoptosi, angiogenesi e metastasi. Si ritiene che i meccanismi della tumorigenesi siano coinvolti nella produzione di radicali liberi che causano danni al DNA e compromissione della riparazione del DNA.

   La ricerca ha inoltre suggerito che i livelli sistemici del fattore di crescita insulino-simile (IGF) sono disregolati nell'obesità a causa dell'aumento della produzione di IGF o della sottoregolazione della produzione di proteine ​​leganti l'IGF (IGFBP). L'IGF 1 è un promotore della crescita e della proliferazione e ha effetti inibitori sulla morte cellulare ed è un importante contributo in molte trasformazioni neoplastiche.

   I suddetti biomarcatori sono fisiologicamente correlati e probabilmente riflettono un numero più ristretto di percorsi biologici sottostanti. Forse, lavorano in sinergia per modulare il rischio di sviluppare il cancro dell'endometrio. Se si scoprisse che modelli specifici di espressione di citochine sono predittivi di esiti avversi, allora i recettori specifici potrebbero essere presi di mira come opzione terapeutica per il cancro dell'endometrio11. Nessuno studio finora ha esaminato tutti questi marcatori insieme nei campioni di siero e tessuto degli stessi pazienti con carcinoma endometriale per dare un'idea più sana del loro effetto sulla genesi, la progressione e l'esito del tumore. Pertanto, questo studio è progettato per valutare il significato prognostico di questi sei biomarcatori nel sangue e nei tessuti di pazienti con carcinoma endometriale e correlare i livelli con il loro BMI e il tipo di tumore, dopo aggiustamento per età, parità, abitudine al fumo, stato della menopausa, uso di terapia ormonale sostitutiva (HRT)/contraccezione ormonale e prevalenza di diabete e ipertensione.

2. FONDAMENTO LOGICO

   Lo sviluppo di nuovi biomarcatori per una varietà di usi tra cui diagnosi, monitoraggio del trattamento e prognosi è all'ordine del giorno della strategia di riforma del cancro ed è attivamente incoraggiato dal National Cancer Research Institute e dal Medical Research Council.

   Comprendere come le adipocitochine influenzano il rischio di cancro dell'endometrio può aiutare a chiarire i meccanismi biologici importanti per l'associazione osservata tra obesità e cancro dell'endometrio.

3. QUADRO TEORICO

   Poiché l'incidenza del cancro dell'endometrio continua ad aumentare, vi è la necessità sanitaria di un migliore approccio diagnostico e prognostico.

   Lo studio dei diversi livelli di biomarcatori nel sangue e nel tessuto canceroso ci consentirà di cercare nuovi bersagli che potrebbero essere utili nel trattamento e nella prognosi di questo tumore.

   Inoltre, se i livelli di questi marcatori cambiano in modo significativo dopo il trattamento, i ricercatori possono indagare se sarà possibile utilizzare questi marcatori per valutare la risposta al trattamento poiché il follow-up per il rischio di recidiva costituisce una parte importante del protocollo di trattamento.

4. DOMANDE / OBIETTIVI DELLA RICERCA:

   Valutare la relazione tra il cancro dell'endometrio e i biomarcatori del sangue e dei tessuti in pazienti indirizzate per la gestione del cancro dell'endometrio alla fiducia della Royal Surrey NHS Foundation e correlarla con l'obesità e le caratteristiche del tumore.

5. PROGETTAZIONE DELLO STUDIO e METODI DI RACCOLTA E ANALISI DEI DATI

   5.1. Progettazione dello studio

   Tutti i pazienti indirizzati alla fiduciaria della Royal Surrey NHS Foundation con diagnosi di cancro uterino riceveranno l'opuscolo informativo sulla ricerca.

   Inizialmente, una lettera di invito verrà inviata insieme alla lettera di nomina clinica dei pazienti per informarli dello studio e dare loro il tempo per un esame preliminare dello studio.

   I pazienti verranno quindi avvicinati negli ambulatori dopo la consultazione iniziale da parte del medico. Riceveranno un opuscolo informativo per i partecipanti che descrive in dettaglio la logica, la metodologia e l'analisi dello studio. Ai pazienti che accettano di partecipare allo studio verrà chiesto di firmare un modulo di consenso dopo la spiegazione.

   I dati demografici saranno raccolti contemporaneamente per correlare i vari fattori di rischio associati allo sviluppo del cancro uterino. Questi dati saranno raccolti da:

   • Una breve intervista al paziente (10 minuti)
   • Note mediche dei pazienti I dati del colloquio saranno inseriti direttamente in un database dipartimentale esistente per l'oncologia ginecologica, protetto da password e archiviato sui computer del SSN. Una copia dei dati proforma del colloquio sarà archiviata in una stanza protetta all'interno del dipartimento dell'Università per consentire la verifica dei dati di origine.

   I partecipanti avranno quindi 30 ml (2 cucchiai e mezzo) di sangue venoso prelevato il giorno dell'intervento.

   I campioni di tessuto dei partecipanti sottoposti a isterectomia saranno raccolti come segue: il PI raccoglierà qualsiasi tessuto fresco (tessuto adiposo) direttamente dal teatro prima del fissaggio in quanto non è necessario per stabilire la diagnosi e il tessuto tumorale uterino e il linfonodo saranno raccolti dal PI dopo l'esame istopatologico dal dipartimento di istopatologia dopo che la diagnosi è stata stabilita. Tutta la lavorazione dei tessuti aderirà alle linee guida della Human Tissue Authority (HTA) e sarà eseguita presso il laboratorio di oncologia presso l'edificio Leggett presso l'Università del Surrey.

   I partecipanti eseguiranno un esame del sangue ripetuto (30 ml) il giorno 1 dopo l'intervento e al loro appuntamento di follow-up post-operatorio di routine di 3 o 6 mesi.

   Per quei partecipanti a cui è raccomandata la chemioterapia, gli investigatori chiederanno anche il consenso per raccogliere dati demografici al momento della consultazione e del campione di sangue di base (30 ml di sangue venoso) prima di iniziare la chemioterapia e dopo il 3° e il 6° ciclo di chemioterapia per valutare eventuali cambiamenti nei biomarcatori che può essere correlato con la progressione o la regressione della malattia.

   Gli investigatori otterranno anche blocchi di tessuto d'archivio (di pazienti affetti da cancro uterino acconsentiti da uno studio precedente per l'uso durante una ricerca approvata da un comitato etico appropriato) per contribuire ad aumentare il numero di reclutamenti per questo studio. I loro dati demografici con registro di identificazione saranno messi a disposizione del PI solo per valutare la correlazione tra i loro dati e la diagnosi dei tessuti durante l'analisi.

   5.2. Analisi del campione

   ELISA sarà utilizzato per saggiare i livelli di biomarcatori nei campioni di sangue.

   Per l'analisi dei tessuti gli investigatori creeranno un microarray tissutale (TMA). Ciò consentirà una colorazione più uniforme del campione per l'immunoistochimica senza variazioni inter-campione del metodo di colorazione. Ogni caso verrà rivisto e l'area di interesse (tumore) verrà contrassegnata sul vetrino e i nuclei delle aree di interesse verranno utilizzati per creare il blocco del microarray. Le sezioni possono quindi essere tagliate dal blocco di microarray e i vetrini preparati per la colorazione immunitaria. Il vantaggio dell'utilizzo di questo metodo è che i campioni sono sottoposti alle stesse condizioni durante la colorazione e la stessa parte di un tumore può essere colorata in modo affidabile per diversi marcatori. Le sezioni di tessuto prelevate dal TMA saranno utilizzate per l'immunocolorazione e verrà valutata l'espressione dei marcatori di interesse. I dati clinici disponibili sui casi saranno poi correlati con i punteggi istologici e immunoistochimici e verranno effettuate analisi statistiche.

   5.3. Analisi dei dati

   Per analizzare i dati verranno utilizzati strumenti analitici statistici standard. La relazione tra le diverse variabili sarà ricercata con odds ratio, intervallo di confidenza e significatività con il valore P (

6. CAMPIONE E RECLUTAMENTO

I potenziali partecipanti saranno identificati nella fiducia della Royal Surrey NHS Foundation - o visti qui o indicati qui e ricevendo il suo trattamento qui per il cancro dell'endometrio diagnosticato.

6.1. Misura di prova

Gli investigatori mireranno a reclutare 30-60 pazienti con diagnosi di cancro dell'endometrio nello studio. Questa dimensione del campione includerà anche il campione di tessuto archiviato (precedentemente consentito e conservato nell'edificio Leggett, Università del Surrey, per l'uso in future ricerche etiche).

6.2. Reclutamento

Tutti i pazienti visti o indirizzati con cancro dell'endometrio presso il dipartimento di oncologia del Royal Surrey saranno invitati a partecipare allo studio.

I pazienti non riceveranno alcun pagamento per la partecipazione allo studio. Gli investigatori mirano a ottenere tutte le informazioni e i campioni al momento delle visite di routine.

6.2.1. Identificazione del campione

Le pazienti con diagnosi di cancro dell'endometrio saranno identificate attraverso l'incontro del team multidisciplinare di oncologia ginecologica o dai team di oncologia ginecologica o di oncologia medica.

6.2.2. Consenso

Il consenso scritto sarà ottenuto dopo che il paziente avrà ricevuto il foglietto illustrativo del partecipante e avrà avuto l'opportunità di discutere e porre domande sullo studio. Sarà concesso tempo sufficiente allo scopo. Tutti i pazienti devono avere la capacità di acconsentire. Il consenso sarà fornito dai medici del team di oncologia ginecologica. Se necessario, è possibile utilizzare un traduttore o una linea linguistica.

Verrà inoltre richiesto il consenso per l'uso di campioni (anonimizzati e conservati nell'edificio Leggett, Università del Surrey, seguendo tutte le normative dell'HTA) per l'utilizzo in ricerche future.