Adipocytokines dans le cancer de l'endomètre

1. CONTEXTE

   Le cancer de l'endomètre est la tumeur maligne la plus courante de l'appareil génital féminin. Il s'agit du quatrième cancer le plus répandu au Royaume-Uni avec environ 9 500 nouveaux cas en 2017, le risque actuel à vie étant de 1 femme sur 36. Le nombre de femmes diagnostiquées avec un cancer de l'endomètre continue d'augmenter chaque année. Depuis le début des années 1990, les taux d'incidence du cancer de l'utérus ont augmenté de près des trois cinquièmes (55 %) au Royaume-Uni (2015-2017). L'association entre le cancer de l'endomètre et l'obésité est bien documentée. 7,5 % de tous les cancers chez les femmes au Royaume-Uni sont attribuables au surpoids ou à l'obésité (IMC ≥ 25 kg/m2). Pour le cancer de l'endomètre, ce risque s'élève à 34 %. Un examen des méta-analyses a montré que le risque de cancer de l'endomètre est 16 % plus élevé par tranche de 5 kg gagnée à l'âge adulte, 29 % plus élevé par augmentation de 10 cm du tour de hanche et 27 % plus élevé par augmentation de 10 cm du tour de taille. Ce risque plus élevé de cancer de l'endomètre avec un IMC élevé est présent chez les femmes pré- et post-ménopausées. De plus, les patients obèses ont tendance à avoir de moins bons résultats avec plus de comorbidités que leurs homologues non obèses.

   Dans l'état de surpoids et d'obésité, la fonction du tissu adipeux se détériore entraînant un état d'inflammation chronique. Dans cet état inflammatoire, les adipocytes et les macrophages sécrètent plusieurs molécules, adipokines et cytokines inflammatoires, qui peuvent favoriser le développement tumoral et l'angiogenèse et stimuler les adhérences et la migration des cellules.

   Les adipocytokines les plus impliquées dans la voie de la tumorigenèse sont l'adiponectine, la leptine, le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), l'interleukine-6 ​​(IL-6) et les facteurs de croissance analogues à l'insuline 1 et 2 (IGF 1 et 2).

   Les voies de signalisation liées aux adipocytokines sont importantes dans le développement d'un microenvironnement inflammatoire pour les tumeurs. On pense que ce processus augmente le risque de cancer de l'endomètre en induisant la prolifération cellulaire et en empêchant l'apoptose cellulaire. Il a été suggéré que l'adiponectine, l'adipokine la plus abondante, possède des propriétés anti-angiogéniques, anti-inflammatoires et anti-apoptotiques. Des niveaux élevés de leptine dans l'état obèse favorisent l'inflammation en stimulant la production d'IL-6, de TNFα ainsi que d'IL-1 et d'IL-126. La sécrétion de leptine et d'adiponectine est contre-régulée in vivo. Une étude de Luhn et. Al. a montré que l'adiponectine avait une relation inverse avec le risque de cancer de l'endomètre et que la leptine avait une corrélation directe.

   De plus, dans un environnement inflammatoire, les macrophages sécrètent de puissantes cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF-α et l'IL-6, connues pour activer de nombreux facteurs de transcription qui régulent l'expression de gènes impliqués dans les réponses immunitaires, l'anti-apoptose, l'angiogenèse et les métastases. On pense que les mécanismes de la tumorigenèse impliqués sont la production de radicaux libres qui causent des dommages à l'ADN et une altération de la réparation de l'ADN.

   La recherche a en outre suggéré que les niveaux systémiques de facteur de croissance analogue à l'insuline (IGF) sont dérégulés dans l'obésité, soit en raison d'une production accrue d'IGF, soit par une régulation à la baisse de la production de protéine de liaison à l'IGF (IGFBP). IGF 1 est un promoteur de croissance et de prolifération et a des effets inhibiteurs sur la mort cellulaire et est un contributeur majeur dans de nombreuses transformations néoplasiques.

   Les biomarqueurs ci-dessus sont physiologiquement liés et sont susceptibles de refléter un nombre plus restreint de voies biologiques sous-jacentes. Il est possible qu'ils agissent en synergie pour moduler le risque de développer un cancer de l'endomètre. Si des modèles spécifiques d'expression de cytokines s'avéraient prédictifs d'un résultat indésirable, alors les récepteurs spécifiques pourraient être ciblés comme option thérapeutique pour le cancer de l'endomètre11. Jusqu'à présent, aucune étude n'a examiné tous ces marqueurs ensemble dans les échantillons de sérum et de tissus des mêmes patientes atteintes d'un cancer de l'endomètre pour donner une idée plus complète de leur effet sur la genèse, la progression et les résultats de la tumeur. Par conséquent, cette étude est conçue pour évaluer la signification pronostique de ces six biomarqueurs dans le sang et les tissus des patientes atteintes d'un cancer de l'endomètre et corréler les niveaux avec leur IMC et leur type de tumeur, après ajustement pour l'âge, la parité, le statut tabagique, le statut ménopausique, utilisation du traitement hormonal substitutif (THS)/contraception hormonale et prévalence du diabète et de l'hypertension.

2. RAISONNEMENT

   Le développement de nouveaux biomarqueurs pour une variété d'utilisations, y compris le diagnostic, le suivi du traitement et le pronostic, est à l'ordre du jour de la stratégie de réforme du cancer et activement encouragé par l'Institut national de recherche sur le cancer et le Conseil de la recherche médicale.

   Comprendre comment les adipocytokines influencent le risque de cancer de l'endomètre peut aider à élucider les mécanismes biologiques importants pour l'association observée entre l'obésité et le cancer de l'endomètre.

3. CADRE THEORIQUE

   Alors que l'incidence du cancer de l'endomètre continue d'augmenter, il existe un besoin sanitaire pour une meilleure approche diagnostique et pronostique.

   L'étude des différents niveaux de biomarqueurs dans le sang et les tissus cancéreux permettra de rechercher de nouvelles cibles pouvant être utiles dans le traitement et le pronostic de ce cancer.

   De plus, si les niveaux de ces marqueurs changent de manière significative après le traitement, les enquêteurs peuvent déterminer s'il sera possible d'utiliser ces marqueurs pour évaluer la réponse au traitement, car le suivi du risque de récidive constitue une partie importante du protocole de traitement.

4. QUESTIONS DE RECHERCHE / OBJECTIFS :

   Évaluer la relation entre le cancer de l'endomètre et les biomarqueurs sanguins et tissulaires chez les patientes référées pour la prise en charge du cancer de l'endomètre à la Royal Surrey NHS Foundation trust et établir une corrélation avec l'obésité et les caractéristiques tumorales.

5. CONCEPTION DE L'ÉTUDE et MÉTHODES de COLLECTE ET D'ANALYSE DES DONNÉES

   5.1. Étudier le design

   Toutes les patientes référées à la Royal Surrey NHS Foundation Trust avec un diagnostic de cancer de l'utérus recevront la brochure d'information sur la recherche.

   Dans un premier temps, une lettre d'invitation sera envoyée avec la lettre de rendez-vous à la clinique des patients pour les informer de l'étude et leur donner le temps de procéder à un examen préliminaire de l'étude.

   Les patients seront ensuite approchés dans les cliniques externes après la consultation initiale par le clinicien. Ils recevront une brochure d'information pour les participants détaillant la justification, la méthodologie et l'analyse de l'étude. Les patients qui acceptent de participer à l'étude seront invités à signer un formulaire de consentement après explication.

   Des données démographiques seront recueillies en parallèle afin de corréler différents facteurs de risque associés au développement du cancer de l'utérus. Ces données seront collectées par :

   • Une courte entrevue avec le patient (10 minutes)
   • Notes médicales des patients Les données de l'entretien seront directement entrées dans une base de données départementale existante pour l'oncologie gynécologique qui est protégée par un mot de passe et stockée sur les ordinateurs du NHS. Une copie des formulaires de données de l'entretien sera classée dans une pièce sécurisée au sein du département de l'Université pour permettre la vérification des données sources.

   Les participants auront ensuite 30 ml (2 ½ cuillères à soupe) de sang veineux prélevé le jour de la chirurgie.

   Des échantillons de tissus des participantes subissant une hystérectomie seront prélevés comme suit : l'IP prélèvera tout tissu frais (tissu adipeux) directement du théâtre avant de le fixer car il n'est pas nécessaire pour établir le diagnostic et le tissu cancéreux utérin et le ganglion lymphatique seront prélevés par le PI après examen histo-pathologique du service d'histo-pathologie après l'établissement du diagnostic. Tout le traitement des tissus respectera les directives de l'Autorité des tissus humains (HTA) et sera effectué au laboratoire d'oncologie du bâtiment Leggett de l'Université de Surrey.

   Les participants subiront une nouvelle analyse de sang (30 ml) le jour 1 après la chirurgie et lors de leur rendez-vous de suivi post-opératoire de routine de 3 ou 6 mois.

   Pour les participants à qui une chimiothérapie est recommandée, les enquêteurs demanderont également leur consentement pour collecter des données démographiques au moment de la consultation et un échantillon de sang de base (30 ml de sang veineux) avant de commencer la chimiothérapie et après les 3e et 6e cycles de chimiothérapie pour évaluer tout changement dans les biomarqueurs qui peut être corrélé à la progression ou à la régression de la maladie.

   Les chercheurs obtiendront également des blocs de tissus d'archives (de patientes atteintes d'un cancer de l'utérus ayant obtenu leur consentement lors d'une étude précédente à utiliser lors d'une recherche approuvée par un comité d'éthique approprié) pour aider à augmenter le nombre de recrutements pour cette étude. Leurs données démographiques avec journal d'identification seront mises à la disposition du PI uniquement pour évaluer la corrélation entre leurs données et le diagnostic tissulaire lors de l'analyse.

   5.2. Analyse d'échantillon

   ELISA sera utilisé pour doser les niveaux de biomarqueurs dans les échantillons de sang.

   Pour l'analyse des tissus, les enquêteurs mettront en place un microréseau de tissus (TMA). Cela permettra une coloration plus uniforme de l'échantillon pour l'immunohistochimie sans variation inter-échantillons de la méthode de coloration. Chaque cas sera examiné et la zone d'intérêt (tumeur) sera marquée sur la lame et les noyaux des zones d'intérêt seront utilisés pour créer le bloc de microréseau. Les sections peuvent ensuite être coupées du bloc de puces à ADN et des lames préparées pour la coloration immunitaire. L'avantage d'utiliser cette méthode est que les échantillons sont soumis aux mêmes conditions tout en étant colorés et la même partie d'une tumeur peut être colorée de manière fiable pour plusieurs marqueurs. Des coupes de tissus de la TMA seront utilisées pour l'immunocoloration et l'expression des marqueurs d'intérêt sera notée. Les données cliniques disponibles sur les cas seront ensuite corrélées avec les scores histologiques et immunohistochimiques et une analyse statistique sera effectuée.

   5.3. L'analyse des données

   Des outils d'analyse statistique standard seront utilisés pour analyser les données. La relation entre les différentes variables sera recherchée avec l'odds ratio, l'intervalle de confiance et la signification avec la valeur P (

6. ÉCHANTILLON ET RECRUTEMENT

Les participants potentiels seront identifiés dans la fiducie de la Royal Surrey NHS Foundation - soit vus ici, soit référés ici et recevant son traitement ici pour un cancer de l'endomètre diagnostiqué.

6.1. Taille de l'échantillon

Les chercheurs viseront à recruter 30 à 60 patientes atteintes d'un cancer de l'endomètre diagnostiqué dans l'étude. Cette taille d'échantillon comprendra également un échantillon de tissu archivé (anciennement consenti et stocké dans le bâtiment Leggett, Université de Surrey, pour une utilisation dans de futures recherches éthiques).

6.2. Recrutement

Toutes les patientes vues ou référées pour un cancer de l'endomètre au service d'oncologie de Royal Surrey seront invitées à participer à l'étude.

Les patients ne recevront aucun paiement pour leur participation à l'étude. Les enquêteurs visent à obtenir toutes les informations et tous les échantillons lors des visites de routine.

6.2.1. Identification de l'échantillon

Les patientes diagnostiquées avec un cancer de l'endomètre seront identifiées lors de la réunion de l'équipe multidisciplinaire d'oncologie gynécologique ou par les équipes d'oncologie gynécologique ou d'oncologie médicale.

6.2.2. Consentement

Le consentement écrit sera obtenu après que le patient ait reçu la notice d'information du participant et ait eu l'occasion de discuter et de poser des questions sur l'étude. Assez de temps sera accordé à cet effet. Les patients doivent tous avoir la capacité de consentir. Le consentement sera entrepris par les cliniciens de l'équipe d'oncologie gynécologique. Si nécessaire, un traducteur ou une ligne linguistique peut être utilisé.

Le consentement sera également pris pour l'utilisation d'échantillons (anonymisés et stockés dans le bâtiment Leggett, Université de Surrey conformément à toutes les réglementations de HTA) pour une utilisation dans de futures recherches.