Adipocytokines bij endometriumkanker

1. ACHTERGROND

   Endometriumkanker is de meest voorkomende maligniteit van de vrouwelijke geslachtsorganen. Het is de vierde meest voorkomende vorm van kanker in het VK met ongeveer 9.500 nieuwe gevallen in 2017, het huidige levenslange risico is 1 op de 36 vrouwen. Het aantal vrouwen met de diagnose endometriumkanker blijft elk jaar stijgen. Sinds het begin van de jaren negentig is de incidentie van baarmoederkanker in het VK met bijna drie vijfde (55%) gestegen (2015-2017). De associatie tussen endometriumkanker en obesitas is goed gedocumenteerd. 7,5% van alle kankers bij vrouwen in het VK is toe te schrijven aan overgewicht/obesitas (BMI ≥25 kg/m2). Voor endometriumkanker stijgt dit risico tot 34%. Een beoordeling van meta-analyses toonde aan dat het risico op endometriumkanker 16% hoger is per 5 kg aangekomen tijdens de volwassenheid, 29% hoger per 10 cm toename van de heupomtrek en 27% hoger per 10 cm toename van de tailleomtrek. Dit hogere risico op endometriumkanker met verhoogde BMI is aanwezig bij zowel pre- als postmenopauzale vrouwen. Bovendien hebben patiënten met obesitas vaak een slechtere uitkomst met meer comorbiditeit dan hun niet-obese tegenhangers.

   Bij overgewicht en obesitas verslechtert de functie van het vetweefsel, wat resulteert in een toestand van chronische ontsteking. In deze inflammatoire toestand scheiden adipocyten en macrofagen verschillende moleculen uit, adipokines en inflammatoire cytokines, die tumorontwikkeling en angiogenese kunnen bevorderen en adhesie en migratie van cellen kunnen stimuleren.

   Adipocytokines die het meest betrokken zijn bij het ontstaan ​​van tumoren zijn adiponectine, leptine, tumornecrosefactor-α (TNF-α), interleukine-6 ​​(IL-6) en insulineachtige groeifactor 1 en 2 (IGF 1 en 2).

   Aan adipocytokine gerelateerde signaalroutes zijn belangrijk bij de ontwikkeling van een inflammatoire micro-omgeving voor tumoren. Aangenomen wordt dat dit proces het risico op endometriumkanker verhoogt door celproliferatie te induceren en celapoptose te voorkomen. Er is gesuggereerd dat adiponectine, de meest voorkomende adipokine, anti-angiogene, ontstekingsremmende en anti-apoptotische eigenschappen heeft. Verhoogde leptinespiegels in zwaarlijvige toestand bevorderen ontstekingen door de productie van IL-6, TNFα evenals IL-1 en IL-126 te stimuleren. De secretie van leptine en adiponectine wordt in vivo tegengesteld gereguleerd. Een studie van Luhn et. al. heeft aangetoond dat adiponectine een omgekeerde relatie heeft met het risico op endometriumkanker en dat leptine een directe correlatie heeft.

   Ook scheiden macrofagen in een inflammatoire omgeving krachtige pro-inflammatoire cytokines uit, zoals TNF-α en IL-6, waarvan bekend is dat ze talrijke transcriptiefactoren activeren die de expressie reguleren van genen die betrokken zijn bij immuunresponsen, anti-apoptose, angiogenese en metastase. Aangenomen wordt dat de mechanismen van tumorigenese betrokken zijn bij de productie van vrije radicalen die DNA-schade en verstoorde DNA-reparatie veroorzaken.

   Onderzoek heeft verder gesuggereerd dat systemische niveaus van insuline-achtige groeifactor (IGF) ontregeld zijn bij obesitas, hetzij als gevolg van een verhoogde IGF-productie of door neerwaartse regulatie van de productie van IGF-bindend eiwit (IGFBP). IGF 1 is een groei- en proliferatiepromotor en heeft remmende effecten op celdood en levert een belangrijke bijdrage aan veel neoplastische transformaties.

   De bovenstaande biomarkers zijn fysiologisch met elkaar verbonden en weerspiegelen waarschijnlijk een beperkter aantal onderliggende biologische routes. Mogelijk werken ze synergetisch om het risico op het ontwikkelen van endometriumkanker te moduleren. Als specifieke patronen van cytokine-expressie voorspellend blijken te zijn voor een nadelig resultaat, kunnen de specifieke receptoren worden aangevallen als een therapeutische optie voor endometriumkanker11. Geen enkele studie heeft tot nu toe al deze markers samen in de serum- en weefselmonsters van dezelfde endometriumkankerpatiënten bekeken om een ​​beter beeld te krijgen van hun effect op het ontstaan, de progressie en het resultaat van tumoren. Daarom is deze studie opgezet om de prognostische betekenis van deze zes biomarkers in het bloed en weefsel van patiënten met endometriumkanker te beoordelen en de niveaus in verband te brengen met hun BMI en tumortype, na correctie voor leeftijd, pariteit, rookstatus, menopauzale status, gebruik van hormoonvervangingstherapie (HST)/hormonale anticonceptie, en prevalentie van diabetes en hypertensie.

2. BEOORDELING

   De ontwikkeling van nieuwe biomarkers voor uiteenlopende toepassingen, waaronder diagnose, monitoring van de behandeling en prognose, staat op de agenda van de Cancer Reform Strategy en wordt actief aangemoedigd door het National Cancer Research Institute en de Medical Research Council.

   Begrijpen hoe adipocytokines het risico op endometriumkanker beïnvloeden, kan helpen bij het ophelderen van biologische mechanismen die belangrijk zijn voor de waargenomen associatie tussen obesitas en endometriumkanker.

3. THEORITIEK KADER

   Aangezien de incidentie van endometriumkanker blijft stijgen, is er behoefte aan een betere diagnostische en prognostische aanpak.

   Door de verschillende niveaus van biomarkers in bloed en kankerweefsel te bestuderen, kunnen we zoeken naar nieuwe doelen die nuttig kunnen zijn bij de behandeling en prognose van deze kanker.

   Als de niveaus van deze markers na de behandeling aanzienlijk veranderen, kunnen de onderzoekers onderzoeken of het mogelijk zal zijn om deze markers te gebruiken om de respons op de behandeling te beoordelen, aangezien follow-up voor het risico op herhaling een belangrijk onderdeel van het behandelingsprotocol vormt.

4. ONDERZOEKSVRAGEN / DOELSTELLINGEN:

   Om de relatie tussen de endometriumkanker en bloed- en weefselbiomarkers te beoordelen bij patiënten die voor de behandeling van endometriumkanker zijn doorverwezen naar de Royal Surrey NHS Foundation trust en om te correleren met obesitas en tumorkenmerken.

5. STUDIEPLAN en METHODEN voor GEGEVENSVERZAMELING EN GEGEVENSANALYSE

   5.1. Studie ontwerp

   Alle patiënten die worden doorverwezen naar de Royal Surrey NHS Foundation trust met gediagnosticeerde baarmoederkanker, krijgen de onderzoeksinformatiefolder.

   In eerste instantie zal een uitnodigingsbrief samen met de afspraakbrief van de kliniek van de patiënt worden verzonden om hen op de hoogte te stellen van het onderzoek en hen tijd te geven voor voorbereidende overweging van het onderzoek.

   Patiënten worden dan na het eerste consult door de clinicus op de poliklinieken benaderd. Ze krijgen een informatiebrochure voor deelnemers waarin de grondgedachte, methodologie en analyse van het onderzoek worden beschreven. Patiënten die akkoord gaan met deelname aan het onderzoek zullen na uitleg worden gevraagd een toestemmingsformulier te ondertekenen.

   Tegelijkertijd zullen demografische gegevens worden verzameld om verschillende risicofactoren in verband te brengen met de ontwikkeling van baarmoederkanker. Deze gegevens worden verzameld door:

   • Een kort patiëntgesprek (10 minuten)
   • Medische aantekeningen van patiënten Gegevens van het interview worden rechtstreeks ingevoerd in een bestaande afdelingsdatabase voor gynaecologische oncologie, die met een wachtwoord is beveiligd en wordt opgeslagen op NHS-computers. Een kopie van de gegevensproforma's van het interview wordt opgeslagen in een beveiligde ruimte binnen de universitaire afdeling om verificatie van de brongegevens mogelijk te maken.

   Deelnemers zullen dan 30 ml (2 ½ eetlepel) veneus bloed laten afnemen op de dag van de operatie.

   Weefselmonsters van de deelnemers die een hysterectomie ondergaan, worden als volgt verzameld: de PI verzamelt al het verse weefsel (vetweefsel) rechtstreeks uit de operatiekamer voordat het wordt gefixeerd, aangezien het niet nodig is voor het stellen van de diagnose en het baarmoederkankerweefsel en de lymfeklieren worden verzameld door de PI na histopathologisch onderzoek van de afdeling histopathologie nadat de diagnose is gesteld. Alle weefselverwerking zal voldoen aan de richtlijnen van de Human Tissue Authority (HTA) en zal worden uitgevoerd in het oncologielaboratorium in het Leggett-gebouw aan de Universiteit van Surrey.

   De deelnemers krijgen een herhaalde bloedtest (30 ml) op dag 1 na de operatie en op hun routinematige vervolgafspraak na 3 of 6 maanden na de operatie.

   Voor die deelnemers aan wie chemotherapie wordt aanbevolen, zullen de onderzoekers ook toestemming vragen voor het verzamelen van demografische gegevens op het moment van consultatie en basisbloedmonster (30 ml veneus bloed) voordat met chemotherapie wordt begonnen en na de 3e en 6e chemotherapiecyclus om eventuele veranderingen in de biomarkers te beoordelen die kan correleren met progressie of regressie van de ziekte.

   De onderzoekers zullen ook gearchiveerde weefselblokken verkrijgen (van baarmoederkankerpatiënten die in een eerder onderzoek toestemming hebben gegeven voor gebruik tijdens een geschikt door een ethische commissie goedgekeurd onderzoek) om het aantal rekruteringen voor dit onderzoek te helpen vergroten. Hun demografische gegevens met identificatielogboek zullen alleen beschikbaar worden gesteld aan de PI om te beoordelen op correlatie tussen hun gegevens en de weefseldiagnose tijdens analyse.

   5.2. Voorbeeld analyse

   ELISA zal worden gebruikt om biomarkerniveaus in bloedmonsters te testen.

   Voor weefselanalyse zetten de onderzoekers een tissue microarray (TMA) op. Dit maakt een meer uniforme kleuring van het monster mogelijk voor immunohistochemie zonder interspecimenvariatie van de kleuringsmethode. Elk geval wordt beoordeeld en het interessegebied (tumor) wordt op het objectglaasje gemarkeerd en kernen van de interessegebieden worden gebruikt om het microarray-blok te maken. Secties kunnen vervolgens uit het microarray-blok worden gesneden en dia's kunnen worden voorbereid voor immuunkleuring. Het voordeel van het gebruik van deze methode is dat de monsters tijdens het kleuren aan dezelfde omstandigheden worden onderworpen en hetzelfde deel van een tumor betrouwbaar kan worden gekleurd voor verschillende markers. Weefselsecties van de TMA zullen worden gebruikt voor immuunkleuring en de expressie van de interessante markers zal worden gescoord. Klinische gegevens die beschikbaar zijn over de gevallen zullen vervolgens worden gecorreleerd met de histologische en immunohistochemische scores en er zal een statistische analyse worden uitgevoerd.

   5.3. Gegevens analyse

   Standaard statistische analysetools zullen worden gebruikt om de gegevens te analyseren. Relatie tussen verschillende variabelen wordt gezocht met odds ratio, betrouwbaarheidsinterval en significantie met P-waarde (

6. STEEKPROEF EN AANWERVING

Potentiële deelnemers zullen worden geïdentificeerd in het vertrouwen van de Royal Surrey NHS Foundation - hier gezien of hier verwezen en hier behandeld voor gediagnosticeerde endometriumkanker.

6.1. Steekproefgrootte

De onderzoekers zullen ernaar streven om 30-60 patiënten met gediagnosticeerde endometriumkanker in de studie te rekruteren. Deze steekproefomvang omvat ook gearchiveerd weefselmonster (voorheen goedgekeurd en opgeslagen in het Leggett-gebouw, Universiteit van Surrey, voor gebruik in toekomstig ethisch onderzoek).

6.2. Werving

Alle patiënten die worden gezien of verwezen met endometriumkanker op de oncologieafdeling van Royal Surrey zullen worden uitgenodigd om deel te nemen aan het onderzoek.

Patiënten ontvangen geen vergoeding voor deelname aan het onderzoek. De onderzoekers streven ernaar alle informatie en monsters te verkrijgen tijdens de routinebezoeken.

6.2.1. Voorbeeld identificatie

Patiënten bij wie endometriumkanker is vastgesteld, worden geïdentificeerd via de vergadering van het multidisciplinaire team Gynaecologische Oncologie of door de teams Gynaecologische Oncologie of Medische Oncologie.

6.2.2. Toestemming

Schriftelijke toestemming wordt verkregen nadat de patiënt de bijsluiter voor de deelnemer heeft ontvangen en de gelegenheid heeft gehad om te discussiëren en vragen te stellen over het onderzoek. Hiervoor zal voldoende tijd worden uitgetrokken. Patiënten moeten allemaal toestemming kunnen geven. Toestemming zal worden verleend door clinici van het gynaecologische oncologieteam. Indien nodig kan gebruik worden gemaakt van een vertaler of taallijn.

Er zal ook toestemming worden gevraagd voor het gebruik van monsters (geanonimiseerd en opgeslagen in het Leggett-gebouw, Universiteit van Surrey volgens alle voorschriften van HTA) voor gebruik in toekomstig onderzoek.