Konfokal laserendomikroskopi for at bestemme indflydelsen af ​​fødevareantigener på slimhindens integritet (RDS_CLE)

Patienter med IBS af uklar ætiologi, dvs. ikke-IgE-medierede fødevareintolerancer (FI), har ofte et langt lidelsesforløb. Det er ikke ualmindeligt, at patienter følger selvpålagte strenge diæter for at lindre fødevareafhængige tarm- og ekstraintestinale symptomer. Disse diæter indebærer dog en høj risiko for underernæring. I praksis forsøger en eliminationsdiæt efterfulgt af provokation af individuelle fødevarer at identificere udløserne af intolerancerne. Men da reaktionen på fødevareantigenerne kan forekomme med en forsinkelse, og ikke sjældent er en kombination af flere intolerancer, er den korrekte diagnose ofte vanskelig. Det medfører ofte en massivt nedsat livskvalitet for patienterne og gentagne undersøgelser, såsom gastrointestinale endoskopier, der fører til, at patienten igen bliver indlagt.

Ud over medicinske tilgange til at lindre symptomerne (medikamenter mod diarré, afføringsmidler mod forstoppelse), opnås en forbedring ofte gennem en ændring i kosten. På det seneste har der været stigende rapporter om, at patienter med IBS reagerer på en diæt, der er reduceret i FODMAP'er (fermenterbare oligo-, di- og monosaccharider samt polyoler) med en signifikant forbedring af symptomer. Patienter med IBS rapporterer desuden ofte om betydelig symptomlindring ved overholdelse af en glutenfri diæt (GFD), så de nuværende skøn tyder på, at næsten halvdelen af ​​patienter med IBS har gavn af en GFD.

Indførelsen af ​​CLE giver en ny objektiv metode til påvisning af ændringer på celleniveau. CLE'en muliggør en mikroskopisk vurdering af slimhinden allerede under den endoskopiske undersøgelse og muliggør dermed en vivo histologi, med en nøjagtig analyse af tarmslimhinden.

Andre har allerede vist, at stimulering af tarmslimhinden med fødevareantigener forårsager en øget permeabilitet og celleudskillelse hos patienter med FI (Fritscher-Ravens et al. Gastroenterologi 2014). Responsen på fødevareantigener kan visualiseres efter administration af intravenøs fluorescein og måling af frigivelsen af ​​fluorescein i tarmlumen. En stor fordel ved CLE er den direkte lokale vurdering af fødevareantigener på tarmslimhinden og identifikation af patienter, der har en klinisk relevant FI.

Hypotese: Vi foreslår, at patienter med IBS og/eller FI reagerer stærkere på slimhindepåførte fødevareantigener end raske kontroller på grund af en eksisterende lavgradig tarmbetændelse. Vi planlægger at påføre hvede, soja, mælk, gær og kyllingeæggehvide under CLE og registrere celleafgivelse og fluoresceinudstrømning i tarmlumen. Da mange patienter med IBS er kendt for at reagere positivt på en hvedefri diæt, forventer vi den stærkeste slimhinderespons især efter påføring af hvede.

Målet er at bevise vores hypotese ved den øgede celleudskillelse og den øgede efflux af fluorescein ind i tarmens lumen.

Efter CLE udtages vævsprøver til rutinemæssig histopatologisk analyse. Derudover tages slimhindebiopsier og bruges til at isolere stamceller og generere in vitro organoider. Disse organoider dyrkes og suppleres med fødevareantigener, og ændringer i proliferation, gen-, cytokin- og kemokinekspression bestemmes.

Det primære mål er

• evalueringen af ​​CLE med histopatologiske data, dette betyder bestemmelsen af ​​patienter, der har et godt match af histopatologisk bekræftet inflammation med vurderingen af ​​slimhindeforandringer bestemt i CLE
• at bestemme antallet af patienter med IBS, som har en respons eller ændring i permeabilitet efter påføring af fødevareantigener (hvede, soja, mælk, gær, kyllingæggehvide) i CLE

Sekundære mål er

• identifikation af molekylære parametre efter stimulering af in vitro organoider med fødevareantigener
• korrelationen af ​​data afledt af in vitro organoider med in vivo vurdering under CLE

Studiet er planlagt for en periode på 2 år. 40 patienter på 18 år og ældre med IBS, der har et klinisk behov for oesophagogastroduodenoskopi, f.eks. at diagnosticere IBS eller udelukke inflammatorisk tarmsygdom, gastritis, eosinofil øsofagitis eller cøliaki, vil blive inkluderet i undersøgelsen. Endvidere vil 20 raske kontrolpersoner, der kommer til forebyggende lægetjek, blive inkluderet.

Fødevareantigener påføres under oesophagogastroduodenoskopi, startende i den distale duodenum og fortsætter sekventielt til den proksimale duodenum. Anvendelsen af ​​fødevareantigener er randomiseret. Biopsierne tages efter påføring af fødevareantigenerne fra duodenalslimhinden og anvendes til histopatologisk analyse eller in vitro-generering af organoider.