Konfokal laserendomikroskopi för att bestämma inverkan av matantigener på slemhinneintegritet (RDS_CLE)

Patienter med IBS av oklar etiologi, det vill säga icke-IgE-medierade födoämnesintoleranser (FI), har ofta ett långt lidande. Det är inte ovanligt att patienter följer självpåtagna strikta dieter för att lindra matberoende tarm- och extraintestinala symtom. Dessa dieter medför dock en hög risk för undernäring. I praktiken försöker en eliminationsdiet följt av provokation av individuella livsmedel att identifiera utlösare av intoleranserna. Men eftersom reaktionen på födoämnesantigenerna kan ske med fördröjning och inte sällan en kombination av flera intoleranser förekommer, är det ofta svårt att ställa rätt diagnos. Detta leder ofta till en kraftigt försämrad livskvalitet för patienterna och upprepade undersökningar, som exempelvis gastrointestinala endoskopier, som leder till att patienten läggs in på sjukhus igen.

Förutom medicinska tillvägagångssätt för att lindra symtomen (läkemedel mot diarré, laxermedel mot förstoppning) uppnås ofta en förbättring genom en kostförändring. På senare tid har det kommit allt fler rapporter om att patienter med IBS svarar på en diet som är reducerad i FODMAPs (fermenterbara oligo-, di- och monosackarider samt polyoler) med en signifikant förbättring av symtomen. Dessutom rapporterar patienter med IBS ofta betydande symtomlindring med efterlevnad av en glutenfri diet (GFD), så att nuvarande uppskattningar tyder på att nästan hälften av patienterna med IBS drar nytta av en GFD.

Införandet av CLE ger en ny objektiv metod för att upptäcka förändringar på cellnivå. CLE möjliggör en mikroskopisk bedömning av slemhinnan redan under den endoskopiska undersökningen och möjliggör därmed en vivo histologi, med en exakt analys av tarmslemhinnan.

Andra har redan visat att stimulering av tarmslemhinnan med matantigener orsakar en ökad permeabilitet och cellavfall hos patienter med FI (Fritscher-Ravens et al. Gastroenterology 2014). Svaret på matantigener kan visualiseras efter administrering av intravenöst fluorescein och mätning av frisättningen av fluorescein i tarmlumen. En stor fördel med CLE är den direkta lokala bedömningen av matantigener på tarmslemhinnan och identifieringen av patienter som har en kliniskt relevant FI.

Hypotes: Vi föreslår att patienter med IBS och/eller FI reagerar starkare på slemhinneapplicerade matantigener än friska kontroller på grund av en befintlig låggradig tarminflammation. Vi planerar att applicera vete, soja, mjölk, jäst och kycklingäggvita under CLE och registrera cellavfall och fluoresceinutflöde i tarmlumen. Eftersom många patienter med IBS är kända för att reagera positivt på en vetefri diet, förväntar vi oss den starkaste slemhinneresponsen, särskilt efter applicering av vete.

Syftet är att bevisa vår hypotes genom det ökade cellavfallet och det ökade utflödet av fluorescein in i tarmens lumen.

Efter CLE tas vävnadsprover för rutinmässig histopatologisk analys. Dessutom tas slemhinnebiopsier och används för att isolera stamceller och generera in vitro organoider. Dessa organoider odlas och kompletteras med matantigener och förändringar i proliferation, gen, cytokin och kemokinexpression bestäms.

Det primära målet är

• utvärderingen av CLE med histopatologiska data, detta innebär bestämningen av patienter som har en god matchning av histopatologiskt bekräftad inflammation med bedömningen av slemhinneförändringar bestämda i CLE
• för att bestämma antalet patienter med IBS som har ett svar eller förändring i permeabiliteten efter applicering av matantigener (vete, soja, mjölk, jäst, kycklingäggvita) i CLE

Sekundära mål är

• identifiering av molekylära parametrar efter stimulering av in vitro organoider med livsmedelsantigener
• korrelationen mellan data som härrör från in vitro organoider med in vivo-bedömning under CLE

Studien är planerad för en period av 2 år. 40 patienter i åldern 18 år och äldre med IBS som har ett kliniskt behov av esofago-gastroduodenoskopi, t.ex. för att diagnostisera IBS eller för att utesluta inflammatorisk tarmsjukdom, gastrit, eosinofil esofagit eller celiaki, kommer att inkluderas i studien. Vidare kommer 20 friska kontrollpersoner som kommer för förebyggande läkarkontroll att inkluderas.

Matantigener appliceras under esofago-gastroduodenoskopi, med början i den distala duodenum och fortsätter sekventiellt till den proximala duodenum. Användningen av matantigener är randomiserad. Biopsierna tas efter applicering av matantigener från duodenalslemhinnan och används för histopatologisk analys eller in vitro-generering av organoider.