Endomicroscopia laser confocale per determinare l'influenza degli antigeni alimentari sull'integrità della mucosa (RDS_CLE)

I pazienti con IBS di eziologia non chiara, cioè intolleranze alimentari (FI) non IgE mediate, hanno spesso un lungo decorso di sofferenza. Non è raro che i pazienti seguano diete rigide autoimposte per alleviare i sintomi intestinali ed extraintestinali dipendenti dal cibo. Tuttavia, queste diete comportano un alto rischio di malnutrizione. In pratica, una dieta di eliminazione seguita dalla provocazione di singoli alimenti tenta di individuare i fattori scatenanti delle intolleranze. Tuttavia, poiché la reazione agli antigeni alimentari può avvenire con ritardo e non di rado è presente una combinazione di più intolleranze, la diagnosi corretta è spesso difficile. Ciò porta spesso a una qualità di vita notevolmente ridotta per i pazienti e ripetuti esami, come le endoscopie gastrointestinali, che portano al nuovo ricovero del paziente.

Oltre agli approcci medici per alleviare i sintomi (farmaci per la diarrea, lassativi per la stitichezza), spesso si ottiene un miglioramento attraverso un cambiamento nella dieta. Recentemente, ci sono state segnalazioni crescenti che i pazienti con IBS rispondono a una dieta a ridotto contenuto di FODMAP (oligo-, di- e monosaccaridi fermentabili e polioli) con un significativo miglioramento dei sintomi. Inoltre, i pazienti con IBS spesso riferiscono un significativo sollievo dai sintomi con l'aderenza a una dieta priva di glutine (GFD), così che le stime attuali suggeriscono che quasi la metà dei pazienti con IBS beneficia di una GFD.

L'introduzione del CLE fornisce un nuovo metodo oggettivo per rilevare i cambiamenti a livello cellulare. Il CLE consente una valutazione microscopica della mucosa già durante l'esame endoscopico e consente quindi un'istologia in vivo, con un'analisi esatta della mucosa intestinale.

Altri hanno già dimostrato che la stimolazione della mucosa intestinale con antigeni alimentari provoca un aumento della permeabilità e della dispersione cellulare nei pazienti con FI (Fritscher-Ravens et al. Gastroenterologia 2014). La risposta agli antigeni alimentari può essere visualizzata dopo la somministrazione di fluoresceina per via endovenosa e la misurazione del rilascio di fluoresceina nel lume intestinale. Uno dei principali vantaggi del CLE è la valutazione locale diretta degli antigeni alimentari sulla mucosa intestinale e l'identificazione dei pazienti che hanno un FI clinicamente rilevante.

Ipotesi: suggeriamo che i pazienti con IBS e/o FI reagiscano più fortemente agli antigeni alimentari applicati sulla mucosa rispetto ai controlli sani a causa di un'esistente infiammazione intestinale di basso grado. Abbiamo in programma di applicare frumento, soia, latte, lievito e albume d'uovo di gallina durante il CLE e registrare lo spargimento cellulare e l'efflusso di fluoresceina nel lume intestinale. Poiché è noto che molti pazienti con IBS rispondono positivamente a una dieta priva di frumento, ci aspettiamo la più forte risposta della mucosa soprattutto dopo l'applicazione di frumento.

Lo scopo è dimostrare la nostra ipotesi con l'aumento della dispersione cellulare e l'aumento dell'efflusso di fluoresceina nel lume intestinale.

Dopo il CLE, vengono prelevati campioni di tessuto per l'analisi istopatologica di routine. Inoltre, le biopsie della mucosa vengono prelevate e utilizzate per isolare le cellule staminali e generare organoidi in vitro. Questi organoidi vengono coltivati ​​e integrati con antigeni alimentari e vengono determinati i cambiamenti nella proliferazione, nell'espressione di geni, citochine e chemochine.

L'obiettivo primario è

• la valutazione del CLE con i dati istopatologici, ciò significa la determinazione dei pazienti che hanno una buona corrispondenza di infiammazione confermata istopatologicamente con la valutazione delle alterazioni della mucosa determinate nel CLE
• per determinare il numero di pazienti con IBS che hanno una risposta o un cambiamento di permeabilità dopo l'applicazione degli antigeni alimentari (grano, soia, latte, lievito, albume d'uovo di gallina) in CLE

Gli obiettivi secondari sono

• l'identificazione di parametri molecolari dopo stimolazione di organoidi in vitro con antigeni alimentari
• la correlazione dei dati derivati ​​da organoidi in vitro con la valutazione in vivo durante il CLE

Lo studio è previsto per un periodo di 2 anni. 40 pazienti di età pari o superiore a 18 anni con IBS che necessitano clinicamente di esofago-gastroduodenoscopia, ad es. per diagnosticare l'IBS o per escludere malattie infiammatorie intestinali, gastrite, esofagite eosinofila o celiachia, saranno inclusi nello studio. Inoltre, saranno inclusi 20 soggetti sani di controllo che vengono per il controllo medico preventivo.

Gli antigeni alimentari vengono applicati durante l'esofago-gastroduodenoscopia, iniziando dal duodeno distale e procedendo in sequenza fino al duodeno prossimale. L'applicazione degli antigeni alimentari è randomizzata. Le biopsie vengono prelevate dopo l'applicazione degli antigeni alimentari dalla mucosa duodenale e utilizzate per l'analisi istopatologica o la generazione in vitro di organoidi.