Konfokal laserendomomikroskopi for å bestemme innflytelsen av matantigener på slimhinneintegriteten (RDS_CLE)

Pasienter med IBS av uklar etiologi, dvs. ikke-IgE-mediert matintoleranse (FI), har ofte et langt lidelsesforløp. Det er ikke uvanlig at pasienter følger selvpålagte strenge dietter for å lindre matavhengige tarm- og ekstraintestinale symptomer. Imidlertid har disse diettene en høy risiko for underernæring. I praksis forsøker en eliminasjonsdiett etterfulgt av provokasjon av individuelle matvarer å identifisere utløserne av intoleransene. Men siden reaksjonen på matantigenene kan oppstå med en forsinkelse og ikke sjelden er en kombinasjon av flere intoleranser til stede, er riktig diagnose ofte vanskelig. Dette fører ofte til massivt redusert livskvalitet for pasientene og gjentatte undersøkelser, som gastrointestinale endoskopier, som fører til at pasienten blir innlagt på nytt.

I tillegg til medisinske tilnærminger for å lindre symptomene (medikamenter mot diaré, avføringsmidler mot forstoppelse), oppnås ofte en bedring gjennom en endring i kostholdet. Nylig har det vært økende rapporter om at pasienter med IBS responderer på en diett som er redusert i FODMAPs (fermenterbare oligo-, di- og monosakkarider samt polyoler) med en betydelig bedring av symptomer. Videre rapporterer pasienter med IBS ofte om betydelig symptomlindring med overholdelse av en glutenfri diett (GFD), slik at nåværende estimater tyder på at nesten halvparten av pasienter med IBS har nytte av en GFD.

Innføringen av CLE gir en ny objektiv metode for å oppdage endringer på cellenivå. CLE tillater en mikroskopisk vurdering av slimhinnen allerede under den endoskopiske undersøkelsen og muliggjør dermed en vivo histologi, med en nøyaktig analyse av tarmslimhinnen.

Andre har allerede vist at stimulering av tarmslimhinnen med matantigener forårsaker økt permeabilitet og celleavgivelse hos pasienter med FI (Fritscher-Ravens et al. Gastroenterologi 2014). Responsen på matantigener kan visualiseres etter administrering av intravenøs fluorescein og måling av frigjøring av fluorescein i tarmlumen. En stor fordel med CLE er den direkte lokale vurderingen av matantigener på tarmslimhinnen og identifisering av pasienter som har en klinisk relevant FI.

Hypotese: Vi foreslår at pasienter med IBS og/eller FI reagerer sterkere på slimhinnepåførte matantigener enn friske kontroller på grunn av en eksisterende lavgradig tarmbetennelse. Vi planlegger å påføre hvete, soya, melk, gjær og kyllingeggehvite under CLE og registrere celleavfall og fluoresceinutstrømning i tarmlumen. Siden mange pasienter med IBS er kjent for å reagere positivt på et hvetefritt kosthold, forventer vi den sterkeste slimhinneresponsen spesielt etter påføring av hvete.

Målet er å bevise vår hypotese ved økt celleavgivelse og økt utstrømning av fluorescein inn i tarmens lumen.

Etter CLE tas vevsprøver for rutinemessig histopatologisk analyse. I tillegg tas slimhinnebiopsier og brukes til å isolere stamceller og generere in vitro organoider. Disse organoidene dyrkes og suppleres med matantigener og endringer i proliferasjon, gen-, cytokin- og kjemokinekspresjon bestemmes.

Det primære målet er

• evalueringen av CLE med histopatologiske data, dette betyr bestemmelsen av pasienter som har et godt samsvar med histopatologisk bekreftet betennelse med vurderingen av slimhinneforandringer bestemt i CLE
• for å bestemme antall pasienter med IBS som har en respons eller endring i permeabilitet etter påføring av matantigener (hvete, soya, melk, gjær, kylling eggehvite) i CLE

Sekundære mål er

• identifisering av molekylære parametere etter stimulering av in vitro organoider med matantigener
• korrelasjonen av data hentet fra in vitro organoider med in vivo vurdering under CLE

Studiet er planlagt for en periode på 2 år. 40 pasienter i alderen 18 år og eldre med IBS som har et klinisk behov for øsofagogastroduodenoskopi, f.eks. å diagnostisere IBS eller å utelukke inflammatorisk tarmsykdom, gastritt, eosinofil øsofagitt eller cøliaki, vil bli inkludert i studien. Videre vil 20 friske kontrollpersoner som kommer for forebyggende legesjekk inkluderes.

Matantigener påføres under øsofagogastroduodenoskopi, starter i den distale duodenum og fortsetter sekvensielt til den proksimale duodenum. Anvendelsen av matantigener er randomisert. Biopsiene tas etter påføring av matantigener fra duodenalslimhinnen og brukes til histopatologisk analyse eller in vitro generering av organoider.