Konfokaalinen laserendomikroskopia elintarvikeantigeenien vaikutuksen määrittämiseksi limakalvon eheyteen (RDS_CLE)

Epäselvän etiologian eli ei-IgE-välitteisen ruoka-intoleranssin (FI) IBS-potilaat kärsivät usein pitkään. Ei ole harvinaista, että potilaat noudattavat itse määräämiä tiukkoja ruokavalioita lievittääkseen ravinnosta riippuvaisia ​​suoliston ja suoliston ulkopuolisia oireita. Näihin ruokavalioihin liittyy kuitenkin suuri aliravitsemuksen riski. Käytännössä eliminaatiodieetillä, jota seuraa yksittäisten ruokien provosointi, pyritään tunnistamaan intoleranssien laukaisevia syitä. Koska reaktio ruoka-antigeeneihin voi kuitenkin tapahtua viiveellä ja usein esiintyy useiden intoleranssien yhdistelmä, oikean diagnoosin tekeminen on usein vaikeaa. Tämä johtaa usein potilaiden massiiviseen elämänlaadun heikkenemiseen ja toistuviin tutkimuksiin, kuten maha-suolikanavan endoskopioihin, jotka johtavat potilaan uudelleen sairaalahoitoon.

Oireiden lievittämiseen käytettävien lääketieteellisten menetelmien (ripulilääkkeet, laksatiivit ummetukseen) lisäksi parannus saavutetaan usein muuttamalla ruokavaliota. Viime aikoina on saatu yhä enemmän raportteja siitä, että IBS-potilaat reagoivat ruokavalioon, jossa on vähemmän FODMAP-yhdisteitä (fermentoituvia oligo-, di- ja monosakkarideja sekä polyoleja) ja oireet paranevat merkittävästi. Lisäksi IBS-potilaat raportoivat usein merkittävästä oireiden lievittymisestä gluteenittoman ruokavalion (GFD) noudattamisen myötä, joten nykyisten arvioiden mukaan lähes puolet IBS-potilaista hyötyy GFD:stä.

CLE:n käyttöönotto tarjoaa uuden objektiivisen menetelmän solutason muutosten havaitsemiseen. CLE mahdollistaa limakalvon mikroskooppisen arvioinnin jo endoskooppisen tutkimuksen aikana ja mahdollistaa siten vivo-histologian tarkan suolen limakalvon analyysin avulla.

Toiset ovat jo osoittaneet, että suolen limakalvon stimulaatio ruokaantigeeneillä lisää läpäisevyyttä ja solujen irtoamista potilailla, joilla on FI (Fritscher-Ravens et al. Gastroenterologia 2014). Vaste ruoka-antigeeneille voidaan visualisoida suonensisäisen fluoreseiinin annon ja fluoreseiinin vapautumisen mittauksen jälkeen suolen luumenissa. CLE:n suuri etu on ruoka-antigeenien suora paikallinen arviointi suolen limakalvolla ja kliinisesti merkittävää FI-potilaiden tunnistaminen.

Hypoteesi: Suosittelemme, että IBS- ja/tai FI-potilaat reagoivat voimakkaammin limakalvolle levitettyihin ruoka-antigeeneihin kuin terveet kontrollit olemassa olevan matala-asteisen suolitulehduksen vuoksi. Aiomme levittää vehnää, soijaa, maitoa, hiivaa ja kananmunanvalkuaista CLE:n aikana ja tallentaa solujen irtoamisen ja fluoreseiinin ulosvirtauksen suolen ontelossa. Koska monien IBS-potilaiden tiedetään reagoivan positiivisesti vehnättömään ruokavalioon, odotamme voimakkaimman limakalvovasteen erityisesti vehnän levittämisen jälkeen.

Tavoitteena on todistaa hypoteesimme lisääntyneellä solujen irtoamisella ja lisääntyneellä fluoreseiinin ulosvirtauksella suolen onteloon.

CLE:n jälkeen otetaan kudosnäytteitä rutiininomaista histopatologista analyysiä varten. Lisäksi otetaan limakalvobiopsiat, joita käytetään kantasolujen eristämiseen ja in vitro organoidien tuottamiseen. Näitä organoideja viljellään ja niitä täydennetään ruoka-antigeeneillä ja määritetään muutokset proliferaatiossa, geenien, sytokiinien ja kemokiinien ilmentymisessä.

Ensisijainen tavoite on

• CLE:n arviointi histopatologisilla tiedoilla, tämä tarkoittaa sellaisten potilaiden määrittämistä, joilla histopatologisesti vahvistettu tulehdus täsmää hyvin CLE:ssä määritettyjen limakalvomuutosten arvioinnin kanssa.
• määrittää niiden IBS-potilaiden lukumäärän, joilla on vaste tai muutos läpäisevyydessä ruoka-antigeenien (vehnä, soija, maito, hiiva, kananmunanvalkuainen) käytön jälkeen CLE:ssä

Toissijaiset tavoitteet ovat

• molekyyliparametrien tunnistaminen sen jälkeen, kun in vitro -organoideja on stimuloitu ruokaantigeeneillä
• in vitro organoideista saatujen tietojen korrelaatio in vivo -arvioinnin kanssa CLE:n aikana

Tutkimus on suunniteltu 2 vuoden ajaksi. 40 18-vuotiasta ja sitä vanhempaa IBS-potilasta, joilla on kliininen ruokatorvi-gastroduodenoskopian tarve, esim. IBS:n ​​diagnosoimiseksi tai tulehduksellisen suolistosairauden, gastriitin, eosinofiilisen ruokatorven tulehduksen tai keliakian sulkemiseksi mukaan tutkimukseen. Lisäksi mukaan otetaan 20 tervettä kontrollihenkilöä, jotka tulevat ennaltaehkäisevään lääkärintarkastukseen.

Ruokaantigeenejä levitetään esophago-gastroduodenoskopian aikana alkaen distaalista pohjukaissuolesta ja edeten peräkkäin proksimaaliseen pohjukaissuoleen. Ruokaantigeenien käyttö on satunnaistettu. Biopsiat otetaan ruoka-antigeenien levittämisen jälkeen pohjukaissuolen limakalvolta ja niitä käytetään histopatologiseen analyysiin tai organoidien tuottamiseen in vitro.