Конфокальная лазерная эндомикроскопия для определения влияния пищевых антигенов на целостность слизистой оболочки (RDS_CLE)

Пациенты с СРК неясной этиологии, т. е. с не-IgE-опосредованной пищевой непереносимостью (ПН), часто имеют длительное течение страданий. Нередко пациенты соблюдают строгую диету, которую сами себе установили, чтобы облегчить связанные с пищей кишечные и внекишечные симптомы. Однако эти диеты сопряжены с высоким риском недоедания. На практике элиминационная диета с последующей провокацией отдельными продуктами пытается выявить триггеры непереносимости. Однако, поскольку реакция на пищевые антигены может возникать с задержкой и нередко присутствует сочетание нескольких непереносимостей, правильный диагноз часто затруднен. Это часто приводит к значительному снижению качества жизни пациентов и повторным обследованиям, таким как эндоскопия желудочно-кишечного тракта, что приводит к повторной госпитализации пациента.

В дополнение к медицинским подходам к облегчению симптомов (лекарства от диареи, слабительные от запоров) улучшение часто достигается за счет изменения диеты. В последнее время появляется все больше сообщений о том, что пациенты с СРК реагируют на диету с пониженным содержанием FODMAP (ферментируемые олиго-, ди- и моносахариды, а также полиолы) значительным улучшением симптомов. Кроме того, пациенты с СРК часто сообщают о значительном облегчении симптомов при соблюдении безглютеновой диеты (БГД), так что текущие оценки показывают, что почти половина пациентов с СРК получают пользу от безглютеновой диеты.

Внедрение CLE обеспечивает новый объективный метод обнаружения изменений на клеточном уровне. CLE позволяет проводить микроскопическую оценку слизистой оболочки уже во время эндоскопического исследования и, таким образом, позволяет проводить гистологию vivo с точным анализом слизистой оболочки кишечника.

Другие уже показали, что стимуляция слизистой оболочки кишечника пищевыми антигенами вызывает повышенную проницаемость и отторжение клеток у пациентов с FI (Fritscher-Ravens et al. Гастроэнтерология 2014). Реакцию на пищевые антигены можно визуализировать после внутривенного введения флуоресцеина и измерения высвобождения флуоресцеина в просвете кишечника. Основным преимуществом CLE является прямая локальная оценка пищевых антигенов на слизистой оболочке кишечника и выявление пациентов с клинически значимым FI.

Гипотеза: мы предполагаем, что пациенты с СРК и/или ФИ более сильно реагируют на пищевые антигены, нанесенные на слизистую оболочку, чем здоровые люди из контрольной группы, из-за существующего слабовыраженного воспаления кишечника. Мы планируем применять пшеницу, сою, молоко, дрожжи и белок куриного яйца во время CLE и регистрировать отщепление клеток и отток флуоресцеина в просвет кишечника. Поскольку многие пациенты с СРК, как известно, положительно реагируют на диету, не содержащую пшеницы, мы ожидаем наиболее сильную реакцию слизистых оболочек, особенно после применения пшеницы.

Цель состоит в том, чтобы доказать нашу гипотезу повышенным отторжением клеток и повышенным оттоком флуоресцеина в просвет кишечника.

После CLE берут образцы тканей для обычного гистопатологического анализа. Кроме того, берутся биоптаты слизистой оболочки и используются для выделения стволовых клеток и создания органоидов in vitro. Эти органоиды культивируют и дополняют пищевыми антигенами и определяют изменения в пролиферации, экспрессии генов, цитокинов и хемокинов.

Основная цель -

• оценка CLE с гистопатологическими данными, это означает определение пациентов, у которых есть хорошее совпадение гистопатологически подтвержденного воспаления с оценкой изменений слизистой оболочки, выявленных при CLE
• определить количество больных СРК, у которых отмечается ответ или изменение проницаемости после аппликации пищевых антигенов (пшеницы, сои, молока, дрожжей, куриного яичного белка) в КЛЭ

Второстепенные цели

• определение молекулярных параметров после стимуляции органоидов in vitro пищевыми антигенами
• корреляция данных, полученных из органоидов in vitro, с оценкой in vivo во время CLE

Исследование рассчитано на 2 года. 40 пациентов в возрасте 18 лет и старше с СРК, у которых есть клиническая необходимость в эзофагогастродуоденоскопии, т.е. для диагностики СРК или для исключения воспалительного заболевания кишечника, гастрита, эозинофильного эзофагита или целиакии. Кроме того, будут включены 20 здоровых лиц контрольной группы, пришедших на профилактический медицинский осмотр.

Пищевые антигены наносят во время эзофагогастродуоденоскопии, начиная с дистального отдела двенадцатиперстной кишки и последовательно продвигаясь к проксимальному отделу двенадцатиперстной кишки. Применение пищевых антигенов рандомизировано. Биопсии берутся после нанесения пищевых антигенов со слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки и используются для гистопатологического анализа или получения органоидов in vitro.