Bestimmung der Sicherheit und Immunogenität eines oralen Ganzzell-ShanChol-Cholera-Impfstoffs in Bangladesch

Für die Studie werden sowohl Erwachsene als auch Kinder, sowohl Männer als auch Frauen, aus den städtischen Vororten rund um die Stadt Dhaka in Mirpur rekrutiert, wo wir andere epidemiologische und impfstoffbezogene Studien durchgeführt haben. Die Community wird von unseren Außendienstmitarbeitern informiert und interessierte Personen können auf der Grundlage von Einschluss-/Ausschlusskriterien in die Studie aufgenommen werden.

Teil I – Erwachsene – 18–45 Jahre alt (n=110):

Da dieser orale bivalente Ganzzell-Cholera-Impfstoff bisher in Bangladesch noch nicht getestet wurde, wird die Studie in drei Altersgruppen durchgeführt, d. h. Erwachsenen, gefolgt von Kleinkindern und jüngeren Kindern. Diese Studienteilnehmer werden vom Feldstandort in Mirpur rekrutiert. Zu diesem Zweck erhalten 55 Erwachsene (18-45 Jahre) 2 Dosen des bivalenten Ganzzell-Cholera-Impfstoffs und 55 Erwachsene ein Placebo. Die Sicherheit wird 3 Tage lang nach jeder Dosis des Studienmittels durch Hausbesuche klinisch auf Nebenwirkungen überwacht. Die Teilnehmer werden randomisiert und erhalten im Abstand von 14 Tagen entweder zwei Dosen des Impfstoffs oder ein Placebo.

Teil II – Kinder 2–5 Jahre (n=110):

Wenn sich der Impfstoff in der Erwachsenenstudie als sicher erweist, wird er an Kleinkindern im Feld getestet, das aus 55 Kindern in jeder Gruppe besteht. Die Kinder werden nach jeder Impfdosis drei Tage lang klinisch auf Nebenwirkungen überwacht.

Teil III – Kinder 12–23 Monate (n=110):

Kinder vor Ort werden für die Studie rekrutiert und die Studie wird wie oben beschrieben durchgeführt.

Studienablauf:

Jede Phase der Studie (ab Teil I) wird abgeschlossen und basierend auf der Entwicklung und dem Fortschritt wird die nächste Phase eingeleitet. Wenn sich herausstellt, dass der Impfstoff keine schädlichen Auswirkungen auf Erwachsene hat, wird er an Kindern im Alter von 2 bis 5 Jahren und anschließend in der jüngeren Altersgruppe im Alter von 12 bis 23 Monaten getestet. Die Ergebnisse werden dem Data Safety Monitoring Board nach Abschluss des Sicherheitsüberwachungsteils jeder Phase der Studie und vor dem Übergang zur nächsten Studiengruppe vorgelegt.

Überwachung auf Nebenwirkungen:

Die Sicherheit der Studienwirkstoffe wird nach Beginn der Intervention überwacht. In der Gemeinde wird die Überwachung durch den Arzt und die geschulten Forschungsassistenten durchgeführt und Nebenwirkungen wie Durchfall, Erbrechen, Übelkeit und andere lokale und systemische Reaktionen aufgezeichnet. Für alle drei Gruppen werden die Teilnehmer oder ihre Erziehungsberechtigten drei aufeinanderfolgende Tage nach jeder Dosis des Studienwirkstoffs von Gesundheitspersonal zur Erinnerung an die Symptome befragt. Alle Nebenwirkungen werden bis zu 28 Tage lang in Reaktionsüberwachungsformularen für lokale und systemische Reaktionen aufgezeichnet. Wenn innerhalb des Studienzeitraums ein unerwünschtes oder schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis gemeldet wird, steht die Feldklinik für die Berichterstattung und mögliche Behandlung des Ereignisses zur Verfügung. Gemeldete Symptome außer Appetitverlust werden als leicht (auffällig), mittelschwer (Beeinträchtigung normaler täglicher Aktivitäten) oder schwer (Aussetzung normaler täglicher Aktivitäten) eingestuft. Zur Erfassung aller klinischen Anzeichen und Symptome wird ein klinisches Aufzeichnungsformular verwendet. Bei schwerwiegenden Beeinträchtigungen werden die Daten in einem gesonderten Formular eingetragen. Bei Bedarf wird die Studienteilnehmerin im Mirpur Treatment Center oder im ICDDR,B Dhaka Hospital unter Aufsicht der Studienärzte stationär aufgenommen.

Sicherheitsendpunkt und Sicherheitsbewertung:

Der primäre Endpunkt für die Bewertung der Sicherheit wird als das Auftreten eines der folgenden mindestens mittelschweren Durchfälle, Erbrechen oder Bauchkrämpfe definiert. Durchfall wird als drei oder mehr lockerer oder flüssiger Stuhl innerhalb eines Zeitraums von 24 Stunden während des dreitägigen Überwachungszeitraums definiert.

STUDIENINTERVENTION Impfstoff Jede Dosis des Impfstoffs enthält ganzzellinaktivierte, durch Hitze abgetötete und durch Formalin abgetötete Bakterien, bestehend aus 600 ELISA-Einheiten (EU) Lipopolysaccharid (LPS). Es besteht aus durch Formalin abgetötetem V. cholerae Inaba, Biotyp El Tor (Stamm Phil 6973). Es enthält außerdem 300 EU-LPS des durch Hitze abgetöteten klassischen Biotyps V. cholerae Ogawa (Cairo 50); 300 EU-LPS Formalin töteten den klassischen Biotyp V. cholerae Ogawa (Kairo 50); 300 EU-LPS von hitzegetötetem V. cholerae Inaba, klassischer Biotyp (Kairo 48); und 600 EU-LPS Formalin töteten V. cholerae O139 (4260B) (9). Der Impfstoff enthält kein nachweisbares Choleratoxin. Die Studienwirkstoffe (Impfstoff oder Placebo) sind als flüssige Formulierungen in 1,5-ml-Dosen verpackt. Der Impfstoff wird in zwei Dosen im Abstand von zwei Wochen verabreicht und mit einer oralen Spritze ohne Nadel verabreicht. Anschließend wird jedem Teilnehmer Wasser angeboten. Es wird kein Puffer gleichzeitig verabreicht.

Placebo Das Placebo besteht aus hitzegetötetem Escherichia coli K12 und sieht optisch identisch mit dem Impfstoff aus. Dieser Stamm wurde für placebobezogene Studien in früheren klinischen Studien mit oralen Impfstoffen in Bangladesch und anderswo verwendet.

Zufällige Zuteilung Berechtigte Teilnehmer erhalten gemäß dem Randomisierungsplan im Verhältnis 1:1 den Impfstoff oder das Placebo. Individuelle Randomisierungslisten für Erwachsene, Kleinkinder und Säuglinge werden von Statistikern bei IVI erstellt, die in keiner Weise an der Studie beteiligt sind.

Die Studienagenten werden bei Shantha Biotechnics gemäß der von IVI bereitgestellten Liste mit unterschiedlichen Buchstabencodes für drei verschiedene Phasen gekennzeichnet.

Das Außendienstpersonal wird die Studienagenten den Teilnehmern entsprechend der nächsten verfügbaren Nummer bei Eintritt in die Studie zuteilen, die mit der von IVI bereitgestellten Randomisierungsliste verknüpft wird.

Die Randomisierungsliste enthält fortlaufende Nummern, die für jeden Teilnehmer eindeutig sind, und der Block-Randomisierungsprozess (feste Blocklänge von 4) wird eingesetzt, um ein wirksames Gleichgewicht zwischen den Interventionen sicherzustellen.

Data Safety Monitoring Board (DSMB):

Für diese Studie wird vom Ethical Review Committee (ERC) des ICDDR,B ein 4-5-köpfiges Datensicherheits- und Überwachungsgremium (DSMB) gebildet. Diese wird sich aus Mitgliedern des ERC, Mitarbeitern des ICDDR,B und Einzelpersonen anderer Institutionen in Bangladesch zusammensetzen. Das Team wird auch aus einem internationalen Mitglied bestehen. Die Mitglieder werden in keiner Weise an der Studie beteiligt.

Bei Shanta Biotechnics werden Fläschchen mit Verfahren zur Blendung und zum Brechen von Codes gemäß der von IVI bereitgestellten Liste mit Buchstabencodes gekennzeichnet. Das gesamte Studienpersonal und die Teilnehmer sind während der Dauer der Studie für die Behandlungszuweisung blind.

Die Identität des Studienbeauftragten wird weder dem Teilnehmer noch seinem Elternteil/Erziehungsberechtigten noch dem an der Durchführung oder Überwachung der Studie beteiligten Personal, wie z. B. Prüfärzten, Studienkrankenschwestern/-personal, vor Abschluss der Studie bekannt sein.

Der PI wird die versiegelte Randomisierungsliste aufbewahren, um sie bei Bedarf im Falle unerwünschter Ereignisse, die das DSMB in der Studie feststellen kann, zu verwenden. Andernfalls wird die Liste nicht entblindet, bis die Studie abgeschlossen ist und die Eingabe und Bearbeitung der relevanten Daten vor Beginn der Analysen abgeschlossen ist. Der gesamte Datensatz wird vor der Entblindung gesperrt. Wenn der Interventionsauftrag aus irgendeinem Grund nicht verblindet ist, wird das DSMB innerhalb von 24 Stunden benachrichtigt.

Rücktritt des Probanden während der Studie Der jeweilige Teilnehmer oder die Eltern der teilnehmenden Kinder können die Teilnahme jederzeit nach der Einschreibung ohne Angabe von Gründen abbrechen. Für solche Abhebungen erfolgt kein Ersatz.

Die folgenden Kriterien sollten bei jedem Besuch im Anschluss an die Einnahme des Studienmedikaments überprüft werden

1. Verwendung jeglicher immunsuppressiver oder immunmodifizierender Medikamente während des Studienzeitraums (für Kortikosteroide würde dies ≥0,5 mg/kg.Tag bedeuten)

2. Verabreichung von Immunglobulinen oder anderen Blutprodukten während des Studienzeitraums. Wenn einer der oben genannten Punkte auftritt, kann dies zu einer Beeinträchtigung der Protokollbewertung (PP) führen. Sie werden jedoch nicht aus der Studie zurückgezogen und ihre Daten werden in einer „Intention-to-Treat“-Analyse (ITT) verwendet. Der/die Prüfer können einen Teilnehmer auch zurückziehen, wenn dies seiner/ihrer klinischen Meinung nach im besten Interesse des betreffenden Teilnehmers ist oder wenn es als nicht protokollkonform erachtet wird. Ein Teilnehmer kann auch aufgrund von Protokollverstößen, Tod oder vorzeitigem Abbruch der Studie durch den Sponsor zurückgezogen werden. Wo immer möglich, werden die im Protokoll festgelegten Tests und Bewertungen beim Abschlussbesuch durchgeführt.

   Dauer des Studienzeitraums für einzelne Teilnehmer Die Teilnehmer bleiben bis zu 28 Tage in der Studie.

   Zeitplan und Beschreibung der Beobachtungen und Besuche:

   In der Studie wird der folgende Zeitplan verwendet und die Fallberichtsformulare werden an jedem Studientag ausgefüllt:

3. Tag 0: Nach der Beschreibung der Studie und der ersten mündlichen Einwilligung wird die Krankengeschichte erhoben und eine gründliche körperliche Untersuchung durch einen Arzt durchgeführt, die auch die Messung der Vitalfunktionen umfasst. Sobald alle Zulassungskriterien erfüllt sind, werden der Teilnehmer und bei Kindern die Eltern gebeten, die Einverständniserklärung zu unterzeichnen. Eine Blut- und Stuhlprobe würde zur Bestimmung des immunologischen Basistests für Immunantworten entnommen. Anschließend wird der Teilnehmer gemäß der Randomisierungsliste der Studienintervention zugeordnet (Impfstoff oder Placebo). Die freiwillige und erbetene Reaktogenität wird anhand der Symptome und unmittelbaren unerwünschten Ereignisse beurteilt, die 1 Stunde nach Einnahme des Studienmittels aufgezeichnet werden. Anschließend dürfen die Teilnehmer nach Hause gehen
4. Tag 1: Die Teilnehmer kehren zum Studienzentrum zurück, um auf freiwillige und angeforderte Symptome und unerwünschte Ereignisse überwacht zu werden.
5. Tag 2: Die Teilnehmer kehren zum Studienzentrum zurück oder werden zu Hause besucht (in Ausnahmefällen, wenn die Eltern den Teilnehmer nicht zum Studienzentrum bringen können), um sie auf freiwillige und angeforderte Symptome und unerwünschte Ereignisse zu überwachen.
6. Tag 7: (bis zu +3 Tage): Die Teilnehmer kehren zum Studienzentrum zurück. Die Blutprobe wird in der Klinik entnommen und die Stuhlprobe wird zu Hause oder in der Klinik entnommen, um die impfstoffspezifischen immunologischen Reaktionen der Studienteilnehmer zu testen.
7. Tag 14: (± 2 Tage): Die Teilnehmer kehren zum Studienzentrum zurück. Der Teilnehmer wird gemäß der Randomisierungsliste (Impfstoff oder Placebo) zum zweiten Mal der Studienintervention zugewiesen ein blinder Drittanbieter-Spender.
8. Tag 14–16: Die Teilnehmer kehren zum Studienzentrum zurück oder werden zu Hause besucht (in Ausnahmefällen, wenn die Eltern den Teilnehmer nicht zum Studienzentrum bringen können), um sie auf freiwillige und angeforderte Symptome und unerwünschte Ereignisse zu überwachen. Freiwillige und angeforderte Reaktogenität werden bewertet Symptome und unmittelbare unerwünschte Ereignisse.
9. Tag 21: (± 3 Tage) Es werden Blut- und Stuhlproben entnommen, um die impfstoffspezifische Reaktion nach der Immunisierung zu testen.
10. Tag 28: (± 3 Tage) Klinische Bewertung und Studienabbruch Berechnung der Probengröße und Ergebnis (primäre und sekundäre) Variable(n) Sicherheits- und Immunogenitätsstudie des Shantha-Cholera-Impfstoffs: Der „Nicht-Minderwertigkeits“-Ansatz unter Verwendung einer 1 – Zur Berechnung der Stichprobengröße wurde ein doppelseitiges 95 %-Konfidenzintervall verwendet, da es uns ermöglichte, klinisch inakzeptable hohe Raten an unerwünschten Durchfallereignissen während der 3 Tage nach jeder Dosis auszuschließen und festzustellen, dass der Impfstoff eine angemessene Serokonversion zu V. cholerae O1 induzierte unter den Empfängern. Unter der Annahme einer Durchfallrate von 10 % sowohl bei Placebo- als auch bei Impfstoffempfängern, um einen Impfstoff-Placebo-Unterschied in der Durchfallrate von mehr als 20 % (obere Grenze des einseitigen 95 %-Konfidenzintervalls) mit einer Potenz von 0,9 auszuschließen, gilt: Die für jede Gruppe erforderliche Mindestanzahl an Probanden für beide unerwünschten Ereignisse betrug 46. Die Stichprobengröße wird unter der Annahme berechnet, dass es wichtig ist zu bewerten, ob der Impfstoff im Vergleich zur Placebogruppe akzeptable vibriozide Reaktionen im Serum hervorruft. Basierend auf einer Immunogenitätsstudie des oralen Cholera-Impfstoffs mit abgetöteten Ganzzellen in Bangladesch gehen wir von den folgenden Annahmen aus. Für vibriozide Reaktionen im Serum, definiert als >4-facher Anstieg der Inaba- oder Ogawa-Antikörper zwischen dem Ausgangswert und der zweiten Dosis, gehen wir für jede Altersgruppe (12–23 Monate, 2–5 Jahre und 18–45 Jahre) von 1 aus ) Die Hintergrundrate der Reaktionen in der Placebo-Gruppe beträgt nach der zweiten Dosis 5 % und 2) die tatsächliche Rate vibriozider Reaktionen in den Impfstoffgruppen beträgt 25 %. Bei p < 0,05 (1-tailed), einer Potenz von 0,8 und einer 1:1-Zuteilung von Impfstoff und Placebo wären insgesamt 46 Probanden pro Gruppe erforderlich. Aus Gründen der Sicherheit und der immunologischen Reaktionen beträgt die Zahl also 46 pro Gruppe. Bei einer Fluktuationsrate von 15 % sind es 53. Wir werden 55 in jeder Gruppe auswählen (110 pro Altersgruppe sowohl für den Impfstoff- als auch für den Placebo-Empfänger).

Wir werden daher 55 Probanden pro Arm in jeder Altersgruppe auswählen, also insgesamt 330 Probanden.