Mit Ph2-NK-Zellen angereicherte DCIs mit/ohne RLR9-Agonist, DUK-CPG-001 von Spendern nach allogener SCT (NK-DCI)

Dies ist eine randomisierte, parallele Phase-II-Studie zur Bewertung der Raten des progressionsfreien Überlebens und der inakzeptablen Toxizität bei Patienten, die mit NK-Zellen angereicherte Spender-Lymphozyten-Infusionen (DLIs) erhalten, wenn sie allein oder zusammen mit dem TLR9-Agonisten DUK-CPG-001 verabreicht werden. von einem 7-8/8 HLA-übereinstimmenden verwandten oder nicht verwandten Spender (Kohorte A) oder 4-6/8 HLA-übereinstimmenden verwandten Spender (Kohorte B) nach reduzierter Intensität oder nicht-ablativer allogener Stammzelltransplantation. Die Randomisierung wird nach Krankheitstypen stratifiziert (myeloische versus lymphatische Malignome).

Patient vor Beginn der Therapie Innerhalb von 21 Tagen vor Beginn der Therapie werden bei den Patienten eine aktualisierte Anamnese und eine körperliche Untersuchung, Labortests, eine Stuhlsammlung und ein Schwangerschaftstest durchgeführt, wenn es sich bei der Patientin um eine Frau im gebärfähigen Alter handelt. Den Patienten wird Blut oder Knochenmark zur Analyse der Immunfunktion und des Chimärismus eingelagert. Tests, die den Krankheitszustand des Patienten dokumentieren, sind auch bei Studieneintritt erforderlich (Knochenmarkpunktion/-biopsie, Blutuntersuchungen und/oder radiologische Tests wie CTs, MRT, PET-Scans, wie vom behandelnden Arzt festgelegt und für standardisierte Ansprechbewertungen erforderlich). .

Spender-Apherese und Zellverarbeitung Die Spender kehren für eine frische Entnahme von NK-Zellen zum Zentrum zurück und benötigen keine Mobilisierung von Wachstumsfaktoren. Für jede NK-Zellen-Infusion wird eine Entnahme verwendet. Die Zellen werden unmittelbar nach der Entnahme und Verarbeitung oder am nächsten Tag transfundiert. Die Zellverarbeitung wird in unserem Kryokonservierungslabor gemäß SOP für die Entnahme, Kennzeichnung und Handhabung durchgeführt. Die Zellen werden unter Verwendung eines CD56-Antikörpers (CliniMACS CD56-Reagenz), eines CliniMACSplus-Instruments und eines CliniMACS-Schlauchsatzes, bereitgestellt von Miltenyi Biotec, unter Verwendung des Firmenprotokolls (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, Kalifornien) NK-selektiert. Zellzählung vor und nach der Verarbeitung, Lebensfähigkeit, hämatopoetischer Vorläuferzellen-Assay (HPCA) und Durchflussanalyse gemäß SOP werden durchgeführt.

Patientenbeurteilung Die Beurteilung der Krankheit erfolgt anhand standardisierter Kriterien und umfasst eine sorgfältige Untersuchung der zum Nachweis der Krankheit erforderlichen Studien (PET, Röntgenaufnahmen, Immunphänotyp, Knochenmark, molekulare Studien usw.). Das Re-Staging kann nach Ermessen des Transplantationsarztes nach dem Patienten (die alle Unterprüfer in dieser Studie sind) geändert werden, wenn der Patient vor diesen Zeitpunkten Fortschritte macht, aber das empfohlene Re-Staging ist q3 Monate für 1 Jahr nach dem letzten NK- angereichertes DLI, alle 6 Monate für die nächsten 2 Jahre, dann wie klinisch angezeigt. Immunrekonstitutionsstudien vor und 1 und 7 Tage nach jedem mit NK-Zellen angereicherten DLI und 3, 6 und 12 Monate nach dem letzten mit NK-Zellen angereicherten DLI. Bestimmung des Chimärismus (durch kurze Tandem-Wiederholungsanalyse, die in unserem DUKE HLA-Labor mit einer Sensitivität von 2 % verwendet wird) unmittelbar vor jedem NK-Zell-angereicherten DLI und 3, 6, 12 Monate nach dem letzten NK-angereicherten DLI.

Die Toxizität wird nach der Infusion und eine Woche später (mehr nach Festlegung durch das Behandlungsteam) und mindestens alle zwei Wochen bis 6 Wochen nach der Infusion, dann alle 3 Monate, beginnend 3 Monate nach dem zweiten DLI für das erste Jahr, formell bewertet. Die Bewertungen umfassen die Anamnese (spezifisch für GI-Toxizität sowie insgesamt neue Probleme), körperliche Untersuchung, CBC, Leberfunktionstests (mindestens AST, ALT, Bilirubin) und Chemistry CS, um Kreatinin und BUN für die Toxizitätsbeurteilung nach dem NCI-Standard einzuschließen Toxizitätskriterien (Version 4) und Standard-GVHD-Kriterien (Anhang I). Weitere Nachsorgemaßnahmen sind nach Bedarf erforderlich, wenn der Patient aufgrund der Transplantations- oder Infusionsverfahren eine Toxizität aufweist. Patienten mit einer Toxizität von Grad 3 oder höher aufgrund der Studie werden mindestens alle zwei Wochen untersucht, bis die Toxizität < Grad 3 ist, und werden dann als klinisch angemessen angesehen.

Stuhlsammlung und Mikrobiomanalyse:

Wir werden Stuhlproben von Patienten zu den folgenden Zeitpunkten während der Studie sammeln: vor dem DLI, Tag +7, vor dem zweiten DLI, Tag +7, dann alle 3 Monate nach dem DLI für ein Jahr. Stuhlproben von Patienten können bis zu 24 h bei 4 °C gelagert werden, bevor sie für Chargenanalysen bei -80 °C eingefroren werden.

NK-Zell-Infusions- und CpG-Verabreichungsplan für Patienten Die Zielzelldosis für NK-Zell-angereichertes DLI ist so viele Zellen wie möglich mit weniger als 0,5 x 106 CD3+ CD56- Zellen/kg Patientengewicht im 4-6/8 HLA- angepasste verwandte Einstellung und 1 x 106 CD3+ CD56- Zellen/kg Patientengewicht in der 7-8/8 HLA-angepassten verwandten oder nicht verwandten Einstellung. Das erste mit NK-Zellen angereicherte DLI wird ein bis sechs Monate nach der Transplantation verabreicht. Das zweite mit NK-Zellen angereicherte DLI wird ein bis drei Monate nach der ersten Infusion bei Patienten verabreicht, die zum Zeitpunkt der Infusion eine aGVHD < Grad II haben und keine inakzeptablen Toxizitäten hatten, die zumindest möglicherweise mit dem vorherigen DLI zusammenhängen und behoben wurden bis Klasse 1 oder darunter. Das zweite DLI wird NICHT bei Patienten mit aGVHD ≥ Grad III zum Zeitpunkt der Infusion oder inakzeptablen Toxizitäten verabreicht, die zumindest möglicherweise mit der ersten Infusion zusammenhängen. Wenn Patienten an GVHD leiden und zu Studienbeginn eine immunsuppressive Therapie erhielten, werden die Patienten ihre stabile Dosis von Immunsuppressiva, die für die Therapie der akuten GVHD vor dem NK-Zell-angereicherten DLI begonnen wurde, fortsetzen und erst mindestens 6 Wochen nach jeder NK ausschleichen zellangereichertes DLI (es sei denn, das Fortschreiten der Krankheit oder die Toxizität des Patienten durch die Wirkstoffe erfordert eine frühere Reduzierung). Die Spender-NK-Zellen werden über 30 Minuten infundiert. Diphenhydramin 25 mg iv oder po und Acetaminophen 650 mg po werden vor jeder Reinfusion verwendet, es sei denn, der Patient hat eine Vorgeschichte von Allergien oder Kontraindikationen, in diesem Fall wird Hydrocortison 50 mg i.v. verwendet.

Diese Zellen werden dem Patienten über eine periphere intravenöse Leitung oder eine zentrale Leitung infundiert. Wenn nach NK-Zell-angereicherter DLI Anzeichen einer GVHD auftreten, kann mit immunsuppressiven Mitteln (Prednison, Ciclosporin, Tacrolimus und/oder Mycophenolat bevorzugt erste Wahl) begonnen werden.