DCI arricchiti con cellule NK Ph2 con/senza agonista RLR9, DUK-CPG-001 da donatori in seguito a SCT allogenico (NK-DCI)

Questo è uno studio di fase II randomizzato e parallelo per valutare i tassi di sopravvivenza libera da progressione e tossicità inaccettabile nei pazienti che ricevono infusioni di linfociti donatori arricchiti di cellule NK (DLI) quando somministrati da soli o somministrati con l'agonista TLR9, DUK-CPG-001, da un donatore correlato o non correlato HLA 7-8/8 (Coorte A) o da un donatore correlato HLA 4-6/8 (Coorte B) a seguito di trapianto di cellule staminali allogeniche di intensità ridotta o non ablativo. La randomizzazione sarà stratificata per tipi di malattia (neomie mieloidi contro neoplasie linfoidi).

Paziente prima dell'inizio della terapia Entro 21 giorni prima dell'inizio della terapia, i pazienti avranno un'anamnesi aggiornata e verranno eseguiti esame fisico, test di laboratorio, raccolta delle feci e test di gravidanza se la paziente è una donna in età fertile. I pazienti avranno sangue o midollo conservato per l'analisi della funzione immunitaria e del chimerismo. All'ingresso nello studio sono richiesti anche test che documentino lo stato di malattia del paziente (aspirato/biopsia del midollo osseo, esami del sangue e/o test radiografici come TC, risonanza magnetica, scansioni PET come determinato dal medico curante e come richiesto per valutazioni di risposta standardizzate) .

Aferesi del donatore e trattamento delle cellule I donatori torneranno al centro per una nuova raccolta di cellule NK e non avranno bisogno della mobilizzazione del fattore di crescita. Verrà utilizzata una raccolta per ciascuna infusione di cellule NK. Le cellule verranno trasfuse immediatamente dopo la raccolta e l'elaborazione o il giorno successivo. L'elaborazione delle cellule verrà eseguita nel nostro laboratorio di crioconservazione secondo le SOP per la raccolta, l'etichettatura e la manipolazione. Le cellule saranno selezionate NK utilizzando un anticorpo CD56 (CliniMACS CD56 Reagent), lo strumento CliniMACSplus e il set di tubi CliniMACS forniti da Miltenyi Biotec utilizzando il protocollo aziendale (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, California). Verranno eseguiti il ​​conteggio delle cellule pre e post elaborazione, la vitalità, il test delle cellule progenitrici ematopoietiche (HPCA) e l'analisi del flusso per SOP.

Valutazione del paziente La valutazione della malattia utilizzerà criteri standardizzati e includerà un attento esame degli studi necessari per rilevare la malattia (PET, radiografie, immunofenotipo, midollo, studi molecolari ecc.). La ristadiazione può essere modificata a discrezione del medico del trapianto che segue il paziente (che sono tutti subinvestigatori in questo studio) se si ritiene che il paziente stia progredendo prima di questi punti temporali, ma la ristadiazione raccomandata è ogni 3 mesi per 1 anno dopo l'ultima NK- DLI arricchito, q6 mesi per i successivi 2 anni, quindi come indicato clinicamente. Studi di ricostituzione immunitaria prima e 1 e 7 giorni dopo ogni DLI arricchito di cellule NK e 3, 6 e 12 mesi dopo l'ultimo DLI arricchito di NK. Determinazione del chimerismo (mediante analisi ripetuta in tandem breve in uso nel nostro laboratorio DUKE HLA con una sensibilità del 2%) appena prima di ogni DLI arricchito di cellule NK e 3, 6, 12 mesi dopo l'ultimo DLI arricchito di NK.

La tossicità sarà valutata formalmente dopo l'infusione e una settimana dopo (più come determinato dal team di trattamento) e almeno ogni due settimane fino a 6 settimane dopo l'infusione, quindi ogni 3 mesi a partire da 3 mesi dopo il secondo DLI per il primo anno. Le valutazioni includono l'anamnesi (specifica per la tossicità gastrointestinale così come i nuovi problemi complessivi), l'esame fisico, l'emocromo, i test di funzionalità epatica (AST, ALT, bilirubina come minimo) e la chimica CS per includere la creatinina e l'azotemia per la valutazione della tossicità seguendo il comune NCI criteri di tossicità (versione 4) e criteri GVHD standard (appendice I). Se necessario, sarà necessario un ulteriore follow-up se il paziente presenta una tossicità dovuta al trapianto o alle procedure di infusione. I pazienti con una tossicità di grado 3 o superiore dovuta allo studio saranno visitati almeno a settimane alterne fino a quando la tossicità sarà <grado 3, e quindi saranno considerati clinicamente appropriati.

Raccolta delle feci e analisi del microbioma:

Raccoglieremo campioni di feci dai pazienti nei seguenti punti temporali durante lo studio: pre-DLI, giorno +7, pre-secondo DLI, giorno +7, quindi ogni 3 mesi dopo DLI per un anno. I campioni di feci dei pazienti possono essere conservati a 4°C fino a 24 ore prima del congelamento a -80°C per l'analisi dei lotti.

Infusione di cellule NK del paziente e piano di somministrazione di CpG La dose di cellule bersaglio per il DLI arricchito di cellule NK sarà di tante cellule quante possono essere raccolte con meno di 0,5 x 106 cellule CD3+ CD56-/kg di peso del paziente nel 4-6/8 HLA- impostazione correlata corrispondente e 1 x 106 cellule CD3+ CD56-/kg di peso del paziente nell'impostazione correlata o non correlata HLA corrispondente o non correlata. Il primo DLI arricchito di cellule NK verrà somministrato da uno a sei mesi dopo il trapianto. La seconda DLI arricchita di cellule NK verrà somministrata da uno a tre mesi dopo la prima infusione, nei pazienti che hanno aGVHD di <grado II al momento dell'infusione e non hanno avuto tossicità inaccettabili che sono almeno possibilmente correlate alla precedente DLI e risolte al grado 1 o inferiore. La seconda DLI NON verrà somministrata a pazienti con aGVHD di grado ≥ III al momento dell'infusione o tossicità inaccettabili almeno possibilmente correlate alla prima infusione. Se i pazienti hanno GVHD ed erano in terapia immunosoppressiva all'ingresso nello studio, i pazienti continueranno con la loro dose stabile di agenti immunosoppressori iniziata per la terapia della GVHD acuta prima del DLI arricchito di cellule NK e non diminuiranno fino ad almeno 6 settimane dopo ogni NK DLI arricchito di cellule (a meno che la progressione della malattia o la tossicità del paziente dagli agenti richiedano una riduzione anticipata). Le cellule NK del donatore saranno infuse nell'arco di 30 minuti. Difenidramina 25 mg ev o PO e acetaminofene 650 mg PO verranno utilizzati prima di ogni reinfusione, a meno che non vi sia una storia di allergia o controindicazione nel paziente, nel qual caso verrà utilizzato idrocortisone 50 mg EV.

Queste cellule vengono infuse nel paziente tramite una linea endovenosa periferica o una linea centrale. Se i segni di GVHD si verificano dopo DLI arricchito di cellule NK, possono essere avviati agenti immunosoppressori (prednisone, ciclosporina, tacrolimus e/o micofenolato come prima scelta).