DCIs enriquecidos com células Ph2 NK com agonista RLR9, DUK-CPG-001 de doadores após SCT alogênico (NK-DCI)

Este é um estudo paralelo randomizado de fase II para avaliar as taxas de sobrevida livre de progressão e toxicidade inaceitável em pacientes que recebem infusões de linfócitos de doadores enriquecidos com células NK (DLIs) quando administrados sozinhos ou administrados com o agonista TLR9, DUK-CPG-001, de um doador aparentado ou não aparentado compatível com HLA 7-8/8 (Coorte A) ou doador aparentado compatível com HLA 4-6/8 (Coorte B) após transplante de células-tronco alogênicas não ablativas ou de intensidade reduzida. A randomização será estratificada para os tipos de doença (malignidades mieloides versus linfóides).

Paciente antes de iniciar a terapia Dentro de 21 dias antes de iniciar a terapia, as pacientes terão um histórico atualizado e exame físico realizado, exames laboratoriais, coleta de fezes e teste de gravidez se a paciente for uma mulher com potencial para engravidar. Os pacientes terão sangue ou medula armazenados para análise da função imunológica e quimerismo. Os testes que documentam o estado da doença do paciente também são necessários na entrada do estudo (aspirado/biópsia da medula óssea, exames de sangue e/ou exames radiográficos, como tomografia computadorizada, ressonância magnética, PET, conforme determinado pelo médico assistente e conforme necessário para avaliações de resposta padronizadas) .

Aférese de doadores e processamento de células Os doadores retornarão ao centro para uma nova coleta de células NK e não precisarão de mobilização de fator de crescimento. Será utilizada uma coleta para cada infusão de células NK. As células serão transfundidas imediatamente após a coleta e processamento ou no dia seguinte. O processamento das células será realizado em nosso laboratório de criopreservação de acordo com o SOP para coleta, rotulagem e manuseio. As células serão NK selecionadas usando um anticorpo CD56 (CliniMACS CD56 Reagent), instrumento CliniMACSplus e conjunto de tubos CliniMACS fornecidos pela Miltenyi Biotec usando o protocolo da empresa (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, Califórnia). Contagem de células pré e pós-processamento, viabilidade, Ensaio de Células Progenitoras Hematopoiéticas (HPCA) e análise de fluxo por SOP serão feitas.

Avaliação do paciente A avaliação da doença usará critérios padronizados e incluirá um exame cuidadoso dos estudos necessários para detectar a doença (PET, radiografias, imunofenótipo, medula, estudos moleculares, etc.). O reestadiamento pode ser alterado a critério do médico de transplante que acompanha o paciente (que são todos subinvestigadores neste estudo) se o paciente estiver progredindo antes desses pontos de tempo, mas o reestadiamento recomendado é de 3 meses por 1 ano após o último NK- DLI enriquecido, a cada 6 meses pelos próximos 2 anos, então conforme indicado clinicamente. Estudos de reconstituição imune antes e 1 e 7 dias após cada DLI enriquecido com células NK e 3, 6 e 12 meses após o último DLI enriquecido com NK. Determinação do quimerismo (por análise de repetição curta em tandem em uso em nosso laboratório DUKE HLA com sensibilidade de 2%) imediatamente antes de cada DLI enriquecido com células NK e 3, 6, 12 meses após o último DLI enriquecido com NK.

A toxicidade será avaliada formalmente após a infusão e uma semana depois (mais conforme determinado pela equipe de tratamento) e no mínimo a cada duas semanas até 6 semanas após a infusão, então a cada 3 meses começando aos 3 meses após o segundo DLI no primeiro ano. As avaliações incluem histórico (específico para toxicidade gastrointestinal, bem como novos problemas gerais), exame físico, hemograma, testes de função hepática (AST, ALT, bilirrubina no mínimo) e Química CS para incluir creatinina e BUN para avaliação de toxicidade seguindo o NCI comum critérios de toxicidade (versão 4) e critérios padrão de GVHD (apêndice I). Será necessário acompanhamento adicional, conforme necessário, se o paciente apresentar toxicidade devido ao transplante ou aos procedimentos de infusão. Os pacientes com toxicidade de grau 3 ou superior devido ao estudo serão vistos a cada duas semanas, no mínimo, até que a toxicidade seja < grau 3, e então serão vistos como clinicamente apropriados.

Coleta de fezes e análise de microbioma:

Coletaremos amostras de fezes de pacientes nos seguintes pontos de tempo ao longo do estudo: pré-DLI, dia +7, pré-segundo DLI, dia +7, depois a cada 3 meses após DLI por um ano. As amostras de fezes de pacientes podem ser armazenadas a 4°C por até 24 h antes de serem congeladas a -80°C para análise em lote.

Infusão de células NK do paciente e plano de administração de CpG A dose alvo de células para DLI enriquecido com células NK será tantas células quantas puderem ser coletadas com menos de 0,5 x 106 células CD3+ CD56-/kg de peso do paciente no 4-6/8 HLA- configuração relacionada correspondente e 1 x 106 células CD3+ CD56-/kg de peso do paciente na configuração relacionada ou não relacionada compatível com HLA 7-8/8. O primeiro DLI enriquecido com células NK será administrado um a seis meses após o transplante. O segundo DLI enriquecido com células NK será administrado um a três meses após a primeira infusão, em pacientes com <grau II aGVHD no momento da infusão e não apresentaram toxicidades inaceitáveis ​​que estejam pelo menos possivelmente relacionadas ao DLI anterior e resolvidas grau 1 ou menos. O segundo DLI NÃO será administrado em pacientes com aGVHD ≥grau III no momento da infusão ou toxicidades inaceitáveis ​​pelo menos possivelmente relacionadas à primeira infusão. Se os pacientes tiverem GVHD e estavam em terapia imunossupressora no início do estudo, os pacientes continuarão com sua dose estável de agentes imunossupressores iniciados para terapia de GVHD aguda antes do DLI enriquecido com células NK e não diminuirão até pelo menos 6 semanas após cada NK DLI enriquecido com células (a menos que a progressão da doença ou a toxicidade do paciente pelos agentes exija redução precoce). As células NK doadoras serão infundidas em 30 minutos. Difenidramina 25 mg iv ou vo, e Acetaminofen 650 mg VO serão usados ​​antes de cada reinfusão, a menos que haja história de alergia ou contraindicação no paciente, caso em que será usada hidrocortisona 50mg IV.

Essas células são infundidas no paciente por meio de uma linha intravenosa periférica ou linha central. Se ocorrerem sinais de DECH após DLI enriquecido com células NK, agentes imunossupressores (prednisona, ciclosporina, tacrolimus e/ou micofenolato são as primeiras escolhas preferidas) podem ser iniciados.