Обогащенные NK-клетками Ph2 DCI с агонистом RLR9, DUK-CPG-001 от доноров после аллогенной ТСК (NK-DCI)

Это рандомизированное параллельное исследование II фазы для оценки показателей выживаемости без прогрессирования и неприемлемой токсичности у пациентов, получающих инфузии донорских лимфоцитов, обогащенных NK-клетками, при введении отдельно или с агонистом TLR9, DUK-CPG-001. от родственного или неродственного донора с HLA-совместимостью 7-8/8 (группа A) или родственного донора с совместимостью HLA 4-6/8 (группа B) после аллогенной трансплантации стволовых клеток с уменьшенной интенсивностью или неабляционной трансплантации. Рандомизация будет стратифицирована по типам заболеваний (миелоидные и лимфоидные злокачественные новообразования).

Пациент до начала терапии В течение 21 дня до начала терапии у пациентов будет обновленный анамнез и проведен медицинский осмотр, лабораторные анализы, сбор стула и тест на беременность, если пациентка является женщиной детородного возраста. У пациентов будут хранить кровь или костный мозг для анализа иммунной функции и химеризма. Тесты, документирующие болезненное состояние пациента, также необходимы при включении в исследование (аспирация / биопсия костного мозга, исследования крови и / или рентгенографические тесты, такие как КТ, МРТ, ПЭТ, как определено лечащим врачом, и как требуется для стандартизированных оценок ответа) .

Донорский аферез и обработка клеток Доноры вернутся в центр для получения свежей коллекции NK-клеток, и им не потребуется мобилизация фактора роста. Для каждой инфузии NK-клеток будет использоваться одна коллекция. Клетки переливают сразу после сбора и обработки или на следующий день. Обработка клеток будет проводиться в нашей лаборатории криоконсервации в соответствии с СОП для сбора, маркировки и обработки. Клетки будут выделены NK с использованием антитела к CD56 (реагент CliniMACS CD56), инструмента CliniMACSplus и набора трубок CliniMACS, предоставленных Miltenyi Biotec, с использованием протокола компании (Miltenyi Biotec Inc, Оберн, Калифорния). Будет проведен подсчет клеток до и после обработки, жизнеспособность, анализ гемопоэтических клеток-предшественников (HPCA) и анализ потока в соответствии с SOP.

Оценка состояния пациента При оценке заболевания будут использоваться стандартизированные критерии и должно включать тщательное изучение исследований, необходимых для выявления заболевания (ПЭТ, рентгенограммы, иммунофенотип, костный мозг, молекулярные исследования и т. д.). Повторная постановка может быть изменена по усмотрению врача-трансплантолога, наблюдающего за пациентом (все они являются соисследователями в этом исследовании), если пациент чувствует прогрессирование до этих временных точек, но рекомендуемая повторная постановка составляет каждые 3 месяца в течение 1 года после последней NK- обогащенный DLI, каждые 6 месяцев в течение следующих 2 лет, затем по клиническим показаниям. Исследования восстановления иммунитета до и через 1 и 7 дней после каждого DLI, обогащенного NK-клетками, и через 3, 6 и 12 месяцев после последнего DLI, обогащенного NK. Определение химеризма (методом короткого тандемного повторного анализа, который используется в нашей лаборатории DUKE HLA с чувствительностью 2 %) непосредственно перед каждым DLI, обогащенным NK-клетками, и через 3, 6, 12 месяцев после последнего DLI, обогащенного NK.

Токсичность будет официально оцениваться после инфузии и через неделю (больше по решению лечащей бригады) и как минимум раз в две недели в течение 6 недель после инфузии, затем каждые 3 месяца, начиная с 3 месяцев после второго DLI в течение первого года. Оценки включают анамнез (специфический для желудочно-кишечной токсичности, а также общие новые проблемы), медицинский осмотр, общий анализ крови, функциональные тесты печени (минимум АСТ, АЛТ, билирубин) и химический анализ CS, чтобы включить креатинин и азот мочевины для оценки токсичности в соответствии с общим NCI. критерии токсичности (версия 4) и стандартные критерии РТПХ (приложение I). Дальнейшее наблюдение потребуется по мере необходимости, если у пациента возникнет токсичность из-за процедур трансплантации или инфузии. Пациентов со степенью токсичности 3 или выше в связи с исследованием будут осматривать как минимум раз в две недели до тех пор, пока токсичность не станет ниже 3 степени, после чего они будут рассматриваться как клинически приемлемые.

Сбор стула и анализ микробиома:

Мы будем собирать образцы стула у пациентов в следующие моменты времени на протяжении всего исследования: до DLI, день +7, до второго DLI, день +7, затем каждые 3 месяца после DLI в течение одного года. Образцы стула пациентов могут храниться при температуре 4°C до 24 часов перед замораживанием при -80°C для анализа серии.

Инфузия NK-клеток пациента и план введения CpG Целевая доза клеток для DLI, обогащенного NK-клетками, будет равна количеству клеток, которое может быть собрано с менее чем 0,5 x 106 CD3+ CD56-клеток/кг веса пациента в 4-6/8 HLA- совпадающих родственных условиях и 1 x 106 CD3+ CD56-клеток/кг веса пациента при 7-8/8 HLA-совместимых родственных или неродственных условиях. Первый DLI, обогащенный NK-клетками, будет вводиться через один-шесть месяцев после трансплантации. Второй DLI, обогащенный NK-клетками, будет вводиться через один-три месяца после первой инфузии у пациентов с оРТПХ < II степени на момент инфузии и у которых не было неприемлемой токсичности, которая, по крайней мере, возможно, связана с предыдущим DLI и разрешилась. до 1 класса и ниже. Второй DLI НЕ будет вводиться пациентам с оРТПХ ≥III степени во время инфузии или с неприемлемой токсичностью, по крайней мере, возможно, связанной с первой инфузией. Если у пациентов есть РТПХ и они получали иммуносупрессивную терапию на момент включения в исследование, пациенты будут продолжать получать стабильную дозу иммунодепрессантов, начатую для терапии острой РТПХ до DLI, обогащенного NK-клетками, и не будут снижаться, по крайней мере, в течение 6 недель после каждого NK. клеточно-обогащенный DLI (если только прогрессирование заболевания или токсичность агентов для пациента не требуют более раннего снижения дозы). Донорские NK-клетки будут вводиться в течение 30 минут. Дифенгидрамин 25 мг внутривенно или перорально и ацетаминофен 650 мг перорально будут использоваться перед каждой реинфузией, если у пациента нет аллергии или противопоказаний в анамнезе, и в этом случае будет использоваться гидрокортизон 50 мг внутривенно.

Эти клетки вводят пациенту через периферический внутривенный катетер или центральный катетер. Если признаки РТПХ появляются после DLI, обогащенного NK-клетками, можно начать иммуносупрессивные препараты (преднизолон, циклоспорин, такролимус и/или микофенолат, предпочтительные препараты первого выбора).