DCI wzbogacone w komórki Ph2 NK z agonistą RLR9, DUK-CPG-001 od dawców po allogenicznym SCT (NK-DCI)

Jest to randomizowane, równoległe badanie fazy II, mające na celu ocenę odsetka przeżycia wolnego od progresji choroby i niedopuszczalnej toksyczności u pacjentów otrzymujących infuzje limfocytów dawcy (DLI) wzbogacone w komórki NK, podawane samodzielnie lub z agonistą TLR9, DUK-CPG-001, od spokrewnionego lub niespokrewnionego dawcy 7-8/8 HLA (kohorta A) lub 4-6/8 dawcy spokrewnionego HLA (kohorta B) po przeszczepieniu allogenicznych komórek macierzystych o zmniejszonej intensywności lub nieablacyjnym. Randomizacja zostanie podzielona na warstwy według typów chorób (nowotwory szpikowe i limfoidalne).

Pacjent przed rozpoczęciem leczenia W ciągu 21 dni przed rozpoczęciem leczenia u pacjentek zostanie przeprowadzony zaktualizowany wywiad i badanie przedmiotowe, badania laboratoryjne, pobranie kału i test ciążowy, jeśli pacjentka jest kobietą w wieku rozrodczym. Pacjenci będą mieli przechowywaną krew lub szpik do analizy funkcji odpornościowej i chimeryzmu. Testy dokumentujące stan chorobowy pacjenta są również wymagane na początku badania (aspiracja/biopsja szpiku kostnego, badania krwi i/lub badania radiograficzne, takie jak tomografia komputerowa, rezonans magnetyczny, skany PET, zgodnie z ustaleniami lekarza prowadzącego i zgodnie z wymogami standaryzowanych ocen odpowiedzi) .

Afereza dawcy i obróbka komórek Dawcy wrócą do ośrodka po świeże pobranie komórek NK i nie będą potrzebować mobilizacji czynnika wzrostu. Do każdej infuzji komórek NK zostanie wykorzystana jedna kolekcja. Komórki zostaną przetoczone natychmiast po pobraniu i przetworzeniu lub następnego dnia. Obróbka komórek zostanie przeprowadzona w naszym laboratorium kriokonserwacji zgodnie z SOP w zakresie pobierania, etykietowania i obsługi. Komórki zostaną poddane selekcji NK przy użyciu przeciwciała CD56 (odczynnik CliniMACS CD56), instrumentu CliniMACSplus i zestawu rurek CliniMACS dostarczonych przez Miltenyi Biotec przy użyciu protokołu firmowego (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, Kalifornia). Zostanie przeprowadzona liczba komórek przed i po przetwarzaniu, żywotność, test hematopoetycznych komórek progenitorowych (HPCA) i analiza przepływu zgodnie z SOP.

Ocena pacjenta Ocena choroby będzie oparta na standardowych kryteriach i będzie obejmować staranne zbadanie badań niezbędnych do wykrycia choroby (PET, zdjęcia rentgenowskie, fenotyp immunologiczny, badania szpiku, badania molekularne itp.). Ponowne oszacowanie może zostać zmienione według uznania lekarza transplantologa, który śledził pacjenta (wszyscy są badaczami podrzędnymi w tym badaniu), jeśli uważa się, że u pacjenta nastąpiła progresja przed tymi punktami czasowymi, ale zalecana ponowna ocena to co 3 miesiące przez 1 rok po ostatnim NK- wzbogacone DLI, co 6 miesięcy przez następne 2 lata, a następnie zgodnie ze wskazaniami klinicznymi. Badania rekonstytucji immunologicznej przed i 1 i 7 dni po każdym DLI wzbogaconym w komórki NK oraz 3, 6 i 12 miesięcy po ostatnim DLI wzbogaconym w NK. Określenie chimeryzmu (za pomocą analizy krótkich powtórzeń tandemowych stosowanych w naszym laboratorium DUKE HLA z 2% czułością) tuż przed każdym DLI wzbogaconym w komórki NK oraz 3, 6, 12 miesięcy po ostatnim DLI wzbogaconym w NK.

Toksyczność zostanie formalnie oceniona po infuzji i tydzień później (więcej zgodnie z ustaleniami zespołu terapeutycznego) oraz co najmniej co drugi tydzień do 6 tygodni po infuzji, a następnie co 3 miesiące, począwszy od 3 miesięcy po drugim DLI przez pierwszy rok. Oceny obejmują wywiad (specyficzny dla toksyczności przewodu pokarmowego, jak również ogólne nowe problemy), badanie fizykalne, morfologię krwi, testy czynnościowe wątroby (minimum AST, ALT, bilirubina) i chemię CS, aby uwzględnić kreatyninę i BUN do oceny toksyczności zgodnie z powszechnym NCI kryteria toksyczności (wersja 4) i standardowe kryteria GVHD (załącznik I). W razie potrzeby konieczna będzie dalsza obserwacja, jeśli u pacjenta wystąpią objawy toksyczności związane z procedurami przeszczepu lub infuzji. Pacjenci z toksycznością stopnia 3 lub wyższym spowodowaną badaniem będą przyjmowani co najmniej co drugi tydzień, aż toksyczność spadnie poniżej stopnia 3, a następnie zostaną uznani za odpowiednich klinicznie.

Pobieranie kału i analiza mikrobiomu:

Będziemy zbierać próbki kału od pacjentów w następujących punktach czasowych w trakcie badania: przed DLI, dzień +7, przed drugim DLI, dzień +7, następnie co 3 miesiące po DLI przez jeden rok. Próbki kału pacjentów można przechowywać w temperaturze 4°C przez maksymalnie 24 godziny przed zamrożeniem w temperaturze -80°C do analizy partii.

Infuzja komórek NK pacjenta i plan podawania CpG Docelowa dawka komórek dla DLI wzbogaconej w komórki NK będzie wynosić tyle komórek, ile można zebrać przy mniej niż 0,5 x 106 komórek CD3+ CD56-/kg masy ciała pacjenta w 4-6/8 HLA- dopasowane pokrewne ustawienie i 1 x 106 komórek CD3+ CD56-/kg masy ciała pacjenta w 7-8/8 dopasowanych pod względem HLA ustawieniach pokrewnych lub niepowiązanych. Pierwszy DLI wzbogacony w komórki NK zostanie podany od jednego do sześciu miesięcy po przeszczepie. Drugi DLI wzbogacony w komórki NK zostanie podany od jednego do trzech miesięcy po pierwszym wlewie pacjentom z aGVHD < stopnia II w czasie wlewu i u których nie wystąpiły niedopuszczalne objawy toksyczności, które są co najmniej prawdopodobnie związane z poprzednim DLI i ustąpiły do klasy 1 lub niższej. Drugi DLI NIE zostanie podany pacjentowi z aGVHD stopnia ≥ III w czasie infuzji lub z niedopuszczalną toksycznością, przynajmniej prawdopodobnie związaną z pierwszą infuzją. Jeśli pacjenci mają GVHD i byli na terapii immunosupresyjnej w momencie włączenia do badania, pacjenci będą kontynuować stałą dawkę środków immunosupresyjnych rozpoczętą w leczeniu ostrej GVHD przed DLI wzbogaconym w komórki NK i nie zmniejszą się do co najmniej 6 tygodni po każdym NK DLI wzbogacone komórkami (chyba że progresja choroby lub toksyczność pacjenta ze środków wymaga wcześniejszego zmniejszenia dawki). Komórki NK dawcy będą podawane w infuzji przez 30 minut. Difenhydramina 25 mg dożylnie lub doustnie oraz acetaminofen 650 mg doustnie będą stosowane przed każdą reinfuzją, chyba że u pacjenta występowała alergia lub przeciwwskazania w wywiadzie. W takim przypadku zostanie zastosowany hydrokortyzon 50 mg dożylnie.

Komórki te podaje się pacjentowi przez obwodową linię dożylną lub linię centralną. Jeśli objawy GVHD wystąpią po DLI wzbogaconej w komórki NK, można rozpocząć leczenie lekami immunosupresyjnymi (prednizon, cyklosporyna, takrolimus i/lub mykofenolan, preferowane leki pierwszego wyboru).