DCI enriquecido con células Ph2 NK sin agonista de RLR9, DUK-CPG-001 de donantes después de SCT alogénico (NK-DCI)

Este es un estudio aleatorizado, paralelo de fase II para evaluar las tasas de supervivencia libre de progresión y toxicidad inaceptable en pacientes que reciben infusiones de linfocitos de donantes (DLI) enriquecidas con células NK cuando se administran solos o con el agonista de TLR9, DUK-CPG-001, de un donante emparentado o no emparentado con 7-8/8 HLA compatible (Cohorte A) o un donante emparentado con 4-6/8 HLA compatible (Cohorte B) después de un alotrasplante de células madre de intensidad reducida o no ablativo. La aleatorización se estratificará por tipos de enfermedad (neoplasias malignas mieloides versus linfoides).

Paciente antes de comenzar la terapia Dentro de los 21 días previos al inicio de la terapia, se realizará un historial y un examen físico actualizados a los pacientes, análisis de laboratorio, recolección de heces y prueba de embarazo si el paciente es una mujer en edad fértil. Los pacientes tendrán sangre o médula almacenada para el análisis de la función inmunológica y el quimerismo. También se requieren pruebas que documenten el estado de la enfermedad del paciente al ingresar al estudio (aspirado/biopsia de médula ósea, estudios de sangre y/o pruebas radiográficas como tomografías computarizadas, resonancias magnéticas, tomografías por emisión de positrones según lo determine el médico tratante y según lo requieran las evaluaciones de respuesta estandarizadas) .

Aféresis del donante y procesamiento de células Los donantes regresarán al centro para una nueva recolección de células NK y no necesitarán la movilización del factor de crecimiento. Se utilizará una colección para cada infusión de células NK. Las células se transfundirán inmediatamente después de la recolección y el procesamiento o al día siguiente. El procesamiento de células se realizará en nuestro laboratorio de crioconservación de acuerdo con SOP para recolección, etiquetado y manipulación. Las células se seleccionarán mediante NK mediante un anticuerpo CD56 (reactivo CliniMACS CD56), un instrumento CliniMACSplus y un conjunto de tubos CliniMACS proporcionados por Miltenyi Biotec mediante el protocolo de la empresa (Miltenyi Biotec Inc, Auburn, California). Se realizará el recuento de células antes y después del procesamiento, la viabilidad, el ensayo de células progenitoras hematopoyéticas (HPCA) y el análisis de flujo según SOP.

Evaluación del paciente La evaluación de la enfermedad utilizará criterios estandarizados e incluirá un examen cuidadoso de los estudios necesarios para detectar la enfermedad (PET, radiografías, inmunofenotipo, médula, estudios moleculares, etc.). La reclasificación puede modificarse a discreción del médico de trasplante que sigue al paciente (que son todos subinvestigadores en este estudio) si se considera que el paciente está progresando antes de estos puntos de tiempo, pero la reclasificación recomendada es cada 3 meses durante 1 año después de la última NK- DLI enriquecido, cada 6 meses durante los próximos 2 años, luego según lo indicado clínicamente. Estudios de reconstitución inmunitaria antes y 1 y 7 días después de cada DLI enriquecida con células NK, y 3, 6 y 12 meses después de la última DLI enriquecida con NK. Determinación de quimerismo (mediante análisis repetidos en tándem cortos en uso en nuestro laboratorio DUKE HLA con una sensibilidad del 2 %) justo antes de cada DLI enriquecida con células NK y 3, 6 y 12 meses después de la última DLI enriquecida con NK.

La toxicidad se evaluará formalmente después de la infusión y una semana después (más según lo determine el equipo de tratamiento) y como mínimo cada dos semanas hasta las 6 semanas posteriores a la infusión, luego cada 3 meses a partir de los 3 meses posteriores a la segunda DLI durante el primer año. Las evaluaciones incluyen antecedentes (específicos de la toxicidad GI, así como problemas generales nuevos), examen físico, CBC, pruebas de función hepática (AST, ALT, bilirrubina como mínimo) y química CS para incluir creatinina y BUN para la evaluación de toxicidad siguiendo el NCI común criterios de toxicidad (versión 4) y criterios estándar de EICH (anexo I). Se requerirá un seguimiento adicional según sea necesario si el paciente presenta toxicidad debido a los procedimientos de trasplante o infusión. Los pacientes con una toxicidad de grado 3 o mayor debido al estudio serán vistos cada dos semanas como mínimo hasta que la toxicidad sea < grado 3, y luego se considerarán clínicamente apropiados.

Recolección de heces y análisis de microbioma:

Recopilaremos muestras de heces de los pacientes en los siguientes puntos temporales a lo largo del estudio: antes de la DLI, día +7, antes de la segunda DLI, el día +7, luego cada 3 meses después de la DLI durante un año. Las muestras de heces de los pacientes se pueden almacenar a 4 °C durante un máximo de 24 h antes de congelarlas a -80 °C para el análisis por lotes.

Infusión de células NK al paciente y plan de administración de CpG La dosis de células diana para la DLI enriquecida con células NK será tantas células como se puedan recolectar con menos de 0,5 x 106 CD3+ CD56- células/kg de peso del paciente en el 4-6/8 HLA- entorno relacionado emparejado y 1 x 106 células CD3+ CD56-/kg de peso del paciente en el entorno relacionado o no relacionado con HLA emparejado 7-8/8. El primer DLI enriquecido con células NK se administrará de uno a seis meses después del trasplante. El segundo DLI enriquecido con células NK se administrará de uno a tres meses después de la primera infusión, en pacientes que tienen aGVHD < grado II en el momento de la infusión y no han tenido toxicidades inaceptables que estén al menos posiblemente relacionadas con el DLI anterior y se resolvieron. al grado 1 o menos. El segundo DLI NO se administrará en pacientes con aGVHD ≥grado III en el momento de la infusión o toxicidades inaceptables al menos posiblemente relacionadas con la primera infusión. Si los pacientes tienen GVHD y estaban en terapia inmunosupresora al ingresar al estudio, los pacientes continuarán con su dosis estable de agentes inmunosupresores que comenzaron para la terapia de GVHD aguda antes de la DLI enriquecida con células NK, y no disminuirán hasta al menos 6 semanas después de cada NK. DLI enriquecido en células (a menos que la progresión de la enfermedad o la toxicidad de los agentes en el paciente requieran una reducción gradual más temprana). Las células NK del donante se infundirán durante 30 minutos. Antes de cada reinfusión se utilizará difenhidramina 25 mg iv o vo y paracetamol 650 mg vo, salvo que existan antecedentes de alergia o contraindicación en el paciente, en cuyo caso se utilizará hidrocortisona 50 mg iv.

Estas células se infunden al paciente a través de una vía intravenosa periférica o vía central. Si aparecen signos de GVHD después de la DLI enriquecida con células NK, se pueden iniciar agentes inmunosupresores (prednisona, ciclosporina, tacrolimus y/o micofenolato como primeras opciones preferidas).