Aminosäureprofil und synthetische Reaktion von Muskelprotein auf den Verzehr von Fleisch oder pflanzlichen Alternativen

Studiendesign:

Der erste Besuch wird ein kurzes Treffen sein, das über Zoom mit einer der Ermittlerinnen (Karine Schaal) durchgeführt wird, die die Studiendetails mit der Freiwilligen bespricht, ihre Fragen beantwortet und ihre Einwilligung nach Aufklärung einholt. Die Probanden unterzeichnen die Einverständniserklärung elektronisch mit DocuSign. Die Probanden erhalten eine Kopie ihrer unterschriebenen Einverständniserklärung. Eine Papierkopie der Einverständniserklärung wird in einem verschlossenen Aktenschrank im Büro des Hauptforschers aufbewahrt.

Freiwillige der Studie werden zu vier verschiedenen Gelegenheiten zum CTSC Clinical Research Center (CCRC) kommen. Das CCRC befindet sich im Cypress Building neben dem UC Davis Medical Center (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

Die vier Studienbesuche sind Testbesuche, die über einen Zeitraum von zwei Wochen (d. h. zweimal pro Woche für 2 Wochen), zur gleichen Zeit am Morgen im Anschluss und über Nacht (> 12 Stunden) fasten. Sie werden gebeten, 24 Stunden vor jedem Besuch auf starke körperliche Betätigung, Koffein, Nikotin und Alkohol zu verzichten. Weibliche Freiwillige werden gebeten, ihre Studienbesuche innerhalb der ersten zwei Wochen ihres Menstruationszyklus (beginnend am ersten Tag der Menstruationsblutung) zu planen, um Schwankungen des Eierstockhormons zu kontrollieren, die sich auf die Verdauung und den Stoffwechsel auswirken können.

Bei der Ankunft im CCRC beim ersten Testbesuch werden die Größe und das Gewicht jedes Freiwilligen gemessen.

I. Baseline-Blutentnahme. Die Probanden werden dann in einzelne Testräume gebracht, die mit einem neigbaren Phlebotomie-Sessel ausgestattet sind. Eine zugelassene Krankenschwester oder Krankenpflegekraft wird einen 22G-Katheter in eine Unterarmvene einführen und eine anfängliche Blutprobe von 3,5 ml wird entnommen.

II. Essen testen.

Nachdem die Ausgangsblutprobe entnommen wurde, konsumieren die Probanden einen der folgenden vier Burger in isostickischen Mengen, um 20 g Protein zu liefern:

• 106 g Rinderhackfleisch (85 % mager + 15 % Fett)
• 118 g Schweinehack (72,5 % mager + 27,5 % Fett)
• 113 g Beyond Meat® Patty
• 113 g Tofu-Pastetchen

Jedes Lebensmittel wird vor dem Kochen gewogen. Die Rindfleisch-, Schweinefleisch- und Beyond®-Burger werden auf einem elektrischen Innengrill gegrillt, bis die Innentemperatur 165 °F erreicht, um den USDA-Empfehlungen für Lebensmittelsicherheit (Rind- und Schweinefleisch, mindestens 160 °F) und den Herstelleranweisungen (Beyond Meat®) zu entsprechen. . Tofu-Burger sind vorgekocht und werden gemäß den Empfehlungen des Herstellers durch 2-minütiges Grillen erwärmt. Die Innentemperatur der Burger wird mit einem Fleischthermometer überwacht. Die Burger werden den Freiwilligen serviert, sobald sie fertig gekocht sind.

Die Probanden werden gebeten, jedes Pastetchen ohne Brötchen oder Gewürze innerhalb von 10 Minuten zu verzehren, und werden angewiesen, gründlich zu kauen. Sie werden auch gebeten, ein 6-Unzen-Glas Wasser mit der Mahlzeit zu trinken.

III. Postprandiale Blutentnahmen.

Nach dem Verzehr der Testmahlzeit verbleiben die Teilnehmer für weitere 3 Stunden am Forschungsstandort in ihrem individuellen Testraum und sitzen ruhig – sie können Bücher oder elektronische Geräte zum Zeitvertreib mitbringen. Fünf weitere Blutproben von jeweils 3,5 ml werden 30, 60, 90, 120 und 180 Minuten nach der Testmahlzeit entnommen, was insgesamt sechs Blutentnahmen von 3,5 ml pro Besuch (21 ml pro Besuch) und insgesamt 84 ml Blutentnahme entspricht für jedes Fach, das das gesamte Studium abschließt.

Das Blut wird in 3,5-ml-Serumtrennröhrchen gesammelt. Etwa 50 Mikroliter Vollblut werden verwendet, um den Blutzucker innerhalb von 5 Minuten nach der Entnahme zu messen. Der Rest wird 1 Stunde lang gerinnen gelassen, bevor er 10 Minuten lang bei 1000 x g zentrifugiert wird. Das Serum wird eingefroren und bis zur Verarbeitung bei -80 °C aufbewahrt. 100 Mikroliter jeder Serumprobe werden zur Bestimmung der Aminosäurekonzentrationen durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) am UC Davis Proteomics Core verwendet. Weitere 100 Mikroliter werden verwendet, um die Insulinkonzentrationen über einen enzymgebundenen Immunoassay zu messen. Der Rest des Serums wird für die Entwicklung des mTORC1-Bioassays verwendet.

Die Reihenfolge, in der die Probanden jede Testmahlzeit erhalten, wird randomisiert, um einen Reihenfolgeeffekt zu vermeiden, und zwischen den Besuchen wird eine mindestens zweitägige Auswaschphase gewährt.