Profilo degli amminoacidi e risposta sintetica delle proteine ​​muscolari al consumo di alternative a base di carne o vegetali

Disegno dello studio:

La prima visita sarà un breve incontro condotto su Zoom con uno dei ricercatori (Karine Schaal), che esaminerà i dettagli dello studio con il volontario, risponderà alle loro domande e otterrà il consenso informato. I soggetti firmeranno elettronicamente il consenso informato, utilizzando DocuSign. Ai soggetti verrà consegnata una copia del loro modulo di consenso informato firmato. Una copia cartacea del modulo di consenso verrà conservata in un archivio chiuso a chiave nell'ufficio del ricercatore principale.

I volontari dello studio verranno al CTSC Clinical Research Center (CCRC) in quattro diverse occasioni. Il CCRC si trova nel Cypress Building adiacente all'UC Davis Medical Center (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

Le quattro visite di studio saranno visite di prova programmate su un periodo di due settimane (ad es. due volte a settimana per 2 settimane), alla stessa ora la mattina seguente e il digiuno notturno (> 12 ore). Verrà chiesto loro di astenersi da esercizio fisico intenso, caffeina, nicotina e alcol per 24 ore prima di ogni visita. Alle volontarie verrà chiesto di programmare le loro visite di studio entro le prime due settimane del loro ciclo mestruale (a partire dal primo giorno di sanguinamento mestruale), al fine di controllare le fluttuazioni degli ormoni ovarici che possono influire sulla digestione e sul metabolismo.

All'arrivo al CCRC durante la prima visita di prova, verranno misurati l'altezza e il peso di ciascun volontario.

I. Prelievo di sangue di riferimento. I soggetti verranno quindi collocati in sale di prova individuali, dotate di una poltrona per flebotomia reclinabile. Un infermiere registrato o un infermiere professionista inserirà un catetere da 22G in una vena dell'avambraccio e verrà raccolto un campione di sangue basale iniziale di 3,5 ml.

II. Pasto di prova.

Dopo aver raccolto il campione di sangue di base, i soggetti consumeranno uno dei seguenti quattro hamburger in quantità isonitrogena per fornire 20 g di proteine:

• Polpette di manzo macinato da 106 g (85% magro + 15% grasso)
• 118 g di carne di maiale macinata (72,5% magro + 27,5% grasso)
• Patty Beyond Meat® da 113 g
• Tortino di tofu da 113 g

Ogni alimento verrà pesato prima della cottura. Gli hamburger di manzo, maiale e Beyond® saranno grigliati su una griglia elettrica interna fino a quando la temperatura interna raggiunge i 165°F per rispettare le raccomandazioni dell'USDA per la sicurezza alimentare (manzo e maiale, minimo 160°F) e le istruzioni del produttore (Beyond Meat®) . Gli hamburger di tofu sono precotti e saranno riscaldati grigliandoli per 2 minuti, secondo le raccomandazioni del produttore. La temperatura interna degli hamburger verrà monitorata utilizzando un termometro per carne. Gli hamburger verranno serviti ai volontari appena terminata la cottura.

Ai soggetti verrà chiesto di consumare ogni tortino senza panini o condimenti entro un periodo di 10 minuti e istruiti a masticare accuratamente. Verrà anche chiesto loro di bere un bicchiere d'acqua da 6 once durante il pasto.

III. Prelievi di sangue postprandiali.

Dopo aver consumato il pasto di prova, i partecipanti rimarranno nel sito di ricerca, nella loro stanza di prova individuale, per altre 3 ore, seduti in silenzio - possono portare libri o dispositivi elettronici per passare il tempo. Verranno prelevati altri cinque campioni di sangue da 3,5 ml ciascuno a 30, 60, 90, 120 e 180 minuti dopo il pasto di prova, per un totale di sei prelievi di sangue di 3,5 ml per visita (21 ml per visita) e 84 ml di sangue prelevato in totale per ogni soggetto che completa l'intero studio.

Il sangue sarà raccolto in provette di separazione del siero da 3,5 mL. Verranno utilizzati circa 50 microlitri di sangue intero per misurare la glicemia entro 5 minuti dal prelievo. Il resto verrà lasciato coagulare per 1 ora prima di essere centrifugato a 1000 x g per 10 minuti. Il siero sarà congelato e conservato a -80°C fino al processamento. 100 microlitri di ciascun campione di siero verranno utilizzati per determinare le concentrazioni di aminoacidi mediante cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) presso l'UC Davis Proteomics Core. Altri 100 microlitri verranno utilizzati per misurare le concentrazioni di insulina tramite immunodosaggio enzimatico. Il resto del siero verrà utilizzato per sviluppare il biodosaggio mTORC1.

L'ordine in cui i soggetti ricevono ogni pasto di prova sarà randomizzato per evitare qualsiasi effetto dell'ordine e verrà concesso un periodo di sospensione di almeno due giorni tra le visite.