Aminozuurprofiel en synthetische reactie op spiereiwitten bij consumptie van vlees of plantaardige alternatieven

Studie ontwerp:

Het eerste bezoek is een korte ontmoeting via Zoom met een van de onderzoekers (Karine Schaal), die de details van het onderzoek met de vrijwilliger doorneemt, hun vragen beantwoordt en geïnformeerde toestemming krijgt. Proefpersonen ondertekenen de geïnformeerde toestemming elektronisch met behulp van DocuSign. Proefpersonen krijgen een kopie van hun ondertekende geïnformeerde toestemmingsformulier. Een papieren exemplaar van het toestemmingsformulier wordt bewaard in een afgesloten archiefkast op het kantoor van de hoofdonderzoeker.

Studievrijwilligers zullen bij vier verschillende gelegenheden naar het CTSC Clinical Research Center (CCRC) komen. Het CCRC bevindt zich in het Cypress Building naast het UC Davis Medical Center (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

De vier studiebezoeken zijn testbezoeken die over een periode van twee weken worden gepland (d.w.z. tweemaal per week gedurende 2 weken), 's ochtends op hetzelfde tijdstip en 's nachts (> 12 uur) nuchter. Ze zullen worden gevraagd om 24 uur voorafgaand aan elk bezoek af te zien van krachtige lichaamsbeweging, cafeïne, nicotine en alcohol. Vrouwelijke vrijwilligers zal worden gevraagd om hun studiebezoeken te plannen binnen de eerste twee weken van hun menstruele cyclus (beginnend op de eerste dag van de menstruele bloeding), om hormoonfluctuaties in de eierstokken onder controle te houden die de spijsvertering en het metabolisme kunnen beïnvloeden.

Bij aankomst in het CCRC tijdens het eerste testbezoek worden de lengte en het gewicht van elke vrijwilliger gemeten.

I. Basislijn bloedafname. Onderwerpen worden vervolgens in individuele testkamers geplaatst, uitgerust met een verstelbare aderlatingsfauteuil. Een geregistreerde verpleegkundige of verpleegkundig specialist brengt een 22G-katheter in een ader in de onderarm en er wordt een eerste basislijnbloedmonster van 3,5 ml verzameld.

II. Proef maaltijd.

Nadat het basisbloedmonster is verzameld, consumeren proefpersonen een van de volgende vier hamburgers in isonitrogene hoeveelheden om 20 g eiwit te leveren:

• 106 g rundergehaktpasteitje (85% mager + 15% vet)
• 118 g gemalen varkensvlees (72,5% mager + 27,5% vet)
• 113 g Beyond Meat®-pasteitje
• 113 g tofu-pasteitje

Elk voedsel wordt voor het koken gewogen. De hamburgers van rundvlees, varkensvlees en Beyond® worden gegrild op een elektrische binnengrill tot de interne temperatuur 165°F bereikt om te voldoen aan de USDA-aanbevelingen voor voedselveiligheid (rundvlees en varkensvlees, minimaal 160°F) en instructies van de fabrikant (Beyond Meat®) . Tofuburgers zijn voorgekookt en worden opgewarmd door 2 minuten te grillen, volgens de aanbevelingen van de fabrikant. De interne temperatuur van de hamburgers wordt gecontroleerd met een vleesthermometer. De burgers worden aan de vrijwilligers geserveerd zodra ze klaar zijn met koken.

Proefpersonen wordt gevraagd om elk pasteitje binnen een periode van 10 minuten zonder broodjes of kruiden te consumeren en wordt geïnstrueerd om grondig te kauwen. Ze zullen ook worden gevraagd om bij de maaltijd een glas water van 6 ounce te drinken.

III. Postprandiale bloedafname.

Na consumptie van de testmaaltijd blijven de deelnemers nog 3 uur op de onderzoekslocatie, in hun individuele testruimte, rustig zitten - ze mogen boeken of elektronische apparaten meenemen om de tijd te doden. Vijf extra bloedmonsters van elk 3,5 ml worden verkregen op 30, 60, 90, 120 en 180 minuten na de testmaaltijd, in totaal zes bloedafnames van 3,5 ml per bezoek (21 ml per bezoek) en in totaal 84 ml bloed. voor elk onderwerp dat de volledige studie voltooit.

Bloed wordt verzameld in serumscheidingsbuizen van 3,5 ml. Binnen 5 minuten na de afname wordt ongeveer 50 microliter volbloed gebruikt om de bloedglucose te meten. De rest mag 1 uur stollen voordat het gedurende 10 minuten bij 1000 x g wordt gecentrifugeerd. Het serum wordt ingevroren en bij -80°C bewaard totdat het wordt verwerkt. 100 microliter van elk serummonster zal worden gebruikt voor het bepalen van aminozuurconcentraties door hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC) bij de UC Davis Proteomics Core. Nog eens 100 microliter zal worden gebruikt om insulineconcentraties te meten via enzymgekoppelde immunoassay. De rest van het serum zal worden gebruikt voor het ontwikkelen van de mTORC1-bioassay.

De volgorde waarin proefpersonen elke testmaaltijd krijgen, wordt willekeurig gekozen om elk volgorde-effect te voorkomen, en tussen de bezoeken wordt een uitspoelperiode van ten minste twee dagen gegeven.