Perfil de aminoácidos e resposta sintética de proteínas musculares ao consumo de carne ou alternativas à base de plantas

Design de estudo:

A primeira visita será uma breve reunião realizada pelo Zoom com uma das pesquisadoras (Karine Schaal), que irá repassar os detalhes do estudo com o voluntário, responder suas perguntas e obter o consentimento informado. Os sujeitos assinarão o consentimento informado eletronicamente, usando o DocuSign. Os participantes receberão uma cópia de seu formulário de consentimento informado assinado. Uma cópia em papel do formulário de consentimento será mantida em um arquivo trancado no escritório do investigador principal.

Os voluntários do estudo virão ao CTSC Clinical Research Center (CCRC) em quatro ocasiões diferentes. O CCRC está localizado no Cypress Building adjacente ao UC Davis Medical Center (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

As quatro visitas do estudo serão visitas de teste agendadas para um período de duas semanas (ou seja, duas vezes por semana durante 2 semanas), no mesmo horário na manhã seguinte e durante a noite (> 12 horas) em jejum. Eles serão solicitados a abster-se de exercícios vigorosos, cafeína, nicotina e álcool por 24 horas antes de cada visita. As voluntárias serão solicitadas a agendar suas visitas de estudo nas primeiras duas semanas de seu ciclo menstrual (começando no primeiro dia de sangramento menstrual), a fim de controlar as flutuações hormonais ovarianas que podem afetar a digestão e o metabolismo.

Na chegada ao CCRC na primeira visita de teste, a altura e o peso de cada voluntário serão medidos.

I. Coleta de sangue basal. Os indivíduos serão então colocados em salas de teste individuais, equipadas com uma poltrona reclinável para flebotomia. Uma enfermeira ou profissional de enfermagem inserirá um cateter 22G em uma veia do antebraço e uma amostra de sangue inicial de 3,5 mL será coletada.

II. Refeição de teste.

Após a coleta da amostra de sangue da linha de base, os indivíduos consumirão um dos quatro hambúrgueres a seguir em quantidades isonitrogenadas para fornecer 20 g de proteína:

• 106g de hambúrguer de carne moída (85% magra + 15% gordura)
• 118g de carne de porco moída (72,5% magra + 27,5% gordura)
• Hambúrguer Beyond Meat® 113g
• 113g de hambúrguer de tofu

Cada alimento será pesado antes de cozinhar. Os hambúrgueres de carne bovina, suína e Beyond® serão grelhados em uma grelha elétrica interna até que a temperatura interna atinja 165°F para cumprir as recomendações do USDA para segurança alimentar (bovina e suína, mínimo de 160°F) e as instruções do fabricante (Beyond Meat®) . Os hambúrgueres de tofu são pré-cozidos e serão aquecidos na grelha por 2 minutos, de acordo com as recomendações do fabricante. A temperatura interna dos hambúrgueres será monitorada por meio de um termômetro de carne. Os hambúrgueres serão servidos aos voluntários assim que terminarem de cozinhar.

Os indivíduos serão solicitados a consumir cada hambúrguer sem pãezinhos ou condimentos em um período de 10 minutos e instruídos a mastigar bem. Eles também serão solicitados a beber um copo de 6 onças de água com a refeição.

III. Coleta de sangue pós-prandial.

Após o consumo da refeição teste, os participantes permanecerão no local da pesquisa, em sua sala individual de testes, por mais 3 horas, sentados tranquilamente - poderão trazer livros ou aparelhos eletrônicos para passar o tempo. Mais cinco amostras de sangue de 3,5 mL cada serão obtidas aos 30, 60, 90, 120 e 180 minutos após a refeição teste, totalizando seis coletas de sangue de 3,5 mL por visita (21 mL por visita) e 84 mL de sangue coletado no total para cada sujeito que completa todo o estudo.

O sangue será coletado em tubos de separação de soro de 3,5 mL. Aproximadamente 50 microlitros de sangue total serão usados ​​para medir a glicose no sangue dentro de 5 minutos após a coleta. O resto será deixado coagular por 1 hora antes da centrifugação a 1000 x g por 10 minutos. O soro será congelado e mantido a -80°C até o processamento. 100 microlitros de cada amostra de soro serão usados ​​para determinar as concentrações de aminoácidos por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) no UC Davis Proteomics Core. Outros 100 microlitros serão usados ​​para medir as concentrações de insulina via imunoensaio enzimático. O restante do soro será utilizado para desenvolver o bioensaio mTORC1.

A ordem em que os indivíduos recebem cada refeição de teste será randomizada para evitar qualquer efeito de ordem, e pelo menos um período de intervalo de dois dias será concedido entre as visitas.