Profil aminokwasowy i reakcja syntezy białek mięśniowych na spożywanie mięsa lub alternatyw pochodzenia roślinnego

Projekt badania:

Pierwsza wizyta to krótkie spotkanie przeprowadzone przez Zoom z jedną z badaczek (Karine Schaal), która omówi szczegóły badania z ochotniczką, odpowie na jej pytania i uzyska świadomą zgodę. Osoby badane podpiszą świadomą zgodę elektronicznie, korzystając z DocuSign. Pacjenci otrzymają kopię podpisanego formularza świadomej zgody. Papierowa kopia formularza zgody będzie przechowywana w zamykanej szafce w gabinecie głównego badacza.

Wolontariusze uczestniczący w badaniu przyjdą do Centrum Badań Klinicznych CTSC (CCRC) przy czterech różnych okazjach. CCRC znajduje się w Cypress Building przylegającym do Centrum Medycznego UC Davis (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

Cztery wizyty studyjne będą wizytami testowymi zaplanowanymi na okres dwóch tygodni (tj. dwa razy w tygodniu przez 2 tygodnie), o tej samej porze rano i na czczo (> 12 godzin). Zostaną poproszeni o powstrzymanie się od intensywnych ćwiczeń, kofeiny, nikotyny i alkoholu przez 24 godziny przed każdą wizytą. Ochotniczki zostaną poproszone o zaplanowanie wizyt badawczych w ciągu pierwszych dwóch tygodni cyklu miesiączkowego (począwszy od pierwszego dnia krwawienia miesiączkowego), aby kontrolować wahania hormonów jajnikowych, które mogą wpływać na trawienie i metabolizm.

Po przybyciu do CCRC na pierwszą wizytę testową, każdemu ochotnikowi zostanie zmierzony wzrost i waga.

I. Podstawowe pobieranie krwi. Badani zostaną następnie umieszczeni w poszczególnych pokojach testowych, wyposażonych w rozkładany fotel do upuszczania krwi. Zarejestrowana pielęgniarka lub pielęgniarka wprowadza cewnik 22G do żyły przedramienia i pobiera wstępną próbkę krwi o objętości 3,5 ml.

II. Próbny posiłek.

Po pobraniu wyjściowej próbki krwi badani spożywają jeden z następujących czterech burgerów w izoazotowych ilościach, aby dostarczyć 20 g białka:

• 106 g paszteciku z mielonej wołowiny (85% chudego mięsa + 15% tłuszczu)
• 118 g mielonej wieprzowiny (72,5% chudego mięsa + 27,5% tłuszczu)
• 113g Pasztet Beyond Meat®
• 113g pasztetu z tofu

Każda żywność zostanie zważona przed gotowaniem. Burgery wołowe, wieprzowe i Beyond® będą grillowane na wewnętrznym grillu elektrycznym, aż wewnętrzna temperatura osiągnie 165°F, zgodnie z zaleceniami USDA dotyczącymi bezpieczeństwa żywności (wołowina i wieprzowina, minimum 160°F) i instrukcjami producenta (Beyond Meat®) . Burgery z tofu są wstępnie ugotowane i będą podgrzewane przez grillowanie przez 2 minuty, zgodnie z zaleceniami producenta. Wewnętrzna temperatura burgerów będzie monitorowana za pomocą termometru do mięsa. Burgery zostaną podane wolontariuszom zaraz po zakończeniu gotowania.

Badani zostaną poproszeni o zjedzenie każdego kotleta bez bułek lub przypraw w ciągu 10 minut i poinstruowani, aby dokładnie przeżuli. Zostaną również poproszeni o wypicie 6 uncji szklanki wody z posiłkiem.

III. Pobieranie krwi poposiłkowej.

Po spożyciu posiłku testowego uczestnicy pozostaną na miejscu badań, w swoim indywidualnym pokoju testowym, jeszcze przez 3 godziny, w ciszy siedząc – dla zabicia czasu mogą przynieść ze sobą książki lub urządzenia elektroniczne. Pięć kolejnych próbek krwi po 3,5 ml każda zostanie pobranych po 30, 60, 90, 120 i 180 minutach po posiłku testowym, w sumie sześć pobrań krwi po 3,5 ml na wizytę (21 ml na wizytę) i łącznie pobrane 84 ml krwi dla każdego przedmiotu kończącego całe badanie.

Krew zostanie pobrana do 3,5 ml probówek do oddzielania surowicy. Około 50 mikrolitrów pełnej krwi zostanie użyte do pomiaru poziomu glukozy we krwi w ciągu 5 minut od pobrania. Resztę pozostawia się do skrzepnięcia na 1 godzinę przed odwirowaniem przy 1000 x g przez 10 minut. Surowicę należy zamrozić i przechowywać w temperaturze -80°C do czasu przetworzenia. 100 mikrolitrów każdej próbki surowicy zostanie użyte do określenia stężeń aminokwasów za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) w UC Davis Proteomics Core. Kolejne 100 mikrolitrów zostanie użyte do pomiaru stężenia insuliny za pomocą testu immunologicznego związanego z enzymem. Pozostała część surowicy zostanie wykorzystana do opracowania testu biologicznego mTORC1.

Kolejność, w jakiej badani otrzymują każdy posiłek testowy, zostanie wybrana losowo, aby uniknąć efektu kolejności, a między wizytami zostanie podany co najmniej dwudniowy okres wymywania.