Аминокислотный профиль и реакция синтеза мышечного белка на потребление мяса или растительных альтернатив

Дизайн исследования:

Первый визит будет представлять собой краткую встречу, проведенную через Zoom с одним из исследователей (Карин Шаал), который обсудит детали исследования с волонтером, ответит на их вопросы и получит информированное согласие. Субъекты подписывают информированное согласие в электронном виде с помощью DocuSign. Субъектам будет предоставлена ​​​​копия их подписанной формы информированного согласия. Бумажная копия формы согласия будет храниться в запираемом картотеке в кабинете главного исследователя.

Добровольцы-исследователи будут приезжать в Центр клинических исследований CTSC (CCRC) четыре раза. CCRC расположен в здании Cypress Building, примыкающем к Медицинскому центру Калифорнийского университета в Дэвисе (2221 Stockton Blvd, Suite D, Sacramento CA 95817).

Четыре ознакомительных визита будут тестовыми визитами, запланированными на двухнедельный период (т. два раза в неделю в течение 2 недель), в одно и то же время утром и вечером (> 12 часов) натощак. Им будет предложено воздержаться от энергичных упражнений, кофеина, никотина и алкоголя в течение 24 часов до каждого визита. Женщин-добровольцев попросят запланировать свои исследовательские визиты в течение первых двух недель их менструального цикла (начиная с первого дня менструального кровотечения), чтобы контролировать колебания гормонов яичников, которые могут повлиять на пищеварение и обмен веществ.

По прибытии в CCRC во время первого тестового визита у каждого добровольца будут измерены рост и вес.

I. Базовый забор крови. Затем испытуемых помещают в отдельные испытательные комнаты, оборудованные креслом для флеботомии с откидывающейся спинкой. Дипломированная медсестра или практикующая медсестра вставит катетер 22G в вену предплечья, после чего будет взят исходный образец крови объемом 3,5 мл.

II. Пробный обед.

После того, как базовый образец крови будет собран, субъекты будут потреблять один из следующих четырех бургеров в изонитрогенных количествах, чтобы получить 20 г белка:

• 106 г котлеты из говяжьего фарша (85 % постного мяса + 15 % жира)
• 118 г свиного фарша (72,5% мяса + 27,5% жира)
• 113 г котлет Beyond Meat®
• 113 г котлеты из тофу

Каждое блюдо взвешивают перед приготовлением. Говядина, свинина и гамбургеры Beyond® будут жариться на электрическом гриле в помещении до тех пор, пока внутренняя температура не достигнет 165°F в соответствии с рекомендациями Министерства сельского хозяйства США по безопасности пищевых продуктов (говядина и свинина, минимум 160°F) и инструкциями производителя (Beyond Meat®). . Бургеры из тофу предварительно приготовлены и разогреваются на гриле в течение 2 минут в соответствии с рекомендациями производителя. Внутренняя температура гамбургеров будет контролироваться с помощью термометра для мяса. Бургеры будут поданы волонтерам, как только они будут готовы.

Субъектов попросят съесть каждую лепешку без булочек или приправ в течение 10 минут, а также тщательно пережевывать. Им также будет предложено выпить стакан воды на 6 унций во время еды.

III. Постпрандиальный забор крови.

После употребления тестовой еды участники останутся на исследовательском объекте в своей индивидуальной тестовой комнате еще на 3 часа, сидя в тишине — они могут принести книги или электронные устройства, чтобы скоротать время. Еще пять образцов крови по 3,5 мл будут получены через 30, 60, 90, 120 и 180 минут после тестового приема пищи, всего шесть заборов крови по 3,5 мл за посещение (21 мл за посещение) и всего 84 мл крови. для каждого предмета, завершающего все исследование.

Кровь будет собираться в пробирки для разделения сыворотки объемом 3,5 мл. Приблизительно 50 микролитров цельной крови будут использоваться для измерения уровня глюкозы в крови в течение 5 минут после взятия пробы. Остальным дают свернуться в течение 1 часа перед центрифугированием при 1000 x g в течение 10 минут. Сыворотку замораживают и хранят при -80°C до обработки. 100 микролитров каждого образца сыворотки будут использованы для определения концентрации аминокислот с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в Центре протеомики Калифорнийского университета в Дэвисе. Еще 100 мкл будут использованы для измерения концентрации инсулина с помощью иммуноферментного анализа. Остальная часть сыворотки будет использована для разработки биологического анализа mTORC1.

Порядок, в котором субъекты получают каждый тестовый прием пищи, будет случайным, чтобы избежать любого эффекта порядка, и между визитами будет даваться по крайней мере двухдневный период вымывания.