Vesikulogenese bei Kindern mit GH-Mangel (VESCIGHTP) (VESCIGHTP)

Methoden:

Im regionalen Referenzzentrum für Wachstumsstörungen, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Mailand, werden 10 Kinder beiderlei Geschlechts, die von isoliertem GH-Mangel betroffen sind, gemäß den in der AIFA-Anmerkung 39 für diese Pathologie festgelegten Kriterien rekrutiert (Kleinwuchs: ≤ - 3). SD oder ≤ -2 SD und Wachstumsgeschwindigkeit/Jahr ≤ -1,0 SD für Alter und Geschlecht, bewertet im Abstand von mindestens 6 Monaten und Spitzen-GH bei zwei verschiedenen stimulierenden pharmakologischen Tests < 8 ng/ml). Das Ausschlusskriterium aus der vorliegenden Studie (und aus der Behandlung mit rhGH) wird das Vorhandensein organischer Pathologien auf der Hypothalamus-Hypophysen-Ebene sein (bewertet durch Gehirn-MRT).

Unter grundlegenden Bedingungen (Vorbehandlung) werden wir mit der Erfassung klinischer und anthropometrischer/auxometrischer Daten fortfahren, einschließlich der Bewertung der Körperzusammensetzung mittels Bioimpedanzanalyse. Die gleiche Aufarbeitung wird bei der darauffolgenden 6-monatigen Nachuntersuchung wiederholt (siehe unten).

Jeder Proband wird einer Hormonersatztherapie mit rhGH in einer Dosis von 0,025–0,035 unterzogen mg/kg Körpergewicht pro Tag (oder 0,7-1,0). mg/m2 Körperoberfläche pro Tag).

Unter Fastenbedingungen (mindestens 12 Stunden) werden Blutproben bei T0 (d. h. vor Beginn der Hormonersatztherapie mit rhGH) und bei T6 (d. h. nach 6 Monaten rhGH, etwa 10–12 Stunden nach der Verabreichung) entnommen der Dosis des Vortages).

In den bei T0 und T6 entnommenen Proben werden die Dimensions- und Ableitungsprofile der EVs bestimmt. Marker für die folgenden Zellsubtypen werden identifiziert: Endothel (aktiviert und nicht), Monozyten, Neutrophile, Blutplättchen, Muskel, Knochen und Fettgewebe.

Unter Grundbedingungen (T0) und bei T6 werden den Patienten Proben zur Bestimmung der folgenden Parameter entnommen: großes Blutbild + Formel, Blutzucker, Insulin, glykiertes Hb, Triglyceride, Gesamtcholesterin, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1 , Osteocalcin, ICTP und PIIIINP.

Quantitative Daten werden je nach Bedarf als Mittelwert ± SD oder als Median mit Interquartilbereich (Q1-Q3) ausgedrückt. Kategoriale Daten werden als Häufigkeiten und Prozentsätze dargestellt, während kontinuierliche Variablen auf Normalität und Linearität getestet werden. Gegebenenfalls wird eine Protokolltransformation der Daten durchgeführt. Der gepaarte Student-T-Test (oder ein anderer nichtparametrischer Test) wird verwendet, um demografische, klinische und biochemische Merkmale derselben Probanden bei T0 vs. T6 zu vergleichen. EVs werden nach ihrer Größe (Exosomen, Mikrovesikel und Gesamt-EVs) und ihrem zellulären Ursprung unterteilt, der durch spezifische Marker (z. B. CD14+, CD61+, CD62E+, CD105+, SCGA+, FABP+ usw.) identifiziert wird. Eine multiple lineare Regressionsanalyse wird angewendet, um den Zusammenhang zwischen EVs (als Δ% zwischen T0 und T6 für das Dimensions- und auch Ableitungsprofil), den zirkulierenden IGF-1-Spiegeln (als Δ% zwischen T0 und T6) und der Wachstumsrate zu bewerten (T0 bis T6). Darüber hinaus wird ein gepaarter Student-t-Test verwendet, um die rhGH-induzierte Änderung des EV (T0 vs. T6) zu bewerten. Der Test wird für alle mit dem Größenprofil untersuchten EV-Populationen und für alle mit dem Ableitungsprofil untersuchten Vesikelmarker angewendet. Alternativ wird ein nichtparametrischer Test angewendet. Ein p-Wert < 0,05 wird berücksichtigt.