Vesiculogênese em crianças com deficiência de GH (VESCIGHTP) (VESCIGHTP)

Métodos:

No Centro de Referência Regional para Distúrbios do Crescimento, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milão, 10 crianças de ambos os sexos afetadas por deficiência isolada de GH serão recrutadas de acordo com os critérios estabelecidos na nota 39 da AIFA para esta patologia (baixa estatura: ≤ - 3 DP ou ≤ -2 DP e velocidade de crescimento/ano ≤ -1,0 DP para idade e sexo avaliados com pelo menos 6 meses de intervalo e pico de GH em dois testes farmacológicos estimulantes diferentes < 8 ng/ml). O critério de exclusão do presente estudo (e do tratamento com rhGH) será a presença de patologias orgânicas ao nível hipotálamo-hipófise (avaliadas por ressonância magnética cerebral).

Em condições basais (pré-tratamento), proceder-se-á à recolha de dados clínicos e antropométricos/auxométricos, incluindo a avaliação da composição corporal com análise de bioimpedância. A mesma investigação será repetida no acompanhamento subsequente de 6 meses (veja abaixo).

Cada sujeito será submetido à terapia de reposição hormonal com rhGH na dose de 0,025-0,035 mg/kg de peso corporal por dia (ou 0,7-1,0 mg/m2 de área de superfície corporal por dia).

Em condições de jejum (pelo menos 12 horas), serão coletadas amostras de sangue em T0 (ou seja, antes do início da terapia de reposição hormonal com rhGH) e em T6 (ou seja, após 6 meses de rhGH, aproximadamente 10-12 horas após a administração da dose do dia anterior).

Nas amostras colhidas em T0 e T6 serão determinados os perfis dimensionais e derivacionais dos EVs. Serão identificados marcadores para os seguintes subtipos celulares: endotélio (ativado e não), monócitos, neutrófilos, plaquetas, músculo, osso e tecido adiposo.

Nas condições basais (T0) e em T6 os pacientes serão amostrados para determinação dos seguintes parâmetros: hemograma completo + fórmula, glicemia, insulina, Hb glicada, triglicerídeos, colesterol total, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1 , osteocalcina, ICTP e PIIIINP.

Os dados quantitativos serão expressos como média ± DP ou mediana com intervalo interquartil (Q1-Q3), conforme apropriado. Os dados categóricos serão apresentados como frequências e porcentagens, enquanto as variáveis ​​contínuas serão testadas quanto à normalidade e linearidade. Se apropriado, será realizada uma transformação de log dos dados. O teste t de Student pareado (ou outro teste não paramétrico) será usado para comparar características demográficas, clínicas e bioquímicas entre os mesmos sujeitos em T0 vs. Os EVs serão subdivididos de acordo com seu tamanho (exossomos, microvesículas e EVs totais) e sua origem celular identificada por marcadores específicos (por exemplo, CD14+, CD61+, CD62E+, CD105+, SCGA+, FABP+, etc). Análise de regressão linear múltipla será aplicada para avaliar a associação entre VEs (como Δ% entre T0 e T6 para o perfil dimensional e também derivacional), níveis circulantes de IGF-1 (como Δ% entre T0 e T6) e a taxa de crescimento (T0 a T6). Além disso, um teste t de Student pareado será usado para avaliar a mudança induzida por rhGH no EV (T0 vs. T6). O teste será aplicado para todas as populações de VE estudadas com o perfil de tamanho e para todos os marcadores vesiculares estudados com o perfil derivacional. Alternativamente, será aplicado um teste não paramétrico. Será considerado valor de p < 0,05.