Vescicologenesi nei bambini con deficit di GH (VESCIGHTP) (VESCIGHTP)

Metodi:

Presso il Centro di Referenza Regionale per i Disturbi della Crescita, Istituto Auxologico Italiano, IRCCS, Milano, verranno reclutati 10 bambini di entrambi i sessi affetti da deficit isolato di GH secondo i criteri indicati nella nota AIFA 39 per tale patologia (bassa statura: ≤ - 3 DS o ≤ -2 DS e velocità di crescita/anno ≤ -1,0 DS per età e sesso valutati ad almeno 6 mesi di distanza e picco di GH in due diversi test farmacologici stimolanti < 8 ng/ml). Il criterio di esclusione dal presente studio (e dal trattamento con rhGH) sarà la presenza di patologie organiche a livello ipotalamo-ipofisario (valutate mediante MRI cerebrale).

In condizioni basali (pre-trattamento), si procederà con la raccolta dei dati clinici e antropometrici/auxometrici, compresa la valutazione della composizione corporea con analisi di bioimpedenziometria. Lo stesso work-up verrà ripetuto al successivo follow-up a 6 mesi (vedi sotto).

Ciascun soggetto sarà sottoposto a terapia ormonale sostitutiva con rhGH alla dose di 0,025-0,035 mg/kg di peso corporeo al giorno (o 0,7-1,0 mg/m2 di superficie corporea al giorno).

In condizioni di digiuno (almeno 12 ore), i prelievi di sangue verranno effettuati a T0 (cioè prima dell'inizio della terapia ormonale sostitutiva con rhGH) e a T6 (cioè dopo 6 mesi di rhGH, circa 10-12 ore dopo la somministrazione della dose del giorno precedente).

Nei campioni prelevati a T0 e T6 verranno determinati i profili dimensionali e derivazionali dei veicoli elettrici. Verranno identificati marcatori per i seguenti sottotipi cellulari: endotelio (attivato e non), monociti, neutrofili, piastrine, muscolo, ossa e tessuto adiposo.

In condizioni basali (T0) e a T6 i pazienti verranno prelevati per la determinazione dei seguenti parametri: emocromo completo + formula, glicemia, insulina, Hb glicata, trigliceridi, colesterolo totale, LDL, HDL, hsPCR, IGF-1 , osteocalcina, ICTP e PIIIINP.

I dati quantitativi saranno espressi come media ± DS o come mediana con intervallo interquartile (Q1-Q3), a seconda dei casi. I dati categorici saranno presentati come frequenze e percentuali, mentre le variabili continue saranno testate per la normalità e la linearità. Se appropriato, verrà eseguita una trasformazione del registro dei dati. Il test t di Student accoppiato (o altro test non parametrico) verrà utilizzato per confrontare le caratteristiche demografiche, cliniche e biochimiche degli stessi soggetti a T0 rispetto a T6. Gli EV saranno suddivisi in base alla loro dimensione (esosomi, microvescicole ed EV totali) e alla loro origine cellulare identificata da marcatori specifici (ad esempio, CD14+, CD61+, CD62E+, CD105+, SCGA+, FABP+, ecc.). Verrà applicata l'analisi di regressione lineare multipla per valutare l'associazione tra EV (come Δ% tra T0 e T6 per il profilo dimensionale e anche derivazionale), livelli circolanti di IGF-1 (come Δ% tra T0 e T6) e il tasso di crescita (da T0 a T6). Inoltre, verrà utilizzato un t-test di Student per valutare la variazione indotta da rhGH nell'EV (T0 vs. T6). Il test verrà applicato a tutte le popolazioni EV studiate con il profilo dimensionale e a tutti i marcatori vescicolari studiati con il profilo derivazionale. In alternativa, verrà applicato un test non parametrico. Verrà considerato un valore p <0,05.