Mikrofluidischer Chip vs. Dichtegradientenzentrifugation zur Euploidierate genetischer Präimplantationstests
Ein randomisierter Vergleich von Mikrofluidik-Chips und Dichtegradientenzentrifugation hinsichtlich der Euploidierate von Gentests vor der Implantation
Studienübersicht
Status
Bedingungen
Intervention / Behandlung
Detaillierte Beschreibung
Ziel der Studie ist es, die Behandlung von Paaren zu untersuchen, die sich einer In-vitro-Fertilisation (IVF) unterziehen. Geeignete Paare werden für die Studie rekrutiert, nachdem sie nach der Beratung eine schriftliche Einverständniserklärung abgegeben haben. Das IVF-Protokoll umfasst verschiedene Schritte. Frauen werden bei klinischer Indikation einem Präimplantations-Gentest (PGT) unterzogen. Die Stimulation der Eierstöcke wird mittels Gonadotropin-Injektionen durchgeführt und eine regelmäßige Ultraschallüberwachung wird durchgeführt, um das Wachstum der Follikel zu verfolgen. Um einen vorzeitigen LH-Anstieg zu verhindern, wird eine Gestagen-induzierte Stimulation der Eierstöcke oder ein GnRH-Antagonist verabreicht. Sobald mindestens drei Follikel eine Größe von mehr als 17 mm erreichen, wird eine Triggerinjektion mit entweder humanem Choriongonadotropin oder einem GnRH-Agonisten verabreicht, um die endgültige Reifung einzuleiten. Die Eizellentnahme wird 36 Stunden nach dem Auslöser unter transvaginaler Ultraschallkontrolle durchgeführt.
Die rekrutierten Frauen werden nach dem Zufallsprinzip einer von zwei Gruppen zugeordnet: der Mikrofluidik-Chip-Gruppe oder der Dichtegradientenzentrifugationsgruppe. Randomisierung und Verblindung werden sichergestellt, um die Integrität der Studie zu wahren. Nur das Laborpersonal, das an der Spermienvorbereitung beteiligt ist, ist über die Gruppenzuordnung informiert, während die Frauen und Kliniker keinen Einblick in die Behandlungsgruppen haben.
Samenproben werden durch Masturbation am Tag der Eizellentnahme nach einem Zeitraum von 2–7 Tagen sexueller Abstinenz entnommen. Die Samenproben werden gemäß den WHO-Richtlinien bewertet, einschließlich Samenvolumen, Spermienkonzentration und Prozentsatz beweglicher Spermien. Die Schädigung der Spermien-DNA wird mithilfe eines alkalischen Einzelzell-Gelelektrophorese-Assays (Comet) beurteilt. Das Ausmaß der DNA-Schädigung in Spermien wird anhand spezifischer Parameter untersucht.
Die Spermienvorbereitung wird auf Grundlage der Randomisierungsliste durchgeführt. In der Mikrofluidik-Chip-Gruppe wird das Spermientrenngerät verwendet und die vorbereitete Probe in einem Reagenzglas gesammelt. In der Dichtegradientenzentrifugationsgruppe wird die Spermienvorbereitung mit einer diskontinuierlichen Dichtegradientenzentrifugationsmethode abgeschlossen und das resultierende Spermienpellet gewaschen und resuspendiert.
Die Befruchtung der Eizellen erfolgt durch intrazytoplasmatische Spermieninjektion und die normale Befruchtung wird durch das Vorhandensein von zwei Vorkernen bestätigt. Zur umfassenden Chromosomenanalyse werden den Blastozysten einige Zellen entnommen. Es wird eine Kryokonservierung aller Blastozysten durchgeführt und nur euploide Blastozysten ohne Aneuploidien werden in nachfolgenden Zyklen des Transfers gefrorener Embryonen ersetzt.
Der Transfer gefrorener Embryonen (FET) wird in nachfolgenden natürlichen oder hormonellen Ersatzzyklen durchgeführt, abhängig von der Regelmäßigkeit des Menstruationszyklus der Frau.
Die Schwangerschaftsergebnisse werden durch Urin-Schwangerschaftstests und transvaginale Ultraschalluntersuchungen überwacht. Wenn der Schwangerschaftstest positiv ausfällt, werden weitere Ultraschalluntersuchungen durchgeführt, um die Lebensfähigkeit des Fötus und die Anzahl der Föten zu bestätigen. Schwangerschafts- und Entbindungsdaten werden nach der Entbindung abgerufen und Informationen zu Schwangerschaftsergebnissen, Anzahl der geborenen Babys, Geburtsgewichten und geburtshilflichen Komplikationen werden aufgezeichnet.
Ziel der Studie ist es, die Wirksamkeit der beiden unterschiedlichen Spermienvorbereitungsmethoden und ihre Auswirkungen auf die IVF-Ergebnisse, einschließlich Schwangerschaftsraten und geburtshilflicher Komplikationen, zu bewerten.
Studientyp
Einschreibung (Geschätzt)
Phase
- Unzutreffend
Kontakte und Standorte
Studienkontakt
- Name: YU WING TONG, MBBS
- Telefonnummer: 92707722
- E-Mail: ptong@connect.hku.hk
Studienorte
-
-
Hong Kong
-
Hong Kong, Hong Kong, China
- Rekrutierung
- Department of Obstetrics and Gynaecology
-
Kontakt:
- Ernest HY NG, MD
- Telefonnummer: 852-22553400
- E-Mail: nghye@hku.hk
-
Hauptermittler:
- Ernest HY NG, MD
-
-
Teilnahmekriterien
Zulassungskriterien
Studienberechtigtes Alter
- Kind
- Erwachsene
Akzeptiert gesunde Freiwillige
Beschreibung
Einschlusskriterien:
- Frauen, die zum Zeitpunkt der ovariellen Stimulation für IVF <43 Jahre alt waren
- Frauen, die sich einer PGT wegen monogener Erkrankungen, struktureller Neuordnung der Chromosomen oder Aneuploidie unterziehen
- Spermienkonzentration des Rohsamens mit mindestens 0,15 Millionen beweglichen Spermien pro ml oder 100 beweglichen Spermien pro 50 Beobachtungsfeldern mit geringer Vergrößerung (200x).
Ausschlusskriterien:
- Verwendung von Gefriersperma zur Befruchtung
- Verwendung von Spendereizellen und Spermien
- Submuköses Myom oder Hydrosalpinx, das bei der Beckenuntersuchung nachgewiesen und nicht chirurgisch behandelt wurde;
- Frauen, die bereits zuvor für diese Studie rekrutiert wurden
- Frauen nehmen an anderen randomisierten Studien teil
Studienplan
Wie ist die Studie aufgebaut?
Designdetails
- Hauptzweck: Behandlung
- Zuteilung: Zufällig
- Interventionsmodell: Parallele Zuordnung
- Maskierung: Vervierfachen
Waffen und Interventionen
Teilnehmergruppe / Arm |
Intervention / Behandlung |
|---|---|
|
Experimental: Die Mikrofluidik-Chip-Gruppe
Das Spermientrenngerät – ZyMōt Multi 850µL oder 3 ml Gerät (ZyMōt Fertility, Inc) wird entsprechend dem Volumen der rohen Samenproben verwendet.
Die Mikrofluidikkammer wird gemäß den Anweisungen des Herstellers verwendet.
850 μL (850 μL-Gerät) oder 3 ml (3 ml-Gerät) der Samenprobe werden in den Einlassanschluss des Geräts gegeben und 750 μL (850 μL-Gerät) oder 2,4 ml (3 ml-Gerät) Befruchtungsmedium werden hinzugefügt zum Auslassanschluss.
Anschließend wird das Gerät in 6 % CO2 bei 37 °C inkubiert.
Nach 30 Minuten werden 500 μL (850 μL-Gerät) bzw. 1 ml (3 ml-Gerät) der vorbereiteten Probe am Auslassanschluss entnommen und in ein beschriftetes Reagenzglas pipettiert.
|
Für die Spermiensortierung wurde die mikrofluidische Chip-Methode verwendet, um die beweglichsten und morphologisch normalsten Spermien für den Einsatz in assistierten Reproduktionstechnologien (ART) wie In-vitro-Fertilisation (IVF) und intrazytoplasmatischer Spermieninjektion (ICSI) auszuwählen.
|
|
Aktiver Komparator: Die Dichtegradientenzentrifugationsgruppe
Nach der Verflüssigung wird die Spermienvorbereitung durch eine diskontinuierliche Dichtegradientenzentrifugationsmethode unter Verwendung von Spermiendichtegradientenmedien von Pureception (CooperSurgical, Dänemark) abgeschlossen.
Das nach der Zentrifugation resultierende Spermienpellet wird einmal mit dem Spermienwaschmedium (G-IVF Plus, Vitrolife, Schweden) gewaschen. Die gewaschenen Spermien werden mit demselben Medium resuspendiert, wodurch das Endvolumen auf 0,5 ml eingestellt wird.
|
Die Dichtegradientenzentrifugation ist eine häufig verwendete Methode zur Spermientrennung und -reinigung.
Dabei handelt es sich um eine Technik, bei der eine Samenprobe auf einen Gradienten unterschiedlicher Dichte einer Lösung, typischerweise eine Mischung aus kolloidaler Kieselsäure und Saccharose, geschichtet und die Probe anschließend zentrifugiert wird.
Durch die Zentrifugalkraft wandern die Spermien durch den Gradienten, wo sie aufgrund ihrer Dichte getrennt werden.
|
Was misst die Studie?
Primäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
|
Euploide Rate von Blastozysten
Zeitfenster: 3 Monate
|
Euploide Rate der biopsierten Blastozysten
|
3 Monate
|
Sekundäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
|
Lebendgeburtenrate des ersten Embryotransfers
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl der Lebendgeburten nach der 22. Schwangerschaftswoche pro erstem Embryotransfer
|
3 Jahre
|
|
Positive Urin-Schwangerschaftstestrate pro erstem Embryotransfer
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl positiver Urin-Schwangerschaftstests pro erstem Embryotransfer
|
3 Jahre
|
|
Klinische Schwangerschaftsrate des ersten Embryotransfers
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl der klinischen Schwangerschaften pro erstem Embryotransfer, definiert als Vorhandensein eines intrauterinen Schwangerschaftssacks beim Scannen in der 6. Schwangerschaftswoche.
|
3 Jahre
|
|
Laufende Schwangerschaftsrate
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl der laufenden Schwangerschaften als Vorhandensein eines fetalen Pols mit Pulsation in der 8.–10. Schwangerschaftswoche
|
3 Jahre
|
|
Fehlgeburtsrate Schwangerschaft
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl der Fehlgeburten, definiert als klinisch erkannter Schwangerschaftsverlust vor der 22. Schwangerschaftswoche und deren Nenner die klinische Schwangerschaft ist.
|
3 Jahre
|
|
Mehrlingsschwangerschaftsrate
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Mehrlingsschwangerschaftsrate: Vorhandensein von mehr als einem Intrauterinsack in der 6. Schwangerschaftswoche
|
3 Jahre
|
|
DNA-Fragmentierung
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Messung der DNA-Fragmentierung durch Comet-Assay unter Verwendung des Olivenschwanzmoments als quantitative Metrik.
|
3 Jahre
|
|
Eileiterschwangerschaftsrate
Zeitfenster: 3 Jahre
|
Anzahl der Eileiterschwangerschaften
|
3 Jahre
|
Mitarbeiter und Ermittler
Sponsor
Studienaufzeichnungsdaten
Haupttermine studieren
Studienbeginn (Tatsächlich)
Primärer Abschluss (Geschätzt)
Studienabschluss (Geschätzt)
Studienanmeldedaten
Zuerst eingereicht
Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat
Zuerst gepostet (Tatsächlich)
Studienaufzeichnungsaktualisierungen
Letztes Update gepostet (Geschätzt)
Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt
Zuletzt verifiziert
Mehr Informationen
Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie
Schlüsselwörter
Zusätzliche relevante MeSH-Bedingungen
Andere Studien-ID-Nummern
- UW 23-297
Plan für individuelle Teilnehmerdaten (IPD)
Planen Sie, individuelle Teilnehmerdaten (IPD) zu teilen?
IPD-Sharing-Zeitrahmen
IPD-Sharing-Zugriffskriterien
Art der unterstützenden IPD-Freigabeinformationen
- STUDIENPROTOKOLL
- SAFT
- ICF
- CSR
Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt
Produkt, das in den USA hergestellt und aus den USA exportiert wird
Diese Informationen wurden ohne Änderungen direkt von der Website clinicaltrials.gov abgerufen. Wenn Sie Ihre Studiendaten ändern, entfernen oder aktualisieren möchten, wenden Sie sich bitte an register@clinicaltrials.gov. Sobald eine Änderung auf clinicaltrials.gov implementiert wird, wird diese automatisch auch auf unserer Website aktualisiert .