Микрофлюидный чип в сравнении с центрифугированием в градиенте плотности на уровень эуплоидии при предимплантационном генетическом тестировании

Целью исследования является изучение лечения пар, перенесших экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Подходящие пары будут набраны для участия в исследовании после предоставления информированного письменного согласия после консультации. Протокол ЭКО включает в себя различные этапы. Женщины пройдут преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ) по клиническим показаниям. Стимуляция яичников будет проводиться с помощью инъекций гонадотропина, а также будет проводиться регулярный ультразвуковой контроль для отслеживания роста фолликулов. Чтобы предотвратить преждевременный всплеск ЛГ, будет назначена стимуляция яичников с прогестином или антагонист ГнРГ. Как только хотя бы три фолликула достигнут размера более 17 мм, будет сделана триггерная инъекция либо хорионического гонадотропина человека, либо агониста ГнРГ, чтобы вызвать окончательное созревание. Извлечение яйцеклеток будет выполнено через 36 часов после триггера под контролем трансвагинального ультразвука.

Набранные женщины будут случайным образом распределены в одну из двух групп: группу микрофлюидных чипов или группу центрифугирования в градиенте плотности. Рандомизация и ослепление будут обеспечены для сохранения целостности исследования. Только сотрудники лаборатории, участвующие в подготовке спермы, будут знать о распределении групп, в то время как женщины и врачи не будут знать о группах лечения.

Образцы спермы будут собраны путем мастурбации в день забора яйцеклеток, после периода 2-7 дней полового воздержания. Образцы спермы будут подвергнуты оценке в соответствии с рекомендациями ВОЗ, включая объем спермы, концентрацию сперматозоидов и процент подвижных сперматозоидов. Повреждение ДНК сперматозоидов будет оцениваться с помощью анализа щелочного гель-электрофореза одиночных клеток (Comet). Степень повреждения ДНК сперматозоидов будет оцениваться с использованием конкретных параметров.

Подготовка спермы будет осуществляться на основе списка рандомизации. В группе микрофлюидных чипов будет использоваться устройство для разделения спермы, а подготовленный образец будет собран в пробирку. В группе центрифугирования в градиенте плотности подготовка спермы будет завершена с использованием метода прерывистого центрифугирования в градиенте плотности, а полученный осадок спермы будет промыт и ресуспендирован.

Ооциты будут оплодотворены посредством интрацитоплазматической инъекции спермы, и нормальное оплодотворение будет подтверждено наличием двух пронуклеусов. Из бластоцисты возьмут несколько клеток для комплексного хромосомного анализа. Будет проведена криоконсервация всех бластоцист, и в последующих циклах переноса замороженных эмбрионов будут заменены только эуплоидные бластоцисты без анеуплоидий.

Перенос замороженных эмбрионов (FET) будет осуществляться в последующих естественных или гормональных заместительных циклах, в зависимости от регулярности менструального цикла женщины.

Исход беременности будет контролироваться с помощью тестов на беременность по моче и трансвагинального УЗИ. Если тест на беременность положительный, будут проведены дополнительные УЗИ для подтверждения жизнеспособности плода и количества плодов. Данные о беременности и родах будут получены после родов, и будет записана информация об исходах беременности, количестве родившихся детей, весе при рождении и акушерских осложнениях.

Целью исследования является оценка эффективности двух различных методов подготовки спермы и их влияние на результаты ЭКО, включая частоту наступления беременности и акушерские осложнения.