Microfluïdische chip versus dichtheidsgradiëntcentrifugatie op de euploïdiesnelheid van pre-implantatie genetische tests

Het onderzoek heeft tot doel de behandeling te onderzoeken van paren die in-vitrofertilisatie (IVF) ondergaan. Paren die in aanmerking komen, worden voor het onderzoek gerekruteerd nadat zij geïnformeerde schriftelijke toestemming hebben gegeven na counseling. Het IVF-protocol omvat verschillende stappen. Vrouwen zullen pre-implantatie genetische testen (PGT) ondergaan zoals klinisch geïndiceerd. Stimulatie van de eierstokken zal worden uitgevoerd met behulp van gonadotropine-injecties, en er zal regelmatig echografie worden uitgevoerd om de groei van de follikels te volgen. Om een ​​voortijdige LH-piek te voorkomen, zal progestageen-geprikkelde ovariële stimulatie of een GnRH-antagonist worden toegediend. Zodra ten minste drie follikels een grootte van meer dan 17 mm bereiken, zal een trigger-injectie van humaan choriongonadotrofine of een GnRH-agonist worden gegeven om de uiteindelijke rijping te induceren. Het ophalen van de eicellen zal 36 uur na de trigger plaatsvinden onder begeleiding van transvaginale echografie.

De gerekruteerde vrouwen zullen willekeurig worden toegewezen aan een van de twee groepen: de microfluïdische chipgroep of de dichtheidsgradiëntcentrifugatiegroep. Randomisatie en blindering zullen worden gewaarborgd om de integriteit van het onderzoek te behouden. Alleen het laboratoriumpersoneel dat betrokken is bij de spermabereiding zal op de hoogte zijn van de groepsopdracht, terwijl de vrouwen en artsen blind zullen zijn voor de behandelingsgroepen.

Spermaspecimens worden verzameld door middel van masturbatie op de dag van de eicelwinning, na een periode van 2-7 dagen seksuele onthouding. De spermamonsters zullen worden geëvalueerd volgens de WHO-richtlijnen, inclusief het spermavolume, de spermaconcentratie en het percentage beweeglijke spermatozoa. Sperma-DNA-schade zal worden beoordeeld met behulp van een alkalische eencellige gelelektroforese (Comet)-test. Aan de hand van specifieke parameters zal de omvang van de DNA-schade in spermatozoa worden onderzocht.

De spermavoorbereiding zal worden uitgevoerd op basis van de randomisatielijst. In de microfluïdische chipgroep wordt gebruik gemaakt van het Sperm Separation Device en wordt het voorbereide monster in een reageerbuis verzameld. In de groep met dichtheidsgradiëntcentrifugatie zal de spermabereiding worden voltooid met behulp van een discontinue dichtheidsgradiëntcentrifugatiemethode, en de resulterende spermapellet zal worden gewassen en opnieuw gesuspendeerd.

Oöcyten zullen worden bevrucht door intracytoplasmatische sperma-injectie, en normale bevruchting zal worden bevestigd door de aanwezigheid van twee pronuclei. Er zullen enkele cellen uit de blastocysten worden genomen voor uitgebreide chromosoomanalyse. Cryopreservatie van alle blastocysten zal worden uitgevoerd, en alleen euploïde blastocysten zonder aneuploïdieën zullen worden vervangen in daaropvolgende cycli van ingevroren embryotransfers.

Ingevroren embryotransfer (FET) zal worden uitgevoerd in daaropvolgende natuurlijke of hormonale vervangingscycli, afhankelijk van de regelmaat van de menstruatiecyclus van de vrouw.

De zwangerschapsuitkomsten zullen worden gecontroleerd via urine-zwangerschapstests en transvaginale echo's. Als de zwangerschapstest positief is, zullen verdere echo's worden uitgevoerd om de levensvatbaarheid van de foetus en het aantal foetussen te bevestigen. Zwangerschaps- en bevallingsgegevens worden na de bevalling opgehaald en informatie over de zwangerschapsuitkomsten, het aantal geboren baby's, het geboortegewicht en de verloskundige complicaties worden geregistreerd.

Het onderzoek heeft tot doel de effectiviteit van de twee verschillende spermabereidingsmethoden en hun impact op de IVF-resultaten, inclusief zwangerschapspercentages en obstetrische complicaties, te beoordelen.