Chip de microfluidos frente a centrifugación en gradiente de densidad en la tasa de euploidía de las pruebas genéticas previas a la implantación

El estudio tiene como objetivo investigar el tratamiento de parejas sometidas a fertilización in vitro (FIV). Las parejas elegibles serán reclutadas para el estudio después de brindar su consentimiento informado por escrito después del asesoramiento. El protocolo de FIV implica varios pasos. Las mujeres se someterán a pruebas genéticas previas a la implantación (PGT) según esté clínicamente indicado. La estimulación ovárica se llevará a cabo mediante inyecciones de gonadotropina y se realizarán controles ecográficos periódicos para seguir el crecimiento de los folículos. Para prevenir un aumento prematuro de LH, se administrará estimulación ovárica preparada con progestina o un antagonista de GnRH. Una vez que al menos tres folículos alcancen un tamaño superior a 17 mm, se administrará una inyección desencadenante de gonadotropina coriónica humana o de un agonista de GnRH para inducir la maduración final. La recuperación de ovocitos se realizará 36 horas después del desencadenante bajo guía ecográfica transvaginal.

Las mujeres reclutadas serán asignadas aleatoriamente a uno de dos grupos: el grupo de chip de microfluidos o el grupo de centrifugación en gradiente de densidad. Se garantizará la aleatorización y el cegamiento para mantener la integridad del estudio. Sólo el personal del laboratorio involucrado en la preparación del esperma conocerá la asignación del grupo, mientras que las mujeres y los médicos no conocerán los grupos de tratamiento.

Las muestras de semen se recolectarán mediante masturbación el día de la extracción de ovocitos, luego de un período de 2 a 7 días de abstinencia sexual. Las muestras de semen se evaluarán de acuerdo con las pautas de la OMS, incluido el volumen de semen, la concentración de espermatozoides y el porcentaje de espermatozoides móviles. El daño al ADN del esperma se evaluará mediante un ensayo de electroforesis en gel unicelular alcalino (Comet). El alcance del daño al ADN en los espermatozoides se examinará utilizando parámetros específicos.

La preparación de esperma se realizará según la lista de aleatorización. En el grupo del chip de microfluidos, se utilizará el dispositivo de separación de espermatozoides y la muestra preparada se recogerá en un tubo de ensayo. En el grupo de centrifugación en gradiente de densidad, la preparación del esperma se completará utilizando un método de centrifugación en gradiente de densidad discontinuo y el sedimento de esperma resultante se lavará y resuspenderá.

Los ovocitos se fertilizarán mediante inyección intracitoplasmática de espermatozoides y la fertilización normal se confirmará mediante la presencia de dos pronúcleos. Se tomarán algunas células de los blastocistos para un análisis cromosómico completo. Se realizará la criopreservación de todos los blastocistos y solo los blastocistos euploides sin aneuploidías serán reemplazados en ciclos posteriores de transferencia de embriones congelados.

La transferencia de embriones congelados (FET) se realizará en ciclos posteriores de reemplazo natural u hormonal, dependiendo de la regularidad del ciclo menstrual de la mujer.

Los resultados del embarazo se controlarán mediante pruebas de embarazo en orina y ecografías transvaginales. Si la prueba de embarazo es positiva, se realizarán más ecografías para confirmar la viabilidad fetal y el número de fetos. Los datos sobre el embarazo y el parto se recuperarán después del parto y se registrará información sobre los resultados del embarazo, el número de bebés nacidos, el peso al nacer y las complicaciones obstétricas.

El estudio tiene como objetivo evaluar la eficacia de los dos métodos diferentes de preparación de esperma y su impacto en los resultados de la FIV, incluidas las tasas de embarazo y las complicaciones obstétricas.