Integrierte Entdeckung und Entwicklung innovativer TB-Diagnostika ((CETR))

Das langfristige Ziel dieses Projekts besteht darin, Informationen bereitzustellen, die für die Entwicklung und Verwendung eines kostengünstigen, schnellen, einfachen und hochpräzisen Point-of-Care-Diagnosetools entscheidend sind, das Ärzten dabei helfen kann, bei anwesenden Kindern eine mikrobiologische Diagnose zu stellen mit Anzeichen und Symptomen, die auf Tuberkulose hinweisen.

Spezifisches Ziel 1: Identifizierung der Arten von Patientenproben, aus denen sich Mtb-DNA bei Kindern mit Tuberkulose am besten nachweisen lässt. Wir schlagen vor, Serienproben von Sputum, Blut, Stuhl sowie Magen- und Nasopharynxsekreten von Kindern mit symptomatischer Tuberkulose zu entnehmen und molekulare Methoden zu verwenden, um die Verteilung von Mtb in diesen Proben zu charakterisieren. Die Ergebnisse dieser Studie werden es uns ermöglichen, die vielversprechendsten Probenahmestrategien für die Diagnose von Tuberkulose bei Kindern zu identifizieren, sodass die Optimierung dieser leicht zugänglichen Proben für den Nachweis von Mtb-Nukleinsäuren in Angriff genommen werden kann.

Spezifisches Ziel 2: Bestimmung, ob zellfreie Mtb-DNA in Plasma- und Urinproben von Kindern und Erwachsenen mit Tuberkulose nachgewiesen werden kann, und Beschreibung der wirtsbezogenen Faktoren, die die Empfindlichkeit dieses Tests verändern. Wir schlagen vor, serielle Urin- und Plasmaproben auf Mtb-DNA-Fragmente in zwei Gruppen zu testen: (1) Kinder mit Tuberkulosesymptomen und (2) Erwachsene mit Tuberkulose. Hier werden wir die Probenvolumengrößen und modernste Sequenzierungstools optimieren, um die DNA-Gewinnung und -Detektion zu verbessern. Diese Studie wird dazu beitragen, optimale Proben und Strategien für die nicht-invasive Diagnose von Mtb mithilfe von Urin zu ermitteln.

Sekundäres Ziel: Erstellung einer Datenbank archivierter Proben zur (1) Optimierung der Mtb-DNA-Reinigung und -Extraktion und (2) Verwendung in der zukünftigen pädiatrischen TB-Diagnoseforschung.