Descubrimiento y desarrollo integrados de diagnósticos innovadores de tuberculosis ((CETR))

El objetivo a largo plazo de este proyecto es proporcionar información fundamental para el desarrollo y uso de una herramienta de diagnóstico de bajo costo, en el lugar de atención, rápida, simple y altamente precisa que pueda ayudar a los médicos a realizar un diagnóstico microbiológico en niños que presentan con signos y síntomas sugestivos de tuberculosis.

Objetivo específico 1: Identificar los tipos de muestras de pacientes a partir de las cuales se puede detectar mejor el ADN de Mtb en niños con tuberculosis. Proponemos obtener muestras seriadas de esputo, sangre, heces y secreciones gástricas y nasofaríngeas de niños con TB sintomática y utilizar métodos moleculares para caracterizar la distribución de Mtb en estas muestras. Los resultados de este estudio nos permitirán identificar las estrategias de muestreo más prometedoras para el diagnóstico de tuberculosis en niños para que se pueda abordar la optimización de estas muestras de fácil acceso para la detección de ácidos nucleicos de Mtb.

Objetivo específico 2: Determinar si el ADN de Mtb libre de células se puede detectar en muestras de plasma y orina de niños y adultos con tuberculosis y describir los factores relacionados con el huésped que alteran la sensibilidad de este ensayo. Proponemos analizar muestras seriadas de orina y plasma para detectar fragmentos de ADN de Mtb en dos grupos: (1) niños con síntomas de tuberculosis y (2) adultos con tuberculosis. Aquí, optimizaremos los tamaños de volumen de muestras y las herramientas de secuenciación de última generación para mejorar la recuperación y detección de ADN. Este estudio ayudará a identificar muestras y estrategias óptimas para el diagnóstico no invasivo de Mtb mediante orina.

Objetivo secundario: crear un banco de muestras archivadas para (1) optimización de la purificación y extracción del ADN de Mtb y (2) uso en futuras investigaciones de diagnóstico de tuberculosis pediátrica.