Descoberta e desenvolvimento integrados de diagnósticos inovadores de TB ((CETR))

O objetivo de longo prazo deste projeto é fornecer informações críticas para o desenvolvimento e uso de uma ferramenta de diagnóstico de baixo custo, no local de atendimento, rápida, simples e altamente precisa que possa ajudar os médicos a fazer um diagnóstico microbiológico em crianças que apresentam com sinais e sintomas sugestivos de TB.

Objectivo específico 1: Identificar os tipos de amostras de pacientes a partir das quais se pode detectar melhor o ADN de Mtb em crianças com TB. Propomos a obtenção de amostras seriadas de escarro, sangue, fezes e secreções gástricas e nasofaríngeas de crianças com TB sintomática e a utilização de métodos moleculares para caracterizar a distribuição do Mtb nessas amostras. Os resultados deste estudo nos permitirão identificar as estratégias de amostragem mais promissoras para o diagnóstico de TB em crianças, para que a otimização dessas amostras facilmente acessíveis para detecção de ácidos nucleicos de Mtb possa ser abordada.

Objetivo específico 2: determinar se o DNA de Mtb livre de células pode ser detectado em amostras de plasma e urina de crianças e adultos com TB e descrever os fatores relacionados ao hospedeiro que alteram a sensibilidade deste ensaio. Propomos testar amostras seriadas de urina e plasma para fragmentos de DNA de Mtb em dois grupos: (1) crianças com sintomas de TB e (2) adultos com TB. Aqui, otimizaremos os tamanhos dos volumes de amostras e ferramentas de sequenciamento de última geração para melhorar a recuperação e detecção de DNA. Este estudo ajudará a identificar amostras e estratégias ideais para o diagnóstico não invasivo de Mtb usando urina.

Objetivo secundário: criar um banco de amostras arquivadas para (1) otimização da purificação e extração do DNA do Mtb e (2) uso em futuras pesquisas de diagnóstico de TB pediátrica.