Vergleich von topischer photodynamischer Therapie mit topischem Calcipotriol bei der Behandlung von oraler Leukoplakie (PDT CALCI HOL)

Ziele

Primäre Ziele:

3.1 Vergleich der Wirkung von 2,5% Toluidinblau-vermittelter topischer photodynamischer Therapie und topischem Calcipotriol (0,005%) auf das klinische Ansprechen nach Abschluss der Behandlung nach 4 Wochen im Vergleich zum Ausgangswert während der Behandlung von oraler Leukoplakie

Sekundäre Ziele:

3.2 Vergleich der Wirkung von 2,5% Toluidinblau-vermittelter topischer photodynamischer Therapie mit topischem Calcipotriol (0,005%) auf Läsionsgröße, Läsionsrauheit/Weißheit und mundgesundheitsbezogene Lebensqualität nach Abschluss der Behandlung nach 4 und 12 Wochen im Vergleich zum Ausgangswert während der Behandlung von oraler Leukoplakie 3.3 Vergleich der Wirkung von 2,5% Toluidinblau-vermittelter topischer photodynamischer Therapie mit topischem Calcipotriol (0,005%) auf molekulare Speichelmarker (IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF) nach Abschluss der Behandlung nach 4 Wochen im Vergleich zum Ausgangswert 3.4 Vergleich der unerwünschten Ereignisse, der Zeit bis zum vollständigen Ansprechen und der Rezidivraten zwischen den beiden Gruppen

Begründung:

Fast zwei Drittel der oralen Krebserkrankungen werden durch orale potenziell maligne Erkrankungen wie OL verursacht, die durch Tabak-, Alkohol- und Betelnussgewohnheiten ausgelöst werden. OL hat eine hohe Prävalenz und maligne Transformationsrate (0,13%-40,8%). Es gibt keine universellen Behandlungsprotokolle für OL. Präventive, konservative, medikamentöse und chirurgische Interventionen haben mehrere Einschränkungen und hohe Rezidivraten. Nicht-homogene, dysplastische, große, multifokale, proliferative rezidivierende und therapierefraktäre OL bei Patienten mit Komorbiditäten stellen für den oralen Arzt noch größere Herausforderungen in der Behandlung dar, der oft auf konservative Maßnahmen mit aufmerksamer Beobachtung zurückgreift. Patienten mit OL müssen mit dem unästhetischen Erscheinungsbild der Läsion und der Angst vor Malignität umgehen, was ihre orale und psychische Gesundheit beeinträchtigt.

Die Entfernung der pathologischen OL-Läsionen soll das Malignitätsrisiko verringern. Es stehen chirurgische Optionen, Laserablation, Elektrokauter und Kryotherapie zur Verfügung, aber sie sind mit postoperativen Komplikationen wie Schmerzen, Schwellungen, Infektionen, Neuropathie, Narbenbildung verbunden und beeinträchtigen die orale Funktion mit hohen Rezidivraten. Diese Methoden behandeln nur den physisch abnormalen Bereich, wo sie angewendet werden, und bewirken keine vorteilhaften Veränderungen in der Biologie des betroffenen Bereichs. Es besteht Bedarf an nicht-invasiven Methoden zur Entfernung von OL ohne die derzeitigen Einschränkungen, die auch günstige molekulare Veränderungen im darunterliegenden und angrenzenden Gewebe bewirken, um das Risiko der malignen Transformation zu mindern.

Photodynamische Therapie (PDT) ist eine nicht-invasive Methode zur Entfernung abnormalen Gewebes unter Verwendung eines Photosensibilisators (PS) und geeigneter Lichtaktivierung, die selektiv abnormale Zellen anvisiert und Zytotoxizität und Tod verursacht. PDT verursacht auch Apoptose, vaskuläre Störungen und hat immunmodulatorische Effekte, um das Malignitätsrisiko zu verringern. Der am weitesten verbreitete und untersuchte PS ist 5-Aminolävulinsäure (5-ALA). 5-ALA hat mehrere Einschränkungen, da es sehr teuer ist, photosensitiv ist, Schwellungen, Schmerzen, Brennen, allergische Reaktionen auf angrenzendes Gewebe verursacht, einen dunklen Raum für die Anwendung und lange Inkubationszeiten (2 Stunden) erfordert. Toluidinblau (TB) ist ein metachromatischer Farbstoff, der als Vitalfärbung beim oralen Krebs-Screening verwendet wurde, da er bevorzugt mitotische und dysplastische Zellen anfärbt. Es kann auch als PS verwendet werden, da es durch rotes Licht (620-660 nm) aktiviert wird und in einer einzelnen Fallserie von 15 OL-Läsionen mit 40% komplettem Ansprechen in der PDT eingesetzt wurde. Es ist billig, sicher, weniger toxisch und photosensitiv, zielt auf abnormale Zellen ab, hat eine einfache Anwendung, erfordert weniger Inkubationszeit, keinen dunklen Raum und keine berichteten Nebenwirkungen. PDT wurde üblicherweise mit 5-ALA als Photosensibilisator (PS) und Laserlicht als Aktivator versucht. PDT mit LED-Lichtquelle als Aktivator ist kostengünstiger und in ressourcenbeschränkten Umgebungen besser durchführbar.

Topische Retinoide wurden als nicht-invasive Methode zur Entfernung von OL-Läsionen aufgrund ihrer antikeratinozytären Aktivität eingesetzt, haben aber hohe Rezidivraten, Risiken systemischer Toxizität und Resistenzentwicklung. Topisches Calcipotriol ist ein synthetisches Vitamin-D-Analogon, das bei Psoriasis aufgrund seiner antiproliferativen, entzündungshemmenden, antiangiogenen und immunmodulatorischen Wirkungen eingesetzt wurde. Es gibt nur zwei Studien, die Calcipotriol bei OL mit komplettem Ansprechen von 25%-80% ohne Nebenwirkungen verwendet haben.

Es gibt derzeit keine RCT, die die Effekte von TB-vermittelter PDT und topischem Calcipotriol bei OL verglichen hat.

Die Spiegel pro-onkogener Zytokine (IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF), die Entzündung, Proliferation und Angiogenese fördern, sind wichtige prognostische Biomarker, die helfen können, den Nutzen jeder Intervention bei OL zu bewerten. Es gibt keine Studien, die diese Zytokine nach topischer PDT oder Calcipotriol-Therapie bei OL evaluiert haben.

Anzahl der Patienten:

Stichprobengröße: In einer systematischen Übersicht und Metaanalyse zur PDT für orale Leukoplakie von Zhang et al. (2023) wurde ein komplettes Ansprechen bei 50% der Patienten beobachtet.

Während nur 2 Studien Ergebnisse von topischem Calcipotriol (0,005%) bei oraler Leukoplakie mit einer Stichprobengröße von 20 in beiden Studiengruppen erwähnen. In einer RCT (Femanio et al. 2001) wurde eine CR von 80% bei OL nach topischem Calcipotriol nach 5 Wochen gefunden. In einer anderen Studie (Galwash et al. 2017) betrug das Gesamtansprechen 25% nach 4 Wochen.

Aufgrund des Mangels und der Variabilität der Daten in verfügbaren Studien zum Ansprechen von topischem Calcipotriol (0,005%) bei oraler Leukoplakie können wir in unserer Studie eine CR bei 25% der Patienten erwarten. Geschätzte Stichprobengröße für den Vergleich zweier Anteile Test H0: P1=P2, wobei p1 der Anteil in Population 1 und p2 der Anteil in Population 2 ist.

Annahme:

alpha=0,0500 (zweiseitig) power=0,8000 p1=0,2500 p2=0,5000 n2/n1=1,00 Geschätzte erforderliche Stichprobengrößen: n1=66, n2=66 Die endgültige Stichprobengröße betrug 83/Gruppe unter Berücksichtigung von 20% der Patienten als verloren für die Nachbeobachtung.

Gesamtstichprobengröße: 166

Gruppe A (n=83): Nicht-invasive PDT unter Verwendung von LED mit Wellenlänge von 630-660 nm (Fluenz 15 J/cm²) als Lichtquelle und 2,5% TB als Photosensibilisator wird bei oraler Leukoplakie einmal wöchentlich für 4 Wochen zusammen mit präventiver und konventioneller Therapie angewendet.

Gruppe B (n=83): Topische Anwendung von Calcipotriol-Salbe 0,005% zweimal täglich für 4 Wochen zusammen mit präventiver und konventioneller Therapie

5.5 Studiendesign Eine offene randomisierte klinische Studie

Blockrandomisierung:

Blockrandomisierung mit variierender Blockgröße wird unter Verwendung computergenerierter Zufallszahlen durchgeführt. Allokationsverhältnis (1:1)

Allokationsverblindung:

Teilnehmer werden unter Verwendung sequenziell nummerierter, undurchsichtiger versiegelter Umschläge (SNOSE) randomisiert: Die Randomisierungsgruppe wird auf ein Papier geschrieben und in einem undurchsichtigen versiegelten Umschlag aufbewahrt, der jeweils mit einer Aluminiumfolie und einer Kohlepapierschicht präpariert ist. Der Umschlag wird mit einer Seriennummer und einem Randomisierungscode beschriftet und hat auf der Vorderseite einen Identifikator der Studie. Die Intervention wird auf ein Papier im Umschlag geschrieben und vom Techniker versiegelt. Umschläge werden vom Operator sequenziell geöffnet, und Patienten werden gemäß der im Umschlag genannten Intervention einer Studiengruppe zugeteilt. Verwendete Umschläge werden bis zum Abschluss der Studie separat aufbewahrt.

Intervention

Konventionelle nicht-invasive Behandlung (übliche Versorgung):

Alle Probanden in den beiden Gruppen erhalten die gleiche standardmäßige konventionelle nicht-invasive Behandlung, die für OL gemäß aktueller wissenschaftlicher Evidenz empfohlen wird.

• Kurze verhaltensbezogene Beratung zur Beendigung von Tabak-, Betelnuss- und Alkoholgewohnheiten gemäß WHO-5A- und 5R-Technik zu Studienbeginn und bei jeder Nachuntersuchung.
• Orale Prophylaxe
• Entfernung oraler Reizfaktoren wie scharfe Zähne, Apparaturen oder Prothesen, impaktierte bukkoverte dritte Molaren, parafunktionelle Gewohnheiten
• Anweisungen zur Mundhygiene
• Kontrolle systemischer Erkrankungen (Anämie, Diabetes, Hypertonie, Schilddrüsenerkrankungen) durch Facharztüberweisung
• Entfernung aller prädisponierenden Faktoren für orale Candida-Infektion
• Befürwortung sicherer Sexualpraktiken
• Ernährungs- und Diätberatung (saisonale und regionale nährstoff-, vitamin- und antioxidantienreiche Nahrung, Vermeidung von scharfen/sauren/heißen Speisen und Getränken)
• Regelmäßige Überwachung auf maligne Transformation Untersuchungen: Orthopantomogramm, vollständiges Blutbild, Leberfunktionstests, Nierenfunktionstests, Lipidprofil, Parathormon, Serum-Ca²⁺, Serum-Vit-D3-Spiegel, Serum-Elektrolytspiegel Auswahl des Ortes der oralen Leukoplakie in der Studie Bei Probanden mit multiplen betroffenen Bereichen werden die nicht-homogenen und größeren Läsionen für Behandlung und Bewertung ausgewählt.

Photodynamische Therapie-Protokoll:

Protokoll für die Vorbereitung und Anwendung von 2,5% TB als PS:

Das Protokoll sieht die Anwendung von 2,5% TB vor, das nach Standardverfahren und unter Anpassung der Anteile gemäß Epstein et al. hergestellt wird, auf die Läsionen, unter Verwendung von Wattestäbchen, mit einem Rand von 3 mm vom umgebenden normalen Gewebe und lässt es für 5 Minuten einwirken, wobei jeglicher Kontakt mit Speichel unter Verwendung von Wattewalzen, Wangenretraktor und Absaugvorrichtung vermieden wird. Protokoll für LED-Photodynamische Therapie bei Patienten mit oraler Leukoplakie Gerät LED-Lichtquelle Wellenlänge 630-660 nm Spitzenleistung 0,04 W/cm² Fluenz 15 J/cm² Spotgröße 0,66 cm² Abstand intraoral: An der oralen Mukosaoberfläche (Kontaktmodus) Modus Kontinuierlich, kreisförmige Bewegung, überlappend, im Uhrzeigersinn konzentrisch mit LED-Handstück senkrecht zur Oberfläche Dauer eines Zyklus 360 Sekunden über 1 cm² Bereich der diagnostizierten OL-Läsion. Zyklen pro Sitzung Ein Zyklus pro Sitzung Anzahl der Sitzungen Vier, eine Sitzung/Woche (am Tag 0, 1 Woche, 2 Wochen, 3 Wochen Bereich der Intervention Intraoral über OL-Läsion (nicht-homogene und größere Läsion bei Probanden mit multipler Beteiligung bevorzugt) Behandlungszeit 360 Sek./6 Minuten für OL-Läsion von 1 cm²/12 Min. für 2 cm² Dosimetrie und Kalibrierung des LED-Geräts Jeden Monat unter Verwendung eines Leistungsmessers und Spektrometers

Protokoll für die Anwendung von topischem Calcipotriol (0,005%)-Salbe bei Patienten mit oraler Leukoplakie:

Allen Patienten wird die Stelle der OL-Läsion gezeigt und eine Demonstration für die Anwendung von topischer Calcipotriol-Salbe (0,005%) gegeben. Patienten wird geraten, Cal-Salbe zweimal täglich für 4 Wochen nach den Mahlzeiten aufzutragen.

Schritte bei der Anwendung von topischer Calcipotriol (0,005%)-Salbe:

Trocknen der Läsionsstelle mit steriler Gaze Auftragen des Mittels als Salbe mit einem Wattestäbchen Die Salbe mindestens 30 Minuten einwirken lassen Vermeiden des Verschluckens des Medikaments Vermeiden von Trinken/Essen/Spucken für mindestens 30 Minuten nach Medikamentenanwendung Wiederholung des Protokolls für den Probanden mit physischer Demonstration bei jedem Nachuntersuchungsbesuch

Schulung der Operateure:

Der Operator und der Assistent, die intraorale PDT-Therapie durchführen und assistieren, werden gemäß Studie im Protokoll geschult.

Therapeutisches Monitoring der PDT:

Die Stelle der PDT-Anwendung wird kontinuierlich auf jegliches Unbehagen, Exazerbation oder Vergrößerung der Läsion, Ulzeration, Erythem, Brennen, Schmerzen (Anstieg der NRS-Scores NRS≥8) oder Reaktion auf PS während der Therapie und während der Nachbeobachtung evaluiert.

Folgende Optionen werden während der PDT-Therapie in Betracht gezogen:

Stoppen/Verschieben der Behandlung. Probanden werden befragt, um mögliche unerwünschte Wirkungen zu erfahren, die sie nach Beginn der PDT-Behandlung spüren könnten.

Therapeutisches Monitoring von Calcipotriol (0,005%)-Salbe:

Die Stelle der Calcipotriol-Anwendung wird kontinuierlich auf jegliches Unbehagen, Exazerbation oder Vergrößerung der Läsion, Ulzeration, Erythem, Brennen, Schmerzen (Anstieg der NRS-Scores – Differenz von NRS≥5 zum vorherigen Besuch) oder Entwicklung jeglicher Reaktion auf Calcipotriol (0,005%) während der Anwendung und während der Nachbeobachtung evaluiert.

Folgende Optionen werden während der Calcipotriol (0,005%)-Therapie in Betracht gezogen:

Stoppen/Verschieben der Anwendung. Probanden werden befragt, um mögliche unerwünschte Wirkungen zu erfahren, die sie nach Anwendung von Calcipotriol (0,005%) spüren könnten.

Protokollabweichung: Wenn Probanden Exazerbation oder Vergrößerung der Läsion, Ulzeration, Erythem, Brennen, Schmerzen (Anstieg der NRS-Scores – Differenz von NRS≥5 zum vorherigen Besuch) haben oder eine Reaktion auf PS/Calcipotriol (0,005%) entwickeln, werden sie von der Studie ausgeschlossen.

Wenn/falls Probanden während der Nachbeobachtung Veränderungen entwickeln, die auf Malignität verdächtig sind (Erosion, Ulzeration, Induration, exophytisches Wachstum), werden sie einer Inzisionsbiopsie unterzogen, um maligne Veränderungen auszuschließen, und gemäß institutionellem Protokoll für orale maligne Läsionen durch Überweisung an IRCH behandelt.

5.6 Dosierungen des Medikaments Alle Probanden in den drei Gruppen erhalten die gleiche standardmäßige konventionelle nicht-invasive Behandlung, die für OL gemäß aktueller wissenschaftlicher Evidenz empfohlen wird. Topische PDT verwendet Toluidinblau 2,5% als Photosensibilisator für PDT, und Calcipotriol-Salbe (0,005%) wird verwendet.

5.7 Behandlungsdauer Die PDT und topische Calcipotriol-Therapie werden gemäß oben genanntem Protokoll verabreicht. Da OL ein Risiko der malignen Transformation haben, werden alle Probanden in der Studiengruppe gemäß Standardprotokoll unter regelmäßiger Nachbeobachtung gehalten.

5.8. Untersuchungen spezifisch im Zusammenhang mit Projekten

Studienverfahren:

Ein strukturierter Fragebogen wird verwendet, um medizinische Vorgeschichte, Krankengeschichte der aktuellen Erkrankung und Symptome etc. zu erfassen, gefolgt von klinischer/körperlicher Untersuchung der Probanden zur Diagnose oraler Leukoplakie gemäß Van-der-Wall-Klassifikation von OL.

Klinische Evaluation:

• Extraorale Untersuchung: Auf Ulkus, Abszess, Sinus, Fistel, Narben, Nasennebenhöhlenentzündung, Lähmungen, Tics, Dystonien, Gesichtsasymmetrie, Nasenobstruktion
• Gesichtsschwellung: Ort, Größe, Farbe, Konsistenz, Kontur, Empfindlichkeit
• Zervikale Lymphknoten: Ort, Größe, Konsistenz, Kontur, Empfindlichkeit
• Intraorale Untersuchung:

Anamnese der weißen Läsion Ort, Beginn, Farbe, Textur, Induration, Verlauf, Brennen, Trismus, Dysphagie, schlechte Mundhygiene, Dauer (Monate), Schmerz (NRS 0-10), Brennen (NRS 0-10), Blutung, Schwellung, Xerostomie, scharfe Zähne, frühere Behandlungen für OL Anamnese oraler Gewohnheiten: Typ, Menge, Häufigkeit/Tag, Dauer in Monaten, aktueller Status und Abstinenzzeitraum.

Alle Probanden erhalten eine kurze verhaltensbezogene Beratung zur Gewohnheitsbeendigung gemäß nationalen Richtlinien und Abteilungsprotokoll Intraorale Untersuchung anderer Gewebe: Mukogingivalgewebe, Zähne, Parodontium, Okklusion

Probensammlung für pro-onkogene Speichelzytokine IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF vor und nach Therapie:

Vier sterile PVA-ophthalmologische Schwämme (Merocel) werden verwendet, um Proben oraler Sekrete für die vier Zytokinstudien von der oralen Bukkalmukosa zu sammeln. Dies ist eine nicht-invasive Methode und macht sie orts-spezifisch, was ein Vorteil gegenüber anderen Serum- und Speichelbestimmungen ist. Dieses Verfahren wird für Vor- und Nachtherapie während der Nachbeobachtung durchgeführt. Die Probanden werden gebeten, mindestens 2 Stunden vor der Probennahme auf Essen, Trinken und Mundspülungen zu verzichten. Die Schwämme werden mit steriler physiologischer Kochsalzlösung vorbefeuchtet, ohne Reibung oder Bewegung für 1 Minute mit der Läsion/Bukkal mukosa in Kontakt gehalten und dann sofort in sterilen Behältern bei -80 °C bis zur weiteren Analyse durch ELISA gelagert. Eine fotografische und klinische Aufzeichnung der Probenstelle wird mit dem Patientenprotokoll für zukünftige Referenz aufbewahrt.

Quantifizierung der pro-onkogenen Speichelzytokinspiegel (IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF) durch ELISA (pg/ng pro ml) Die ophthalmologischen Schwämme (Merocel) werden 10 Minuten bei Raumtemperatur aufgetaut. Schwämme werden dann in ein Mikrozentrifugenröhrchen mit einem 0,2-μm-Filter (SpinX-Zentrifugenröhrchen) eingefügt, durch Zugabe von 300 μl Extraktionspuffer equilibriert und für 30 Minuten bei 4 °C inkubiert, gefolgt von Zentrifugation bei 4 °C für 30 Minuten bei 14.000 U/min. Nach der Zentrifugation wird der resultierende Überstand für die Quantifizierung der (IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF)-Spiegel durch ELISA-Methode mit kommerziell erhältlichen Kits gesammelt. Der Überstand wird bei -80 °C bis zur Verwendung gelagert.

Ein monoklonaler Antikörper gegen die Antigene (IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF) wurde vorab auf die Wells der mitgelieferten Mikrotiterstreifen aufgebracht. Antigene in der Probe oder dem Standard werden mit den Platten inkubiert, um die Bindung von Antigenen an den Antikörper zu ermöglichen. Dies wird gefolgt von der Zugabe eines primären monoklonalen Anti-(IL6, TNF-α, PCNA, Survivin und VEGF)-Antikörpers, der jeweils in den jeweiligen Mikrotiterplatten mit Biotin konjugiert ist. Ein Avidin-HRP-konjugierter Antikörper, spezifisch für den primären Antikörper, wird dann zu den Wells hinzugefügt. Nach Inkubation und anschließendem Waschen, um ungebundene Antikörper-Enzymreagenzien zu entfernen, wird ein TMB-One-Step-Substratreagenz, das mit HRP reagiert, zu den Wells hinzugefügt. Die Farbentwicklung wird durch Zugabe von Säure gestoppt, und die Absorption wird bei 450 nm gemessen. Eine Referenzkurve wird durch Auftragen der verschiedenen Konzentrationen von Standardproben gegen Absorption erhalten, und die Antigenspiegel in getesteten Proben werden durch ihre Standardkurve berechnet.

Unerwünschte Ereignisse Oraler Schmerz: Die numerische Rating-Skala (NRS) ist ein Schmerz-Screening-Tool, das üblicherweise verwendet wird, um die Schmerzschwere in diesem Moment unter Verwendung einer 0-10-Skala zu bewerten, wobei null "kein Schmerz" und 10 "der vorstellbar schlimmste Schmerz" bedeutet. Der Patient wird gebeten, die Zahl zwischen 0 und 10 zu kreisen, die am besten zur Schmerzintensität passt. In vielen klinischen Umgebungen wird Schmerz regelmäßig in der ambulanten Versorgung mit der NRS bewertet; diese Scores werden in der elektronischen Patientenakte (EPA) aufgezeichnet, was Forschern und Klinikern ermöglicht, die Schmerzintensität über die Zeit zu verfolgen (70). Ein initialer NRS-Score wird bei der Aufnahme in die Studie erhoben. Nachfolgende NRS-Scores sowie die Wahrnehmung des Patienten der Veränderung seines Schmerzes seit der letzten Messung (d.h. "viel weniger", "etwas weniger", "etwa gleich", "etwas mehr" oder "viel mehr") werden zu Studienbeginn und bei jedem Besuch des PDT/Calcipotriol-Protokolls und anschließender Nachbeobachtung an Tag 7, Tag 14, Tag 21, Tag 28 und Tag 120 nach Behandlung aufgezeichnet. Jeder NRS-Score wird auf einer neuen, unmarkierten Skala gemacht. Patienten dürfen ihre vorherigen Scores nicht einsehen.

Orale brennende Empfindung: Das gleiche Verfahren mit NRS-Skala wird für die Bewertung der oralen brennenden Empfindung befolgt Allergische Reaktion: Alle Probanden werden gebeten, jegliche lokale/systemische allergische Reaktion, die aufgrund der Interventionen wie Rötung und Schwellung durch den Photosensibilisator Toluidinblau, mukosale oder Hautreaktionen durch Calcipotriol auftritt, dem Untersucher jederzeit während der Studie sofort zu melden. Die Interventionen werden zurückgezogen, und Abhilfemaßnahmen werden sofort eingeleitet, und das unerwünschte Ereignis wird gemäß institutionellem Protokoll aufgezeichnet und gemeldet.

Maligne Veränderung: Jegliche Veränderung der Läsion an der Behandlungsstelle oder anderen Bereichen der Mundhöhle zu jeder Zeit der Studie, die verdächtig/offensichtlich für maligne Veränderung ist (Ulzeration, Induration), wird einer Biopsie unterzogen und nach Bestätigung von der Studie ausgeschlossen. Rezidiv: Jegliches Wiederauftreten der Läsion an der Behandlungs- und Bewertungsstelle vii. Patiententagebuch: Aufzeichnung von Schmerz, brennender Empfindung, Gewohnheitsstatus, Größe der Läsion (Zunahme/Abnahme/Verschwinden/Rezidiv) Allergie, Rötung, Schwellung und verpasste Medikationen) Alle Probanden werden gebeten, Häufigkeit, Dauer und verschlimmernde Faktoren von Schmerz und brennender Empfindung aufzuzeichnen. Status der Gewohnheit, deren aktueller Gebrauch, Konsumhäufigkeit, Abstinenzzeitraum werden ebenfalls in dem den Patienten zur Verfügung gestellten Diagramm aufgezeichnet. Der Patient wird angeleitet, Selbstuntersuchung der Läsion durchzuführen, und jegliche Zunahme oder Abnahme der Größe wird in dem im Tagebuch bereitgestellten Diagramm notiert. Baseline-Scores werden vor Randomisierung aufgezeichnet, um Verzerrung in der Bewertung durch den Untersucher zu verhindern. Scores werden bei jeder Sitzung, nach Behandlung nach 1 Woche, 2 Wochen, 3 Wochen, 4 Wochen und 12 Wochen vom gleichen Untersucher für beide Gruppen aufgezeichnet.

viii. Ausschlusskriterien: Wenn ein Patient die Einwilligung nach Beginn der Behandlung zurückzieht/es eine allergische Reaktion/maligne Veränderung/Exazerbation von Schmerz und brennender Empfindung gibt, die nicht durch Anästhetika, Analgetika, Antiseptika kontrolliert wird (NRS ≥ 8), dann wird der Proband von der Studie ausgeschlossen.

Statistische Analyse:

Daten werden gemäß vorbereitetem Protokoll in ein Excel-Blatt eingegeben. Baseline-Charakteristika werden zwischen den Gruppen mit Chi-Quadrat-Test (kategoriale Variablen) und ungepaartem t-Test/Wilcoxon-Rang-Test (kontinuierliche Variablen) verglichen. Sowohl Intention-to-Treat- als auch Per-Protokoll-Analyse werden für das primäre Ergebnis durchgeführt. Das primäre Ergebnis, die Rate des kompletten Ansprechens, wird zwischen den Gruppen mit Z-Test für zwei Anteile verglichen. Fishers Exakter Test wird für die Analyse unerwünschter Ereignisse verwendet. Komplettes Ansprechen und Zeit bis zum Rezidiv werden zwischen den Gruppen mit Kaplan-Meier-Kurve gefolgt von Log-Rank-Test verglichen. Ergebnisse werden als Differenz in Mitteln/Anteilen mit 95% Konfidenzintervall präsentiert, und p<0,05% wird als statistisch signifikant betrachtet.