Efectos beneficiosos del ejercicio y las dietas saludables sobre el músculo y el tejido adiposo

METODOLOGÍA:

Este estudio estará compuesto por 2 partes:

I - ESTUDIO DE SECCIÓN TRANSVERSAL El objetivo de esta sección es comparar hombres con diferentes composiciones corporales, distribución de grasa y capacidad de ejercicio con respecto a su biogénesis mitocondrial muscular, moléculas reguladoras del daño oxidativo y del flujo de energía, junto con su inflamación del tejido adiposo, expresión de adipoquinas y potencial termogénico.

Criterios de inclusión :

• sexo masculino
• edad 25 - 50 años
• IMC de 20 - 35 kg/mt2
• indicación de cirugía de una hernia inguinal

Criterio de exclusión:

• diabetes mellitus
• déficits neuromusculares o neurológicos crónicos que impiden la actividad física normal
• fumar mucho (> 5 cigarrillos por día)
• ingesta de alcohol > 30 g/día
• enfermedades crónicas tales como cáncer, VIH-SIDA, afecciones renales, pulmonares, cardíacas o hepáticas.

Antes de la operación y tras firmar un consentimiento informado por escrito, se realizará la siguiente valoración:

1. Historial médico incluyendo ingesta de medicamentos y examen físico completo.
2. Recordatorio dietético de ingesta habitual y cálculo de la ingesta de AGEs.
3. Evaluación periódica de la actividad física utilizando el Cuestionario Internacional de Actividad Física
4. Antropometría (altura, peso, circunferencia de la cintura)
5. Toma de muestras de sangre en ayunas para determinaciones de rutina (hemoglobina, lipoproteínas, creatinina, protrombina, TSH), concentraciones de AGEs (CML) ácidos grasos libres, adiponectina y 8-Isoprostanes.
6. Muestreo de suero en ayunas y posterior a la glucosa para mediciones de glucosa e insulina, y cálculo de la evaluación del modelo de homeostasis (HOMA-IR) y el índice de Matsuda para la determinación de la sensibilidad a la insulina periférica.
7. Calorimetría indirecta en reposo y ejercicio para estimar el gasto energético en reposo, el cociente respiratorio y el VO2 máx.
8. Fuerza muscular de la mano y cuádriceps
9. Densitometría de energía de rayos X dual (DEXA) para la estimación de la composición corporal
10. Tomografía computarizada de la región abdominal a nivel de L4 para la medición de las áreas de grasa visceral y subcutánea y la estimación de la infiltración de grasa hepática.
11. Análisis de intensidad de ultrasonido en ecografía de muslo indicando infiltración de grasa muscular. Después de la evaluación inicial, los sujetos serán clasificados como con o sin síndrome metabólico, de acuerdo con las pautas de las guías internacionales, para un análisis posterior de los datos.

Unos días después, durante el procedimiento quirúrgico, se obtendrá una muestra de tejido muscular (aproximadamente 200 mg de músculo oblicuo interno del abdomen) para la medición de:

1. tipo de fibra
2. Expresión del ácido ribonucleico mensajero (ARNm) de PGC-1-alfa, SIRT-1, UCP-3 y AMPK
3. Densidad mitocondrial mediante la medición de la actividad de mitDNA y Citocromo C
4. Daño oxidativo (8-oxodG, CML y RAGE).

Durante la misma operación, también se obtendrán 2 muestras de tejido adiposo, una subcutánea (en el sitio de la incisión) y otra preperitoneal (en el saco inguinal), para estudios in vitro:

1. Expresión de UCP1 y marcador inflamatorio (interleucina 6, 1ß, CCL2) en adipocitos maduros
2. Perfil inflamatorio y potencial adipogénico (expresión de lipoproteína lipasa, PPAR gamma y adiponectina) en preadipocitos cultivados
3. Potencial adipogénico y perfil de expresión inflamatoria de células adiposas LS14 expuestas a medios acondicionados de explantes de tejido adiposo.

Una pequeña parte de estas muestras de tejido adiposo se colocarán en formaldehído, se fijarán y se tiñerán con H.E para la estimación histológica del tamaño de las células de los adipocitos.

II - ESTUDIO DE INTERVENCIÓN Esta sección pretende demostrar los efectos de una dieta mediterránea baja en AGE y/o ejercicio, sobre el perfil metabólico del músculo esquelético y las características adipogénicas/inflamatorias de los adipocitos.

Criterios de inclusión:

• Hombres y mujeres con sobrepeso u obesos
• Edades 25 - 50 años
• Interés en perder peso.

Criterio de exclusión:

• fluctuaciones de peso (> 3 k en los últimos 3 meses)
• diabetes mellitus
• enfermedades neuromusculares o neurológicas crónicas
• fumar mucho (> 5 cigarrillos por día)
• ingesta de alcohol > 30 g/día
• enfermedades crónicas tales como cáncer, VIH, afecciones renales, pulmonares, cardíacas o hepáticas.

Se invitará a los sujetos a participar en un ensayo de dieta mediterránea baja en AGE y/o ejercicio físico durante 3 meses. Después de firmar un consentimiento informado por escrito, los sujetos serán asignados a una de estas intervenciones, que serán seleccionadas al azar, y se realizará la siguiente evaluación, al inicio del estudio y después de 3 meses de intervención:

1. Historial médico y de toma de medicamentos y examen físico completo.
2. Recordatorio dietético de ingesta habitual y cálculo de la ingesta de AGEs.
3. Cuestionario de actividad física (IPAQ)
4. Antropometría (altura, peso, circunferencia de la cintura)
5. Toma de muestras de sangre en ayunas para determinaciones de rutina (hemoglobina, lipoproteínas, creatinina, protrombina y TSH), concentraciones de AGEs (CML), ácidos grasos libres, adiponectina, 8-Isoprostanos y suero para estudios de tejido adiposo in vitro (ver más abajo).
6. Muestreo de sangre en ayunas y post glucosa para mediciones de glucosa e insulina, y cálculo de HOMA-IR y el Índice de Matsuda para determinación de sensibilidad periférica a la insulina.
7. Densitometría de energía de rayos X dual (DEXA) para la estimación de la composición corporal
8. Tomografía computarizada de la región abdominal a nivel L4 para medir las áreas de grasa visceral y subcutánea y estimar la infiltración de grasa hepática
9. Calorimetría indirecta en reposo y ejercicio para estimar el gasto energético en reposo, el cociente respiratorio y el VO2 máx.
10. Fuerza muscular de la mano y cuádriceps
11. Análisis de intensidad de ultrasonido en muslo que indica infiltración de grasa muscular
12. Biopsia del músculo cuádriceps guiada por ultrasonido para medir la densidad mitocondrial (mitDNA) y la expresión de PGC-1