Efeitos benéficos do exercício e dietas saudáveis ​​no tecido muscular e adiposo

METODOLOGIA:

Este estudo será composto por 2 partes:

I - ESTUDO TRANSVERSAL O objetivo desta seção é comparar homens com diferentes composições corporais, distribuição de gordura e capacidade de exercício em relação à biogênese mitocondrial muscular, dano oxidativo e moléculas reguladoras do fluxo de energia, juntamente com a inflamação do tecido adiposo, expressão de adipocinas e potencial termogênico.

Critério de inclusão :

• sexo masculino
• idade 25 - 50 anos
• IMC de 20 - 35 kg/mt2
• indicação de cirurgia de hérnia inguinal

Critério de exclusão:

• diabetes melito
• déficits neuromusculares ou neurológicos crônicos que impedem a atividade física normal
• tabagismo pesado (> 5 cigarros por dia)
• ingestão de álcool > 30 g/dia
• doenças crônicas como câncer, HIV-AIDS, condições renais, pulmonares, cardíacas ou hepáticas.

Antes da operação e após a assinatura de um consentimento informado por escrito, será realizada a seguinte avaliação:

1. Histórico médico, incluindo ingestão de medicamentos e exame físico completo.
2. Recordatório dietético da ingestão habitual e cálculo da ingestão de AGEs.
3. Avaliação da atividade física regular usando o Questionário Internacional de Atividade Física
4. Antropometria (altura, peso, circunferência da cintura)
5. Amostragem de sangue em jejum para determinações de rotina (hemoglobina, lipoproteínas, creatinina, protrombina, TSH), concentrações de AGEs (CML), ácidos graxos livres, adiponectina e 8-isoprostanos.
6. Amostragem de soro em jejum e pós-glicemia para dosagens de glicose e insulina e cálculo do Homeostasis Model Assessment (HOMA-IR) e do Índice de Matsuda para determinação da sensibilidade periférica à insulina.
7. Calorimetria indireta em repouso e exercício para estimativa do gasto energético em repouso, quociente respiratório e VO2 máx.
8. Força de preensão palmar e quadríceps
9. Densitometria de energia de raios-X duplos (DEXA) para estimativa da composição corporal
10. Tomografia computadorizada da região abdominal no nível L4 para medição das áreas de gordura visceral e subcutânea e estimativa da infiltração de gordura no fígado.
11. Análise da intensidade do ultrassom na ultrassonografia da coxa indicando infiltração de gordura muscular. Após a avaliação inicial, os sujeitos serão classificados como com ou sem síndrome metabólica, de acordo com as diretrizes internacionais, para posterior análise dos dados.

Alguns dias depois, durante o procedimento cirúrgico, uma amostra de tecido muscular (aproximadamente 200 mg de oblíquo interno do abdome) será obtida para medição de:

1. tipo de fibra
2. Expressão do ácido ribonucleico mensageiro (mRNA) de PGC-1-alfa, SIRT-1, UCP-3 e AMPK
3. Densidade mitocondrial por medição da atividade do mitDNA e do citocromo C
4. Dano oxidativo (8-oxodG, CML e RAGE).

Na mesma operação, também serão obtidas 2 amostras de tecido adiposo, uma subcutânea (no local da incisão) e outra pré-peritoneal (no saco inguinal), para estudos in vitro:

1. Expressão de UCP1 e marcadores inflamatórios (interleucina 6, 1ß, CCL2) em adipócitos maduros
2. Perfil inflamatório e potencial adipogênico (expressão de lipoproteína lipase, PPAR gama e adiponectina) em cultura de pré-adipócitos
3. Potencial adipogênico e perfil de expressão inflamatória de células adiposas LS14 expostas a meios condicionados de explantes de tecido adiposo.

Uma pequena parte dessas amostras de tecido adiposo será colocada em formaldeído, fixada e corada com H.E para estimativa histológica do tamanho das células dos adipócitos.

II - ESTUDO DE INTERVENÇÃO Esta secção pretende demonstrar os efeitos de uma dieta mediterrânica de baixo AGEs e/ou exercício, sobre o perfil metabólico do músculo esquelético e as características adipogénicas/inflamatórias dos adipócitos.

Critério de inclusão:

• Homens e mulheres com sobrepeso ou obesos
• Idade 25 - 50 anos
• Interesse em perder peso

Critério de exclusão:

• flutuações de peso (> 3 k nos últimos 3 meses)
• diabetes melito
• doenças neuromusculares ou neurológicas crônicas
• tabagismo pesado (> 5 cigarros por dia)
• ingestão de álcool > 30 g/dia
• doenças crônicas como câncer, HIV, doenças renais, pulmonares, cardíacas ou hepáticas.

Os indivíduos serão convidados a participar de um experimento usando uma dieta mediterrânea de baixo AGEs e/ou exercício físico durante 3 meses. Após a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido, os sujeitos serão alocados para uma dessas intervenções, que serão selecionadas aleatoriamente, e será realizada a seguinte avaliação, no início e após 3 meses de intervenção:

1. Histórico médico e de ingestão de medicamentos e exame físico completo.
2. Recordatório dietético da ingestão habitual e cálculo da ingestão de AGEs.
3. Questionário de atividade física (IPAQ)
4. Antropometria (altura, peso, circunferência da cintura)
5. Amostragem de sangue em jejum para determinações de rotina (hemoglobina, lipoproteínas, creatinina, protrombina e TSH), concentrações de AGEs (CML), ácidos graxos livres, adiponectina, 8-isoprostanos e soro para estudos in vitro de tecido adiposo (ver abaixo).
6. Amostragem de sangue em jejum e pós-glicemia para medições de glicose e insulina e cálculo de HOMA-IR e Índice de Matsuda para determinação da sensibilidade periférica à insulina.
7. Densitometria de energia de raios-X duplos (DEXA) para estimativa da composição corporal
8. Tomografia computadorizada da região abdominal no nível L4 para medição das áreas de gordura visceral e subcutânea e estimativa da infiltração de gordura no fígado
9. Calorimetria indireta em repouso e exercício para estimativa do gasto energético em repouso, quociente respiratório e VO2 máx.
10. Força de preensão palmar e quadríceps
11. Análise da intensidade do ultrassom na coxa indicando infiltração de gordura muscular
12. Biópsia do músculo quadríceps guiada por ultrassom para medir a densidade mitocondrial (mitDNA) e a expressão de PGC-1