Seguridad de la infusión de MSC autólogas para tratar la epilepsia (AMSCDRSE)

El objetivo principal de este ensayo clínico de fase 1 fue evaluar la seguridad de una aplicación de células madre mesenquimales (MSC) autólogas como terapia para la epilepsia sintomática resistente a los medicamentos en un estudio de un centro. Es bien sabido que la epilepsia sintomática farmacorresistente es un trastorno que invalida dramáticamente para el cual las terapias estacionarias y ambulatorias aplicadas no tienen un efecto clínico real. Por lo tanto, se necesitan nuevos enfoques para alcanzar la remisión, detener la progresión de la enfermedad y aumentar la calidad de vida de los pacientes. Para este estudio, se incluyeron en el estudio pacientes adultos (18-60 años) (pts) de ambos sexos que padecían epilepsia sintomática resistente a los medicamentos con convulsiones frecuentes (>5 eventos por mes). La farmacorresistencia se definió por la falta de una respuesta clínica evidente (es decir, sin disminución en la frecuencia de las convulsiones o reducción en la progresión de la enfermedad) de los pacientes con epilepsia sintomática a carbamazepina, ácido valproico, topiramato, lamotrigina o fenobarbital (es decir, anti- medicamentos epilépticos [FAE]) como monoterapias y en diferentes combinaciones durante el año calendario anterior. Los criterios de exclusión fueron la negativa del paciente a participar, reacciones desfavorables a la terapia, afecciones inflamatorias del SNC, psicosis crónicas, tumores del SNC, recaídas de enfermedades somáticas o neurológicas crónicas y sangre positiva para hepatitis B o C o VIH. El plan incluía la inclusión de 30 pts en el grupo de estudio y 30 pts en el grupo de control durante un período de 5 años. Los pacientes se aleatorizaron al tratamiento estándar con FAE (grupo de control) o FAE más células madre mesenquimales autólogas (MSC, grupo de estudio). Las MSC se obtuvieron de muestras de médula ósea del mismo paciente y se purificaron y expandieron ex vivo en un laboratorio especializado en biotecnología celular. Las MSC se caracterizaron mediante inmunofenotipado como células CD90+CD105+CD45-CD34. Después de 3 semanas de cultivo in vitro, una parte de las MSC se cultivó adicionalmente durante 7 días en medio de proliferación Neurocult-XF para obtener MSC neuroinducidas. La neuroinducción se demostró por la presencia de los marcadores genéticos nestina y enolasa neuroespecífica. Finalmente, se recogieron 40-101 x 106 MSC autólogas cultivadas y 2,7 ​​- 8,0 x 106 MSC autólogas neuroinducidas, se resuspendieron en solución salina que contenía un 5 % de suero sanguíneo autólogo para inyección y, tras una medición de la viabilidad (98 % de células), se transfirieron al centro clínico.

Los pacientes del grupo de estudio recibieron una inyección intravenosa administrada lentamente (durante 5 a 10 minutos) de CMM autólogas expandidas ex vivo en un volumen de 20 ml, y 5 a 7 días después, cada paciente del grupo de estudio recibió una inyección adicional administrada lentamente. inyección endolumbal de las MSC neuroinducidas en un volumen de 5 ml. Se evaluaron tanto las reacciones desfavorables a las inyecciones de MSC (más de un día después de la realización de los procedimientos) como los efectos clínicos tempranos (hasta un mes) y tardíos (hasta 6 meses), incluidas las complicaciones. Las reacciones desfavorables a las inyecciones de MSC incluyeron dolor local o hemorragia en el lugar de la inyección y reacciones sistémicas del sistema nervioso central (SNC, es decir, hipertermia, fatiga y mialgia). Se examinaron las posibles reacciones sistémicas desfavorables posteriores del SNC y del sistema vascular, incluidas las complicaciones infecciosas y no infecciosas de la progresión de la enfermedad a controlar. Todos los hechos fueron documentados en tarjetas médicas. En los casos en que estos eventos presentaban características de peligrosidad, se declaraban a los miembros de la junta de seguimiento (comité ético del centro) para la evaluación de la exclusión de los pacientes del estudio o la terminación del estudio clínico.

También se evaluaron los posibles efectos beneficiosos de la terapia basada en MSC en los pacientes del grupo de estudio. Estos efectos se detectaron a través de observaciones clínicas en puntos de tiempo de terapia seleccionados (es decir, 3 y 12 meses después de la aplicación de la terapia basada en MSC) y mediciones de electroencefalografía antes y un año después de la terapia. Para determinar los posibles cambios en la progresión de la enfermedad, se evaluaron signos de deterioro cognitivo, trastornos del comportamiento y cambios en las características y frecuencia de las crisis. Para la evaluación del deterioro cognitivo se utilizó el Mini-Mental State Examination. El efecto minusválido de la enfermedad en la vida diaria se puntuó utilizando la Escala de Minusvalía Subjetiva de la Epilepsia. La ansiedad estado y la depresión se evaluaron mediante la Escala de ansiedad y depresión hospitalaria. Los cambios en las características y la frecuencia de las convulsiones se evaluaron utilizando la Escala Nacional de Severidad de las Convulsiones del Hospital. Los procesos de atención voluntaria y desempeño se estudiaron con tablas de Schulte según los métodos de Kraepelin. Se utilizaron tablas de Schulte para estudiar los tiempos de reacción sensoriomotora y la distribución y estabilidad de la atención. Se utilizó el método "Cuenta de Kraepelin" para estudiar la salud, la fatiga y la estabilidad de la atención. La evaluación de la memoria a corto plazo se realizó mediante el método de memorización de 10 palabras; este método tiene como objetivo determinar el volumen y la velocidad de la memoria oral-aural.

Las principales características clínicas que se utilizan para el seguimiento de la enfermedad fueron las respuestas "sí" o "no" (con respecto a la terapia), la frecuencia de las convulsiones (por mes) y la remisión de la enfermedad al principio (3 meses) y al final (12 meses y más). puntos después de la terapia. Para evaluar las respuestas parciales a la terapia, se evaluó el número de pacientes que exhibieron reducciones del 50% en la frecuencia de las convulsiones. El tipo de convulsión (es decir, tipos de convulsiones tónico-clónicas generalizadas, parciales complejas, parciales simples y múltiples) también se evaluó junto con los cambios en el tipo de convulsiones durante el curso del tratamiento.

Los registros de electroencefalografía se realizaron al ingreso y durante todo el período de seguimiento utilizando un sistema de encefalografía Mizar EEG 201 con registro de biopotencial de 16 puntos del cuerpo según el esquema "10-20". Las ondas eléctricas alfa, beta, theta y delta observadas se analizaron en segmentos de 3 minutos (con nuevos cálculos para cada segmento de 1 minuto) antes (al ingreso) y 1 año después de la aplicación de MSC. También se calculó la frecuencia máxima de las ondas alfa. Tanto el estado espontáneo como el estado posterior a la carga de la sonda (hiperventilación y fotoestimulación) fueron evaluados para cada paciente. Las características de las electroencefalografías (EEG) se atribuyeron a alteraciones corticales locales y difusas. Evaluamos el índice de paroxismalidad, cantidades de picos locales y generalizados de ondas epileptiformes por minuto, frecuencia máxima de actividad EEG, índice de actividad lenta y puntos resumidos de signos de patología EEG. Los EEG con actividad epileptiforme incluyeron picos, picos de ondas lentas y picos de gran amplitud. Las grabaciones de EEG se realizaron sobre la base de criterios estándar y además propuestos. Todas las evaluaciones se realizaron para los pacientes en los grupos de control y de estudio, y los datos obtenidos se compararon para determinar las posibles diferencias debidas a la terapia basada en MSC realizada adicionalmente. La terapia de un paciente finalizaba en cualquier momento si se observaban reacciones desfavorables inmediatas a las inyecciones de MSC. Las observaciones finales de los pacientes incluyeron evaluaciones clínicas y de EEG a los 12 meses (o más) después de la aplicación de la terapia basada en MSC. Los datos resumidos de los pacientes en los grupos de estudio y de control se recopilaron en una base de datos electrónica para su posterior análisis e interpretación.