간질 치료를 위한 자가 MSC 주입의 안전성 (AMSCDRSE)

이 1상 임상 시험의 주요 목표는 단일 센터 연구에서 약물 내성 증상성 뇌전증에 대한 치료법으로서 자가 중간엽 줄기 세포(MSC) 적용의 안전성을 평가하는 것이었습니다. 약물 내성 증상성 뇌전증은 고정 및 외래 치료를 적용해도 실질적인 임상 효과가 없는 극적으로 무효화되는 장애라는 것은 잘 알려져 있습니다. 따라서 관해에 도달하고, 질병 진행을 중단하고, 환자의 삶의 질을 높이려면 새로운 접근법이 필요합니다. 이 연구를 위해, 발작이 빈번한(매월 5회 초과) 약물 내성 증상성 간질을 앓고 있는 남녀의 성인(18-60세) 환자(pts)가 연구에 포함되었습니다. 약물 내성은 카바마제핀, 발프로산, 토피라메이트, 라모트리진 또는 페노바르비탈(즉, 항- 간질약[AED]) 단독 요법으로 이전 1년 동안 다른 조합으로. 제외 기준은 환자의 참여 거부, 치료에 대한 불리한 반응, CNS 염증 상태, 만성 정신병, CNS 종양, 만성 신체 또는 신경계 질환의 재발, B형 또는 C형 간염 또는 HIV에 대한 혈액 양성이었습니다. 이 계획에는 5년 동안 연구 그룹에 30점, 통제 그룹에 30점을 포함하는 것이 포함되었습니다. 환자는 AED(대조군) 또는 AED + 자가 간엽 줄기 세포(MSC, 연구 그룹)를 사용한 표준 치료에 무작위 배정되었습니다. MSC는 동일한 환자의 골수 샘플에서 얻었고 전문 세포 생명 공학 실험실에서 생체 외 정제 및 확장되었습니다. 중간엽 줄기세포는 CD90+CD105+CD45-CD34-세포로서 면역 표현형 분석에 의해 특성화되었습니다. in vitro에서 3주간 배양한 후 중간엽 줄기세포의 일부를 Neurocult-XF 증식 배지에서 7일간 추가 배양하여 신경유도 중간엽 줄기세포를 얻었다. 신경유도는 유전적 마커인 네스틴과 뉴런 특이적 에놀라아제의 존재에 의해 입증되었습니다. 마지막으로, 40-101 x 106개의 자가 배양 MSC 및 2.7 - 8.0 x 106개의 자가 신경 유도 MSC를 수확하고, 주사용 5% 자가 혈청을 함유하는 식염수에 재현탁하고, 생존율(98% 세포)을 측정한 후, 임상센터로.

연구 그룹의 환자들은 체외에서 확장된 자가 중간엽 줄기세포를 20ml 용량으로 천천히 전달(5-10분에 걸쳐) 정맥 주사로 1회 투여받았고, 5-7일 후에 연구 그룹의 각 환자는 추가로 천천히 전달되었습니다. 5ml 부피의 신경유도 중간엽 줄기세포의 내배부 주사. MSC 주사에 대한 불리한 반응(절차 수행 후 1일 이상)과 합병증을 포함한 초기(최대 1개월) 및 후기(최대 6개월) 임상 효과를 모두 평가했습니다. MSC 주사에 대한 불리한 반응에는 주사 부위의 국소 통증 또는 출혈 및 중추신경계의 전신 반응(CNS, 즉 고열, 피로 및 근육통)이 포함되었습니다. 제어할 질병 진행의 감염성 및 비감염성 합병증을 포함하여 나중에 CNS 및 혈관계의 잠재적인 불리한 전신 반응을 조사했습니다. 모든 사건은 의료 카드에 기록되었습니다. 이러한 사건이 위험한 특성을 나타내는 경우, 연구에서 환자를 제외하거나 임상 연구를 종료하는 평가를 위해 모니터링 위원회(센터의 윤리 위원회) 구성원에게 보고되었습니다.

또한 연구 그룹의 pts에서 MSC 기반 치료의 가능한 유익한 효과를 평가했습니다. 이러한 효과는 선택된 치료 시점(즉, MSC 기반 치료 적용 후 3개월 및 12개월)에서의 임상 관찰과 치료 전 및 치료 1년 후 뇌파 측정을 통해 감지되었습니다. 질병 진행의 가능한 변화를 결정하기 위해 인지 장애의 징후, 행동 장애, 발작 특성 및 빈도의 변화를 평가했습니다. 인지 장애 평가를 위해 Mini-Mental State Examination을 사용했습니다. 질병이 일상생활에 미치는 핸디캡 효과는 간질의 주관적 핸디캡 척도를 사용하여 점수화하였다. 상태불안과 우울은 병원 불안과 우울 척도를 사용하여 평가하였다. 발작 특성 및 빈도의 변화는 National Hospital Scale of Seizure Severity를 ​​사용하여 평가되었습니다. 자발적인 관심과 수행의 과정은 Kraepelin의 방법에 따라 Schulte 테이블로 연구되었습니다. Schulte 테이블은 감각 운동 반응 시간과 주의 분포 및 안정성을 연구하는 데 사용되었습니다. 건강, 피로 및 주의력의 안정성을 연구하기 위해 "Kraepelin의 계정" 방법이 사용되었습니다. 단기 기억력 평가는 10단어 암기 방식으로 진행하였다. 이 방법은 구강-청각 기억의 양과 속도를 결정하는 것을 목표로 합니다.

질병 모니터링에 사용되는 주요 임상 특성은 "예" 또는 "아니오" 응답(치료와 관련하여), 발작 빈도(매월), 초기(3개월) 및 후기(12개월 이상)의 질병 완화였습니다. 치료 후 포인트. 치료에 대한 부분 반응을 평가하기 위해 발작 빈도가 50% 감소한 환자의 수를 평가했습니다. 치료 과정 중 발작 유형의 변화와 함께 발작 유형(예: 전신 강직 간대 발작, 부분 복합 발작, 단순 부분 발작 및 다발성 발작)도 평가했습니다.

"10-20" 방식에 따라 16개의 신체 지점에서 생체전위 등록이 있는 Mizar EEG 201 뇌파 검사 시스템을 사용하여 입원 시 및 모니터링 기간 동안 뇌파 기록을 수행했습니다. 관찰된 전기적 알파, 베타, 세타 및 델타파는 MSC 적용 전(입원 시) 및 1년 후 3분 세그먼트(각 1분 세그먼트에 대한 추가 재계산 포함)에서 분석되었습니다. 알파파의 피크 주파수도 계산되었습니다. 자발 상태와 로딩 프로브 후 상태(과호흡 및 광자극)를 각 환자에 대해 평가했습니다. 뇌파 검사(EEG)의 특성은 국소 및 확산 피질 변경에 기인합니다. 우리는 발작 지수, 분당 간질파의 국소 및 일반 스파이크 양, EEG 활동의 최고 주파수, 느린 활동 지수, EEG 병리 징후 요약 포인트를 평가했습니다. 간질 활동이 있는 EEG에는 스파이크, 스파이크-느린 파동 및 고진폭 스파이크가 포함됩니다. EEG 기록은 표준 및 추가로 제안된 기준에 따라 수행되었습니다. 모든 평가는 대조군과 연구군의 pt에 대해 수행되었으며, 추가로 수행된 MSC 기반 요법으로 인한 잠재적인 차이를 확인하기 위해 얻은 데이터를 비교했습니다. MSC 주사에 대한 즉각적인 불리한 반응이 관찰되는 경우 환자의 치료는 언제든지 종료되었습니다. 환자의 최종 관찰에는 MSC 기반 요법을 적용한 후 12개월(또는 그 이상)에 임상 및 EEG 평가가 포함되었습니다. 제어 및 연구 그룹의 pts에 대한 요약 데이터는 추가 분석 및 해석을 위해 전자 데이터베이스에 수집되었습니다.